| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 本文创新点 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-53页 |
| 第一章 选凝素的研究现状与进展 | 第13-40页 |
| 参考文献 | 第40-53页 |
| 第二部分 研究目的和设计思路 | 第53-57页 |
| 一、研究目的 | 第53-54页 |
| 二、设计思路 | 第54-57页 |
| 第三部分 材料和方法 | 第57-64页 |
| 1、细胞、抗体和试剂 | 第57-58页 |
| 2、基因克隆和载体构建 | 第58-59页 |
| 3、免疫共沉淀(co—IP)和免疫印迹(IB)实验 | 第59页 |
| 4、细胞体外粘附实验 | 第59-60页 |
| 5、siRNA抑制和质粒过表达电转染实验 | 第60页 |
| 6、PI3K活性检测实验(Elisa试剂盒) | 第60-61页 |
| 7、蔗糖密度剃度离心分离Lipid raft小体 | 第61页 |
| 8、酵母双杂交筛选 | 第61-62页 |
| 9、融合蛋白表达和兔多克隆抗体的制备 | 第62页 |
| 10、Luciferase方法检测报告基因表达 | 第62-64页 |
| 第四部分 实验结果与讨论 | 第64-114页 |
| 第一章 c-Cbl介导的Src泛素化降解对P-选凝素诱导B2整合素活化的负反馈调控机制的研究 | 第64-87页 |
| 一、引言 | 第64-70页 |
| 二、实验结果 | 第70-83页 |
| 1、可溶性P-选凝素(P-Rg)特异性诱导c-Cbl的磷酸化 | 第70-72页 |
| 2、Src依赖的c-CblY700/731/774酪氨酸残基的磷酸化 | 第72-73页 |
| 3、可溶性P-选凝素(P-Rg)促进c-Cbl,Src和Naf1向Lipid laft聚集 | 第73-74页 |
| 4、c-Cbl和活化Src的结合以及其对活化Src的泛素化降解 | 第74-77页 |
| 5、Naf1磷酸化和PI3K活性以及细胞粘附能力随Src活性的下调而下调 | 第77-80页 |
| 6、c-Cbl siRNA抑制和c-Cbl泛素化活性缺失突变体过表达对P-选凝素诱导B2整合素活性的恢复 | 第80-83页 |
| 三、讨论 | 第83-87页 |
| 第二章 Shkbp1对表皮生长因子受体(EGFR)信号通路持续活化机理的研究 | 第87-106页 |
| 一、引言 | 第87-91页 |
| 二、实验结果 | 第91-103页 |
| 1、酵母双杂交筛库 | 第91-95页 |
| 2、CIN85(Sh3kbp11)的新结合蛋白SHKBP1(Sh3kbp1 binding pretin 1) | 第95-97页 |
| 3、SHKBP1对CIN85和c-Cbl结合的抑制 | 第97-99页 |
| 4、表皮生长因子(EGF)诱导的表皮生长因子受体(EGFR)降解被SHKBP1部分抑制和延后 | 第99-101页 |
| 5、EGF诱导的SRE luciferase报告基因活性被SHKBP1上调 | 第101-103页 |
| 三、讨论 | 第103-106页 |
| 第三章 PDCD2 like对炎症过程调控机制的研究 | 第106-114页 |
| 一、引言 | 第106-107页 |
| 二、实验结果 | 第107-112页 |
| 1、Pull-Down筛选到LDHA/B和PDCD2L结合 | 第107-110页 |
| 2、酵母双杂交实验证实PDCD2L和LDHA/B的结合 | 第110页 |
| 3、免疫共沉淀(Co—IP)实验确认PDCD2L和LDHA/B的结合 | 第110-111页 |
| 4、Co—IP证明是PDCD2L的N端,不是它的PDCD_C domain参与和LDHA/B的结合 | 第111-112页 |
| 三、讨论 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-122页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
