| 中文摘要 | 第1-13页 |
| 英文摘要 | 第13-14页 |
| 1 前言 | 第14-27页 |
| ·酪氨酸酶 | 第14-21页 |
| ·概述 | 第14页 |
| ·酪氨酸酶的三维结构 | 第14-16页 |
| ·理化性质 | 第16页 |
| ·生理功能 | 第16-17页 |
| ·酪氨酸酶催化作用机理 | 第17-19页 |
| ·基因表达与调控 | 第19-21页 |
| ·与酪氨酸酶相关的应用研究概况 | 第21页 |
| ·α-synuclein蛋白 | 第21-25页 |
| ·概述 | 第21-23页 |
| ·α-synuclein与帕金森病 | 第23-25页 |
| ·本论文研究的内容和意义 | 第25-27页 |
| 2 实验试剂与仪器 | 第27-30页 |
| ·主要材料和试剂 | 第27-29页 |
| ·主要实验仪器 | 第29-30页 |
| 3 实验方法 | 第30-40页 |
| ·培养基及缓冲液配制 | 第30-33页 |
| ·大肠杆菌培养基 | 第30页 |
| ·细胞培养基 | 第30-31页 |
| ·琼脂糖凝胶 | 第31页 |
| ·RIPA裂解液 | 第31页 |
| ·胶迁移缓冲液 | 第31页 |
| ·免疫印迹(Western blot)相关缓冲液 | 第31-33页 |
| ·cardols和cardnals的分离纯化及结构鉴定 | 第33页 |
| ·抑制剂对酪氨酸酶的抑制作用机理的研究 | 第33-35页 |
| ·抑制剂对蘑菇酪氨酸酶单酚酶活力的影响 | 第33-34页 |
| ·抑制剂对蘑菇酪氨酸酶二酚酶作用作用的研究 | 第34页 |
| ·效应物对蘑菇酪氨酸酶二酚酶的抑制类型和抑制常数的测定 | 第34页 |
| ·效应物对酶抑制作用动力学常数的测定 | 第34-35页 |
| ·免疫印迹(Western blot) | 第35-36页 |
| ·蛋白样品的制备 | 第35页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35页 |
| ·蛋白质的电转移及膜的封闭 | 第35-36页 |
| ·抗原抗体反应 | 第36页 |
| ·ECL显色 | 第36页 |
| ·瞬时转染 | 第36页 |
| ·ELISA检测 | 第36-37页 |
| ·免疫共沉淀 | 第37页 |
| ·实时荧光定量PCR (Real-time PCR) | 第37-38页 |
| ·总RNA的提取 | 第37页 |
| ·cDNA单链的合成 | 第37-38页 |
| ·Real-time PCR | 第38页 |
| ·RNAi干扰实验 | 第38-40页 |
| ·Tyrosinase RNAi序列 | 第38-39页 |
| ·RNAi干扰实验操作 | 第39-40页 |
| 4 实验结果 | 第40-87页 |
| ·Cardols and cardonals分离纯化与结构鉴定 | 第40-59页 |
| ·HPLC分离Cardols and cardonals | 第40-41页 |
| ·Cardols and cardonals的GC-MS分析 | 第41-43页 |
| ·Cardols and cardonals的核磁共振分析 | 第43-59页 |
| ·cardol trienes的核磁共振分析 | 第43-46页 |
| ·cardol diene的核磁共振分析 | 第46-49页 |
| ·cardanol trienes的核磁共振分析 | 第49-53页 |
| ·cardanol diene的核磁共振分析 | 第53-55页 |
| ·cardanol monone的核磁共振分析 | 第55-59页 |
| ·抑制剂的酶学效应 | 第59-78页 |
| ·cardol trienes的酶学效应 | 第59-66页 |
| ·cardol trienes的对磨菇酪氨酸酶失活的影响 | 第59页 |
| ·cardol trienes对磨菇酪氨酸酶的抑制机理 | 第59-60页 |
| ·cardol trienes对磨菇酪氨酸酶催化L-DOPA氧化动力学 | 第60页 |
| ·cardol trienes对磨菇酪氨酸酶失活动力学研究 | 第60-63页 |
| ·cardol trienes反应速率常数测定 | 第63-66页 |
| ·cardol diene的酶学效应 | 第66-68页 |
| ·cardol diene对蘑菇酪氨酸酶二酚酶抑制作用的测定 | 第66-67页 |
| ·cardol diene对磨菇酪氨酸酶的抑制机理 | 第67页 |
| ·cardol diene对二酚酶的抑制作用类型的判断 | 第67-68页 |
| ·cardanol trienes的酶学效应 | 第68-70页 |
| ·cardanol trienes对蘑菇酪氨酸酶二酚酶抑制作用的测定 | 第68页 |
| ·cardanol trienes对二酚酶的抑制作用机理的判断 | 第68-70页 |
| ·cardanol diene的酶学效应 | 第70页 |
| ·cardanol diene对蘑菇酪氨酸酶二酚酶抑制作用的测定 | 第70页 |
| ·cardanol diene对二酚酶的抑制作用机理的判断 | 第70页 |
| ·cardanol monone的酶学效应 | 第70-73页 |
| ·cardanol monone对蘑菇酪氨酸酶二酚酶抑制作用的测定 | 第70-72页 |
| ·cardanol monone对二酚酶的抑制作用机理的判断 | 第72-73页 |
| ·头孢唑啉和头孢地嗪的的酶学效应 | 第73-78页 |
| ·头孢唑啉和头孢地嗪对蘑菇酪氨酸酶单酚酶活力影响的浓度效应 | 第73-75页 |
| ·头孢唑啉和头孢地嗪对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活力的影响 | 第75页 |
| ·头孢唑啉和头孢地嗪对蘑菇酪氨酸酶的二酚酶抑制机制研究 | 第75-76页 |
| ·头孢唑啉蘑菇酪氨酸酶的二酚酶竞争性抑制机制研究 | 第76页 |
| ·头孢地嗪蘑菇酪氨酸酶的二酚酶混合型抑制机制研究 | 第76-78页 |
| ·cardols and cardanols的细胞学效应 | 第78-79页 |
| ·cardols and cardanols对小鼠B16F10细胞增殖率的影响 | 第78页 |
| ·cardols and cardanols对小鼠B16F10细胞黑色素生成的影响 | 第78-79页 |
| ·cardols and cardanols对果蝇多巴胺含量的影响 | 第79-80页 |
| ·α-syuclein对酪氨酸酶的调控机制研究 | 第80-87页 |
| ·α-synuclein对黑色素生成的影响 | 第80页 |
| ·免疫共沉淀 | 第80页 |
| ·α-synuclein对酪氨酸酶转录调控途径 | 第80-81页 |
| ·α-synuclein对酪氨酸酶表达水平的影响 | 第81-82页 |
| ·α-synuclein对cAMP含量的影响 | 第82页 |
| ·RNAi对黑色素生成的影响 | 第82-83页 |
| ·RNAi对酪氨酸酶及P-CREB表达水平的影响 | 第83-84页 |
| ·RNAi对酪氨酸酶转录调控途径影响 | 第84-86页 |
| ·Forskolin对黑色素生成的影响 | 第84页 |
| ·Forskolin对酪氨酸酶转录表达的影响 | 第84-86页 |
| ·酪氨酸酶表达水平对多巴胺产生的细胞毒性的影响 | 第86-87页 |
| 5 讨论 | 第87-91页 |
| ·cardols和cardanols对蘑菇酪氨酸酶的酶学效应 | 第87页 |
| ·头孢唑啉和头孢地嗪对蘑菇酪氨酸酶的酶学效应 | 第87-89页 |
| ·cardols和cardanols对小鼠B16F10细胞学效应 | 第89页 |
| ·cardols和cardanols对小鼠多巴胺含量的影响 | 第89页 |
| ·α-synuclein蛋白对酪氨酸酶的调控机制研究 | 第89-91页 |
| 6 结论 | 第91-92页 |
| 7 参考文献 | 第92-103页 |
| 在学期间发表论文 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
