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HBsAg与结核杆菌HSP70融合乙型肝炎DNA疫苗的基础研究

符号说明第1-6页
中文摘要第6-11页
英文摘要第11-17页
前言第17-72页
 第一部分: 结核杆菌HSP70真核表达质粒的构建和鉴定第21-30页
  实验材料第21-22页
  实验方法第22-26页
  实验结果第26-30页
 第二部分: HBsAg及其与结核杆菌HSP70融合表达质粒的构建和鉴定第30-48页
  实验材料第30-31页
  实验方法第31-39页
  实验结果第39-48页
 第三部分: HBsAg及其与结核杆菌HSP70融合表达质粒在真核细胞中的表达第48-62页
  实验材料第48-49页
  实验方法第49-56页
   1. 质粒的大量提取第49-50页
   2. 质粒转染HepG2细胞(或COS-7细胞)第50-51页
   3. HapG2细胞总RNA的提取第51-52页
   4. RT-PCR检测目的基因在转录水平的表达第52-54页
   5. 免疫细胞化学方法检测HBsAg的表达第54-55页
   6. ELISA检测HBsAg的表达第55-56页
  实验结果第56-62页
   1. 目的基因在转录水平表达的RT-PCR检测结果第56-57页
   2. 免疫细胞化学检测结果第57-60页
   3. 重组质粒在HepG2细胞和COS-7细胞中的表达第60-62页
 第四部分: HBsAg及其与结核杆菌HSP70融合表达质粒DNA免疫小鼠诱导其产生特异性免疫应答第62-72页
  实验材料第62页
  实验方法第62-65页
   1. 质粒大量提取和定量第63页
   2. 质粒DNA免疫小鼠第63页
   3. 抗-HBs抗体检测方法第63-64页
   4. 免疫小鼠脾细胞的制备第64页
   5. 免疫小鼠脾细胞HBsAg特异性CTL的检测(LDH释放法)第64-65页
   6. 免疫小鼠脾细胞IL-2、IFN-γ、IL-4分泌的检测第65页
  实验结果第65-72页
   1. 质粒纯度和含量测定结果第65-66页
   2. 免疫小鼠抗-HBs抗体反应检测结果第66-68页
   3. 质粒DNA免疫小鼠HBsAg特异性CTL活性第68页
   4. 质粒DNA免疫小鼠脾细胞体外诱导IL-2的分泌水平第68-69页
   5. 质粒DNA免疫小鼠脾细胞体外诱导IFN-γ的分泌水平第69-71页
   6. 质粒DNA免疫小鼠脾细胞体外诱导IL-4的分泌水平第71-72页
讨论第72-79页
参考文献第79-84页
结论第84-85页
本课题的创新点第85-86页
文献综述1: 乙型肝炎核酸疫苗的研究进展第86-96页
文献综述2: 分枝杆菌热休克蛋白的载体分子效应第96-104页
致谢第104-105页
攻读博士学位期间发表的学术论文及参加学术会议第105页

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