中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-23页 |
·氮信号对植物物质代谢的调控 | 第13-14页 |
·氮信号对植物生长发育的调控 | 第14-15页 |
·植物中推测的两个氮信号感应系统 | 第15-17页 |
·PII 介导的N 感应 | 第15-16页 |
·细胞分裂素和His-Asp 磷酸根中继 | 第16-17页 |
·细胞分裂素的合成 | 第17-18页 |
·IPT 在细胞分裂素合成中的重要作用 | 第18-19页 |
·AMP 途径 | 第18页 |
·ATP/ADP 途径 | 第18页 |
·旁路的途径(alternative pathway) | 第18-19页 |
·其它植物上编码异戊烯基转移酶基因IPT 的鉴定 | 第19-21页 |
·拟南芥IPT 基因的鉴定 | 第19-21页 |
·其它植物上IPT 基因的鉴定 | 第21页 |
·氮信号对细胞分裂素生物合成的调控 | 第21页 |
·本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
2 材料与方法 | 第23-42页 |
·实验材料 | 第23-26页 |
·植物材料与处理 | 第23页 |
·菌株与质粒 | 第23页 |
·酶及生化试剂 | 第23页 |
·PCR 引物 | 第23-24页 |
·培养基 | 第24-26页 |
·实验方法 | 第26-42页 |
·植物材料总 RNA 的提取 | 第26页 |
·反转录cDNA 第一链的合成(用于3′RACE) | 第26-27页 |
·反转录cDNA 第一链的合成(用于5′RACE) | 第27页 |
·cDNA 全长基因序列的获得 | 第27-29页 |
·3′端基因片段的克隆 | 第27-28页 |
·5′RACE 获得5′端基因序列 | 第28-29页 |
·DNA 片段与克隆载体的连接 | 第29页 |
·凝胶电泳中 DNA 片段的回收 | 第29-30页 |
·碱法小量质粒 DNA 的提取 | 第30-31页 |
·DNA 序列测定 | 第31页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第31-32页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第31-32页 |
·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第32页 |
·感受态细胞的制备 | 第32页 |
·冻融法农杆菌转化 | 第32页 |
·基因组 DNA 提取(CTAB 法) | 第32-33页 |
·原核表达平邑甜茶异戊烯基转移酶MhIPT3 蛋白 | 第33-36页 |
·原核表达载体的构建 | 第33-35页 |
·大肠杆菌BL21 原核表达的诱导 | 第35页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第35-36页 |
·MhIPT3 正反义表达载体的构建 | 第36-37页 |
·实时荧光定量 PCR | 第37-38页 |
·‘皇家嘎拉’苹果的转化 | 第38-39页 |
·组织培养所用培养基 | 第38页 |
·转化步骤 | 第38-39页 |
·农杆菌介导的烟草的转化 | 第39-40页 |
·转基因植株的检测 | 第40页 |
·叶面积的测定 | 第40页 |
·激素的测定 | 第40页 |
·本研究使用的软件 | 第40-42页 |
3 结果与分析 | 第42-59页 |
·异戊烯基转移酶基因(MhIPT3)的分离 | 第42-43页 |
·MhIPT3 3′端基因片段的分离 | 第42页 |
·MhIPT3 5′片段的分离 | 第42页 |
·MhIPT3 全长cDNA 的分离 | 第42-43页 |
·异戊烯基转移酶基因(MhIPT3)的序列分析 | 第43-50页 |
·MhIPT3 在大肠杆菌中的表达 | 第50-51页 |
·原核表达载体的构建 | 第50页 |
·重组蛋白表达与SDS-PAGE 分析 | 第50-51页 |
·转基因烟草表达载体pBI121-MhIPT3 的构建及转基因烟草的鉴定 | 第51-53页 |
·‘皇家嘎拉’苹果特异表达载体pBI121-MhIPT3 的构建 | 第53-54页 |
·基因的表达特性分析 | 第54-55页 |
·MhIPT3 在不同组织中的表达 | 第54页 |
·不同形态氮素对MhIPT3 表达的影响 | 第54-55页 |
·不同形态氮素对细胞分裂素含量的影响 | 第55-57页 |
·不同形态氮素对Z+ZR 含量的影响 | 第55-56页 |
·不同形态氮素对iP+iPA 含量的影响 | 第56-57页 |
·不同形态氮素对叶片中IAA 和ABA 含量的影响 | 第57页 |
·不同形态氮素对平邑甜茶叶面积及生长的影响 | 第57-59页 |
4 讨论 | 第59-62页 |
·MhIPT3基因编码平邑甜茶异戊烯基转移酶 | 第59-60页 |
·硝态氮促进平邑甜茶幼苗生长与MhIPT3表达、细胞分裂素含量的关系 | 第60-62页 |
5 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
硕士在读期间形成的论文 | 第75页 |