| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第6-12页 |
| 1．1 苯酚生产及含酚废水的危害 | 第6页 |
| 1．2 降解苯酚的各种方法 | 第6页 |
| 1．3 苯酚降解菌的种类 | 第6-7页 |
| 1．4 苯酚降解途径及相应基因 | 第7-9页 |
| 1．5 苯酚羟化酶及苯酚羟化酶基因同源性 | 第9-10页 |
| 1．6 基因工程菌的构建及应用前景 | 第10-11页 |
| 1．7 本工作的目的 | 第11-12页 |
| 第二章 材料与方法 | 第12-25页 |
| 2．1 材料 | 第12页 |
| 2．2 培养基及培养条件 | 第12-13页 |
| 2．3 常用溶液、缓冲液 | 第13-14页 |
| 2．4 仪器 | 第14-15页 |
| 2．5 DNA的提取 | 第15-17页 |
| 2．6 质粒DNA的转化 | 第17-19页 |
| 2．7 琼脂糖凝胶电泳 | 第19页 |
| 2．8 电洗脱法回收DNA片段 | 第19-20页 |
| 2．9 试剂盒法快速回收DNA片段 | 第20页 |
| 2．10 DNA的连接 | 第20-21页 |
| 2．11 DNA-DNA杂交 | 第21-24页 |
| 2．12 PCR扩增DNA片段 | 第24页 |
| 2．13 ABIDNA自动测序系统测定DNA序列 | 第24页 |
| 2．14 苯酚含量的测定 | 第24-25页 |
| 第三章 苯酚高效降解菌株的筛选及优化培养 | 第25-31页 |
| 3．1 土壤样品的采集 | 第25页 |
| 3．2 菌株的分离和初筛 | 第25-26页 |
| 3．3 苯酚降解细菌菌株的复筛 | 第26页 |
| 3．4 GXP04生长及降解条件的优化 | 第26-30页 |
| 3．5 讨论 | 第30-31页 |
| 第四章 GXP04菌株的鉴定 | 第31-40页 |
| 4．1 GXP04菌种初步鉴定 | 第31页 |
| 4．2 GXP04菌株的16SrDNA序列分析 | 第31-33页 |
| 4．3 PCR产物的连接与转化 | 第33-34页 |
| 4．4 16SrDNAPCR扩增产物的测序 | 第34-35页 |
| 4．5 GXP04菌株的16SrDNA序列同源性比较 | 第35-38页 |
| 4．6 讨论 | 第38-40页 |
| 第五章 苯酚羟化酶基因的部分克隆、序列分析和Southern杂交 | 第40-46页 |
| 5．1 PCR引物设计 | 第40-42页 |
| 5．2 PCR扩增及产物回收 | 第42页 |
| 5．3 PCR产物的连接与转化 | 第42-43页 |
| 5．4 苯酚羟化酶基因同源片段的序列测定 | 第43-44页 |
| 5．5 GXP04苯酚羟化酶基因片段同源性分析 | 第44-45页 |
| 5．6 讨论 | 第45-46页 |
| 第六章 苯酚羟化酶部分基因文库的构建和苯酶羟化酶基因的克隆 | 第46-52页 |
| 6．1 Southern blotting探针的制备 | 第46页 |
| 6．2 GXP04总DNA不同酶切的southcrn杂交 | 第46-47页 |
| 6．3 苯酚羟化酶基因部分文库的构建 | 第47-48页 |
| 6．4 基因文库的菌落原位杂交 | 第48页 |
| 6．5 菌落原位杂交阳性印迹的验证 | 第48-49页 |
| 6．6 外源DNA的测序及序列分析 | 第49-51页 |
| 6．7 讨论 | 第51-52页 |
| 第七章 总结 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
