| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-30页 |
| ·黄曲霉毒素的简介 | 第11页 |
| ·黄曲霉毒素的结构及其理化特性 | 第11-12页 |
| ·黄曲霉毒素的生物合成 | 第12-13页 |
| ·黄曲霉毒素的危害 | 第13-14页 |
| ·黄曲霉毒素去毒化的研究进展 | 第14-17页 |
| ·物理化学去毒 | 第14-15页 |
| ·生物学去毒 | 第15-17页 |
| ·蛋白质的体外复性 | 第17-26页 |
| ·蛋白质的折叠机理 | 第17-18页 |
| ·复性的基本原则 | 第18页 |
| ·复性的方法 | 第18-21页 |
| ·稀释复性 | 第19页 |
| ·膜控制的变性剂除去过程 | 第19页 |
| ·色谱复性技术 | 第19-21页 |
| ·影响复性效率的环境因素 | 第21-25页 |
| ·复性结果的检测方法 | 第25-26页 |
| ·圆二色谱在结构生物学研究中的应用 | 第26-27页 |
| ·等温滴定微量热法 | 第27-28页 |
| ·研究背景、目的与意义 | 第28-30页 |
| 第二章 实验设备及材料 | 第30-34页 |
| ·主要仪器设备 | 第30页 |
| ·试剂 | 第30-34页 |
| ·常用试剂 | 第30-31页 |
| ·培养基&其他试剂 | 第31-34页 |
| 第三章 实验方法 | 第34-46页 |
| ·MBP_ADTZ融合蛋白的诱导表达 | 第34-37页 |
| ·MBP_ADTZ融合蛋白的亲和层析 | 第37-38页 |
| ·MBP_ADTZ融合蛋白的亲和层析 | 第37页 |
| ·MBP_ADTZ融合蛋白的亲和层析pH的优化 | 第37-38页 |
| ·酶切MBP_ADTZ融合蛋白,释放rADTZ | 第38-39页 |
| ·复性 | 第39-43页 |
| ·待复性rADTZ的变性 | 第39页 |
| ·复性体系的设计 | 第39-40页 |
| ·复性 | 第40-41页 |
| ·复性条件的优化 | 第41-42页 |
| ·氧化还原条件对复性的影响 | 第42页 |
| ·复性后rADTZ活性的测定 | 第42-43页 |
| ·复性产物的分离纯化 | 第43-44页 |
| ·复性产物的Phenyl Sepharose 6 Fast Flow疏水柱层析 | 第43-44页 |
| ·复性产物的Superose~(TM) 12 10/300 GL分子筛层析 | 第44页 |
| ·复性后rADTZ二级结构的圆二色性分析 | 第44-45页 |
| ·复性后rADTZ分子间二硫键的分析 | 第45页 |
| ·rADTZ活性中心金属离子结合的分析 | 第45-46页 |
| 第四章 实验结果 | 第46-69页 |
| ·高表达量的重组菌的筛选结果 | 第46-47页 |
| ·MBP_ADTZ融合蛋白的可溶性分析 | 第47页 |
| ·重组菌的发酵培养 | 第47-48页 |
| ·亲和层析 | 第48-50页 |
| ·pH的摸索 | 第48-49页 |
| ·亲和层析 | 第49-50页 |
| ·酶切MBP_rADTZ融合蛋白释放rADTZ | 第50-51页 |
| ·复性 | 第51-61页 |
| ·各种促折叠物质对复性的影响 | 第51-58页 |
| ·复性条件的优化 | 第58-60页 |
| ·氧化还原条件对复性的影响 | 第60-61页 |
| ·复性小结 | 第61页 |
| ·复性产物的分离纯化 | 第61-64页 |
| ·复性产物的Phenyl Sepharose 6 Fast Flow疏水柱层析 | 第61-62页 |
| ·复性产物的Superose~(TM) 12 10/300 GL分子筛层析 | 第62-64页 |
| ·复性后rADTZ二级结构的圆二色性分析 | 第64-65页 |
| ·复性后rADT分子间二硫键的分析 | 第65-67页 |
| ·rADTZ活性中心与金属离子的分析 | 第67-69页 |
| ·rADTZ与锌离子的分析 | 第67页 |
| ·rADTZ与铜离子的分析 | 第67-69页 |
| 第五章 讨论与分析 | 第69-78页 |
| ·亲和层析纯化优化 | 第69页 |
| ·复性条件的筛选 | 第69-74页 |
| ·变性剂 | 第69页 |
| ·变性剂的去除 | 第69-70页 |
| ·复性环境 | 第70-72页 |
| ·EDTA与金属离子 | 第72页 |
| ·氧化还原环境 | 第72-74页 |
| ·rADTZ活性检测 | 第74页 |
| ·rADTZ蛋白的分离纯化 | 第74-75页 |
| ·rADTZ蛋白二级结构的圆二色性分析 | 第75页 |
| ·分子间二硫键的分析 | 第75-76页 |
| ·rADTZ金属离子结合性及结构的分析 | 第76-77页 |
| ·关于ADTZ活性中心的讨论 | 第77-78页 |
| 第六章 小结与展望 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-94页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
