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柔红霉素高产菌种选育及其生物转化的研究

致谢第1-7页
缩写第7-8页
中文摘要第8-10页
英文摘要第10-13页
综述第13-41页
 第一部分 微生物菌种选育研究进展第13-29页
  1.1 特定化合物产生菌的筛选(微生物来源化合物的筛选)技术及策略第14-21页
   1.1.1 丰富培养和纯种分离第14-16页
   1.1.2 极端生态环境中筛选特定功能的微生物第16页
   1.1.3 用于菌种筛选的新靶位和模型第16-18页
   1.1.4 应用于新化合物筛选的微生物菌种筛选常用分析方法第18-20页
   1.1.5 根据系统分类学的知识进行菌种筛选第20页
   1.1.6 基于基因及分子技术的菌种筛选第20-21页
  1.2 微生物菌种改良的方法与研究进展第21-29页
   1.2.1 微生物突变育种第21-23页
   1.2.2 微生物代谢调节方式与基于生理代谢知识的菌种改良策略与方法第23-25页
   1.2.3 细胞技术以及基因工程技术在微生物菌种选育中的应用第25-29页
 第二部分 柔红霉素及阿霉素产生菌的研究进展第29-37页
  柔红霉素聚酮体代谢途径的研究第29-30页
  菌种选育第30页
  柔红霉素与阿霉素产生菌基因水平上的研究第30-37页
 参考文献第37-41页
论文正文第41-104页
 第一部分 柔红霉素高产菌种选育第41-71页
  第一章 核糖体工程技术在柔红霉素高产菌种选育中的应用第41-57页
   一、 前言第41-44页
   二、 材料与方法第44-49页
    (一)、 试验菌种第44页
    (二)、 试剂与溶液第44-45页
    (三)、 培养基第45页
    (四)、方法第45-49页
     1、 孢子悬浮液的制备第45-46页
     2、 链霉素对SIPI1482的最小抑制浓度(MIC)的测定第46页
     3、 链霉素抗性自发突变株的获得第46页
     4、 卡那霉素抗性自发突变株的获得第46页
     5、 种子液的制备第46页
     6、 发酵培养第46页
     7、 发酵产物的抽提与含量测定第46-47页
     8、 紫外诱变处理~[8]第47页
     9、 PCR反应条件及程序第47-49页
   三、 实验结果第49-54页
   四、 讨论第54-56页
   五、 参考文献第56-57页
  第二章 离子注入诱变育种在柔红霉素高产菌选育中的应用第57-71页
   一、 前言第57-61页
    1.1 低能离子注入与生物材料相互作用的基本原理第57-59页
    1.2 离子束注入诱变育种在微生物菌种选育中的应用第59-61页
   二、 试验材料和方法第61-62页
    2.1 菌种第61页
    2.2 培养基及其他材料第61页
    2.3 试验方法第61-62页
   三、 试验结果与讨论第62-69页
   四、 参考文献第69-70页
   第一部分小结第70-71页
 第二部分 柔红霉素生物转化研究第71-103页
  前言第71-72页
  第三章 耐柔红霉素的变铅青链霉菌突变株的选育第72-81页
   一、 材料与方法第72-75页
    (一)、 材料第72-73页
     1、 化学品和生化试剂第72页
     2、 菌种第72页
     3、 主要器材第72页
     4、 培养基与缓冲液第72-73页
    (二) 方法第73-75页
     1、 菌种的生长、维持和保藏第73-74页
     2、 TK-24菌株的诱变处理第74页
     3、 抗性突变株的师选第74-75页
     4、 抗性突变株的复证第75页
   二、 结果与讨论第75-81页
    (一) 结果第75-79页
    (二) 讨论第79-81页
  第四章 微生物转化法生产阿霉素基因工程菌的构建第81-103页
   一、 材料第81-85页
    (一) 化学品和生化试剂第81页
    (二) 菌种第81-82页
    (三) 质粒第82页
    (四) 培养基第82-83页
    (五) 缓冲液第83-85页
   二、 试验方法第85-94页
    (一) 菌种的培养,维持和保藏第85页
    (二) SIPI1482,S.C5,SIPI40141菌株染色体DNA分离纯化第85页
    (三) 质粒的分离第85-86页
    (四) 链霉菌原生质体的制备第86-87页
    (五) 大肠杆菌感受态细胞的制备第87页
    (六) 质粒转化第87-88页
    (七) 从电泳凝胶中回收DNA片段第88页
    (八) PCR反应的相关计算及其条件第88-89页
    (九) 链霉菌的培养发酵、产物的抽提方法第89页
    (十) DNA的酶切操作、连接第89-90页
    (十一) 带doxA基因系列重组质粒的构建第90页
    (十二) 基因工程重组菌对柔红霉素生物转化第90页
    (十三) 带pYG57质粒的N-18菌株与SIPI1482共发酵试验第90-94页
   三、 试验结果与讨论第94-103页
    1 PCR反应结果第94-97页
    2 带不同重组质粒工程菌对柔红霉素生物转化结果第97-98页
    3 pYG57/N-18菌株与SIPI1482菌株的共发酵试验第98页
    4 pYG57对SIPI1482M和SIPI1482菌株的转化、发酵及其稳定性第98-103页
 第二部分小结第103-104页
 第二部分参考文献第104页

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