中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-34页 |
引言 | 第10-34页 |
1. 蓝藻及其特点 | 第11-13页 |
2. 蓝藻的光合作用 | 第13-19页 |
2.1 光合作用的基本概念 | 第13-15页 |
2.2 蓝藻光合作用的特点 | 第15-16页 |
2.3 研究光合作用的主要手段和方法 | 第16-19页 |
3. 蓝藻的遗传系统 | 第19-20页 |
3.1 蓝藻中的DNA | 第19页 |
3.2 蓝藻基因工程载体 | 第19-20页 |
4. 蓝藻的基因转移 | 第20-23页 |
5. 外源基因在蓝藻中的表达 | 第23-26页 |
5.1 为什么用蓝藻作宿主表达外源基因 | 第23-24页 |
5.2 表达载体 | 第24页 |
5.3 已在蓝藻中成功表达的外源基因 | 第24-26页 |
6. TNFα的性质和功能 | 第26-32页 |
6.1 简介 | 第26页 |
6.2 研究简史和现状 | 第26-27页 |
6.3 理化性质及分子结构 | 第27-29页 |
6.4 生物学效应 | 第29页 |
6.5 产生及制备 | 第29-30页 |
6.6 抗肿瘤机制 | 第30页 |
6.7 毒副作用和临床应用 | 第30-31页 |
6.8 检测 | 第31-32页 |
6.9 本实验室用蓝藻表达TNFα的研究进展 | 第32页 |
7. 热点与展望 | 第32-33页 |
8. 本研究的目的和内容 | 第33-34页 |
第二部分 材料与方法 | 第34-46页 |
1. 实验材料 | 第34-35页 |
2. 实验方法 | 第35-46页 |
2.1 穿梭表达载体的构建 | 第35-38页 |
2.2 蓝藻的转化 | 第38-40页 |
2.3 转基因藻的分子检测 | 第40-42页 |
2.4 转基因蓝藻的形态观察 | 第42-43页 |
2.5 转基因蓝藻的生理活性检测 | 第43-46页 |
2.5.1 生长曲线的测定 | 第43页 |
2.5.2 TNFα在转基因鱼腥藻中的表达 | 第43-44页 |
2.5.3 放氧光合活性的测定 | 第44页 |
2.5.4 室温吸收光谱的测定 | 第44-45页 |
2.5.5 低温荧光发射光谱的测定 | 第45页 |
2.5.6 动力学荧光测定 | 第45-46页 |
第三部分 实验内容与结果讨论 | 第46-79页 |
第一章 穿梭表达载体pMD-489-TNF的构建和转基因鱼腥藻的获得 | 第46-60页 |
1.1 穿梭表达载体pMD-489-TNF的构建 | 第46-47页 |
1.2 穿梭表达载体的鉴定 | 第47页 |
1.3 大肠杆菌中TNFα的放射免疫学检测 | 第47-48页 |
1.4 三亲接合转移和转基因蓝藻的筛选 | 第48-49页 |
1.5 转基因蓝藻的形态观察 | 第49-56页 |
1.5.1 光学显微镜观察 | 第49-52页 |
1.5.2 扫描电子显微镜观察 | 第52-54页 |
1.5.3 透射电子显微镜照片 | 第54-56页 |
1.6 转基因蓝藻的分子检测 | 第56-60页 |
1.6.1 DNA水平的检测 | 第56-57页 |
1.6.2 蛋白质水平的检测 | 第57-60页 |
第二章 转TNF鱼腥藻生理活性的检测和分析 | 第60-79页 |
2.1 生长曲线的测定 | 第60-62页 |
2.2 TNFα的表达随生长变化曲线 | 第62-64页 |
2.3 放氧光曲线 | 第64-66页 |
2.4 室温吸收光谱 | 第66-67页 |
2.5 低温荧光发射光谱 | 第67-69页 |
2.6 动力学荧光 | 第69-70页 |
2.7 光系统Ⅰ和光系统Ⅱ活性与TNFα表达的关系 | 第70-79页 |
结论和展望 | 第79-82页 |
参考文献 | 第82-91页 |
发表文章目录 | 第91-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
缩写表 | 第93-94页 |
作者简介 | 第94页 |