小麦抗黄矮病相关基因片段的克隆
| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-38页 |
| ·小麦黄矮病及其抗源 | 第14-16页 |
| ·植物抗病反应的分子机理 | 第16-20页 |
| ·基因对基因假说 | 第16-17页 |
| ·R 基因与Avr 基因互作的模式 | 第17-18页 |
| ·病原菌无毒基因 | 第18-19页 |
| ·植物的主动防卫反应 | 第19-20页 |
| ·植物的防卫基因 | 第20页 |
| ·植物抗病基因克隆 | 第20-32页 |
| ·植物中已克隆的抗病基因 | 第20-21页 |
| ·植物抗病基因的结构特征 | 第21-27页 |
| ·植物抗病基因克隆的方法 | 第27-30页 |
| ·植物抗病基因同源序列 | 第30-32页 |
| ·基因全长序列的获得 | 第32-37页 |
| ·cDNA 末端快速扩增技术 | 第32页 |
| ·TAIL-PCR 技术 | 第32-37页 |
| ·本研究意义、研究内容、预期目标 | 第37-38页 |
| 2 材料与方法 | 第38-59页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·试验材料 | 第38页 |
| ·菌种和表达载体 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-59页 |
| ·引物设计 | 第39页 |
| ·基因组总DNA 的提取 | 第39-41页 |
| ·总RNA 的提取及纯化 | 第41-43页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第43-44页 |
| ·PCR 扩增 | 第44-45页 |
| ·电泳检测 | 第45-48页 |
| ·差显法获得的差异条带的回收、二次扩增及检测 | 第48-49页 |
| ·RGA 特异性扩增的PCR 产物的回收 | 第49页 |
| ·差异片段的克隆 | 第49-54页 |
| ·利用RACE 方法扩增cDNA 末端序列 | 第54-56页 |
| ·利用TAIL-PCR 扩增RGA 侧翼序列 | 第56-59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-84页 |
| ·小麦抗黄矮病基因相关cDNA 片段的克隆 | 第59-70页 |
| ·总RNA 的提取及第一链cDNA 的合成 | 第59-60页 |
| ·m RNA 差异显示 | 第60-61页 |
| ·差异条带的二次扩增 | 第61-62页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第62-64页 |
| ·测序结果与分析 | 第64-68页 |
| ·利用RACE 技术获得3′末端序列 | 第68-70页 |
| ·小麦抗黄矮病RGA 的克隆 | 第70-84页 |
| ·简并或特异引物的PCR 扩增与分析 | 第70-71页 |
| ·RGA 片段的回收与克隆及阳性克隆的鉴定 | 第71-72页 |
| ·测序结果与分析 | 第72-75页 |
| ·TAIL-PCR 扩增RGA 侧翼序列 | 第75-84页 |
| 4 讨论 | 第84-87页 |
| ·利用差显法克隆抗病基因相关片段 | 第84-85页 |
| ·本研究获得的RGA 与抗病基因的关系 | 第85-86页 |
| ·利用TAIL-PCR 扩增RGA 的侧翼序列 | 第86-87页 |
| 5 结论 | 第87-89页 |
| ·差显法 | 第87页 |
| ·同源序列克隆法 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 攻读学位期间发论文表情况 | 第101页 |
