中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
引言 | 第10-25页 |
1 NDV 特性及分子生物学研究 | 第10-18页 |
2 抗体纯化 | 第18页 |
3 噬菌体肽库技术 | 第18-25页 |
试验一输卵管积液蛋鸡强毒NDV的分离鉴定与基因分析 | 第25-44页 |
1. 材料 | 第25-27页 |
2 方法 | 第27-36页 |
·病毒的分离、增殖 | 第27页 |
·病毒的鉴定 | 第27-29页 |
·病毒的蚀斑纯化 | 第29页 |
·纯化病毒的扩增 | 第29页 |
·病毒毒力的测定 | 第29-30页 |
·F、HN 基因的克隆测序 | 第30-34页 |
·F、HN 基因的核苷酸序列分析 | 第34-36页 |
3. 结果 | 第36-42页 |
·NDV 分离鉴定 | 第36页 |
·NDV 毒力测定结果 | 第36-37页 |
·NDV F、HN 基因RT-PCR 鉴定及测序 | 第37-38页 |
·F 基因遗传变异分析 | 第38-40页 |
·HN 基因遗传变异分析 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
试验二 应用 HiTrap protein-A 层析柱纯化新城疫病毒单克隆抗体 | 第44-52页 |
1 材料 | 第44-45页 |
2 方法 | 第45-48页 |
·单克隆抗体的腹水制备 | 第45页 |
·用 HiTrap protein-A 层析柱纯化单抗 | 第45-46页 |
·纯化后单抗的生物学特性鉴定 | 第46-48页 |
3 结果 | 第48-50页 |
·纯化后单抗的HI 和ELISA 效价 | 第48页 |
·标准曲线的制作 | 第48-49页 |
·单抗纯化洗脱液中HI 效价与蛋白含量 | 第49-50页 |
·单抗纯化后纯度检测 | 第50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
试验三 利用噬菌体随机肽库筛选 NDV 单克隆抗体1E5 的模拟抗原表位 | 第52-67页 |
1 材料 | 第52-54页 |
2 方法 | 第54-59页 |
·噬菌体随机肽库的亲和筛选 | 第54-57页 |
·用ELISA 筛选阳性克隆 | 第57-58页 |
·噬菌体ssDNA序列测定及分析 | 第58-59页 |
·NDV 抗原对筛选出的阳性克隆竞争抑制试验 | 第59页 |
·对McAb 1E5 所检测的毒株进行序列分析 | 第59页 |
3 结果 | 第59-65页 |
·噬菌体的富集 | 第59-61页 |
·阳性噬菌体克隆的鉴定 | 第61-62页 |
·阳性噬菌体克隆ssDNA 序列测定及分析 | 第62-63页 |
·竞争抑制实验 | 第63-65页 |
·LaSota 病毒株与1E5 检测的变异株和未变异株的比较结果 | 第65页 |
4 讨论 | 第65-67页 |
结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第77页 |