| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略语 | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-24页 |
| ·链霉菌及其研究简介 | 第10-11页 |
| ·阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)简介 | 第11-15页 |
| ·阿维菌素生物合成基因簇 | 第11-12页 |
| ·阿维菌素生物合成 | 第12-14页 |
| ·白基因(whi) | 第14页 |
| ·灰黑色孢子色素合成基因簇 | 第14-15页 |
| ·聚酮化合物 | 第15-17页 |
| ·阿维菌素高产菌株育种和代谢工程的研究 | 第17-20页 |
| ·构建高产菌株 | 第18页 |
| ·提高特定组分的产率 | 第18-19页 |
| ·消除A组分 | 第18-19页 |
| ·消除b组分 | 第19页 |
| ·消除寡霉素组分 | 第19页 |
| ·添加前体物质增加阿维菌素的产量 | 第19-20页 |
| ·链霉菌双组分调控机制 | 第20-22页 |
| ·本课题研究的立论依据、目的、意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-37页 |
| ·菌株 | 第24页 |
| ·质粒与引物 | 第24-26页 |
| ·培养基与生化试剂 | 第26-29页 |
| ·实验方法 | 第29-37页 |
| ·链霉菌培养及菌种保藏 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的小量提取 | 第30页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的少量快速提取及检测 | 第30页 |
| ·链霉菌总DNA的提取 | 第30-31页 |
| ·氯化锂纯化DNA | 第31页 |
| ·酶连反应 | 第31页 |
| ·大肠杆菌和链霉菌的两亲本属间接合转移 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法)及转化 | 第32-33页 |
| ·DNA片段凝胶回收(试剂盒回收) | 第33页 |
| ·AT克隆 | 第33-34页 |
| ·PCR及相关技术 | 第34-35页 |
| ·Southern杂交 | 第35-36页 |
| ·阿维菌素的HPLC测定 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-58页 |
| ·whiE_a基因簇的基因置换 | 第37-48页 |
| ·基因置换和基因中断的原理 | 第37-38页 |
| ·whiE_a基因簇置换载体的构建 | 第38-42页 |
| ·染色体上whiE_a基因簇的基因置换 | 第42-45页 |
| ·置换菌株发酵产物的HPLC分析 | 第45-48页 |
| ·PhoR-PhoP双组分信号系统对阿维链霉菌的形态分化及阿维菌素生物合成的影响 | 第48-58页 |
| ·PhoR-PhoP的序列分析 | 第48-49页 |
| ·阿维链霉菌phoR-phoP基因置换载体的构建 | 第49-51页 |
| ·阿维链霉菌phoR-phoP基因置换菌株筛选及其基因型验证 | 第51-52页 |
| ·phoR-phoP基因置换菌株的表型观察 | 第52页 |
| ·phoR-phoP基因置换菌株的遗传互补 | 第52-54页 |
| ·phoR-phoP基因置换菌株发酵产物的HPLC分析 | 第54-58页 |
| 4 总结与讨论 | 第58-61页 |
| ·总结 | 第58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| ·展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
