| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第一篇 前言 | 第8-14页 |
| 1 胰岛素样生长因子的研究进展及应用 | 第8-9页 |
| 2 胰岛素样生长因子结合蛋白的研究进展及应用 | 第9-14页 |
| 第二篇 实验研究 | 第14-35页 |
| 1 引言 | 第14页 |
| 2 技术路线 | 第14-15页 |
| 第一部分 pGEX-6P-1/IGFBP-4原核表达载体的构建 | 第15-26页 |
| 1 实验材料 | 第15页 |
| ·实验试剂 | 第15页 |
| ·主要配制溶液 | 第15页 |
| ·实验仪器 | 第15页 |
| 2 实验方法 | 第15-26页 |
| ·化学合成目的基因片段 | 第15-16页 |
| ·目的基因的扩增 | 第16-20页 |
| ·质粒的提取 | 第20-22页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第22页 |
| ·pGEX-6P-1/IGFBP-4原核表达载体的构建 | 第22-25页 |
| ·连接产物的转化 | 第25页 |
| ·重组子的筛选 | 第25-26页 |
| 第二部分 pGEX-6P-1/IGFBP-4在大肠杆菌中的表达、纯化 | 第26-35页 |
| 1 实验材料 | 第26-29页 |
| ·实验试剂 | 第26页 |
| ·实验仪器 | 第26页 |
| ·主要溶液配制 | 第26-29页 |
| 2 试验方法 | 第29-35页 |
| ·重组工程菌pGEX-6P-1-IGFBP-4/BL21的表达和最佳条件摸索 | 第29-32页 |
| ·GST-IGFBP-4融合蛋白的Glutathion Sepharose~(TM) 4B亲和层析纯化 | 第32-35页 |
| 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-43页 |
| 英文缩略词表 | 第43-44页 |
| 附录一 技术路线图 | 第44-45页 |
| 附录二 实验中所用到的仪器设备 | 第45-46页 |
| 附录三 纯化策略及纯化流程示意图 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简历 | 第48页 |
