| 缩写词 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-26页 |
| 1 研究背景 | 第13页 |
| 2 文献综述 | 第13-20页 |
| ·桂花香味物质研究进展 | 第13-14页 |
| ·花卉香味物质的种类及合成途径 | 第14-16页 |
| ·萜类物质代谢途径 | 第15-16页 |
| ·苯丙烷类代谢途径 | 第16页 |
| ·脂肪酸衍生物代谢途径 | 第16页 |
| ·花卉香味物质合成途径中几个重要酶的研究进展 | 第16-18页 |
| ·类胡萝卜素裂解双加氧酶研究进展 | 第16-17页 |
| ·肉桂酸-4-羟化酶研究进展 | 第17-18页 |
| ·脂肪氧化酶的研究进展 | 第18页 |
| ·花卉香味基因工程研究进展 | 第18-20页 |
| ·国外香味基因工程研究进展 | 第19-20页 |
| ·国内研究进展 | 第20页 |
| 3 差异表达基因的分离方法 | 第20-24页 |
| ·mRNA 差异显示技术 | 第21页 |
| ·抑制消减杂交 | 第21-22页 |
| ·cDNA 代表性差异分析 | 第22页 |
| ·基因表达系列分析法 | 第22页 |
| ·cDNA 微列阵 | 第22-23页 |
| ·cDNA-AFLP 技术研究进展 | 第23-24页 |
| ·cDNA-AFLP 技术的基本原理和实验流程 | 第23页 |
| ·cDNA-AFLP 技术的优点 | 第23-24页 |
| ·cDNA-AFLP 技术的应用 | 第24页 |
| 4 研究的目的及意义 | 第24-25页 |
| 5 本研究的技术路线 | 第25-26页 |
| 第二章 桂花花蕾总 RNA 提取和 cDNA –AFLP 体系的建立 | 第26-46页 |
| 1 试验材料 | 第26-27页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·主要仪器与试验试剂 | 第27页 |
| 2 试验方法 | 第27-38页 |
| ·桂花总RNA 的提取及检测 | 第27-30页 |
| ·改良热硼酸盐法提取组织总RNA | 第27-28页 |
| ·改良的Tris-硼酸法 | 第28-29页 |
| ·百泰克植物多糖多酚提取试剂盒 | 第29-30页 |
| ·RNA 质量检测 | 第30-31页 |
| ·电泳检测 | 第30页 |
| ·紫外分光光度测定 | 第30-31页 |
| ·cDNA-AFLP 分析 | 第31-36页 |
| ·双链cDNA 的合成及纯化 | 第31-32页 |
| ·cDNA-AFLP 分析 | 第32-36页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第36-38页 |
| ·制胶 | 第36-37页 |
| ·电泳 | 第37页 |
| ·银染 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-43页 |
| ·桂花花瓣总RNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·预扩增结果 | 第39-40页 |
| ·选择性扩增产物聚丙烯酰胺凝胶电泳结果分析 | 第40-43页 |
| ·cDNA差异条带的选择 | 第43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| ·桂花花瓣总RNA 的提取 | 第43-44页 |
| ·cDNA-AFLP 试验体系 | 第44-46页 |
| ·cDNA-AFLP 技术的优点 | 第44页 |
| ·cDNA-AFLP 技术的注意事项 | 第44-46页 |
| 第三章 差异片段的分离与分析 | 第46-61页 |
| 1 试验试剂 | 第46页 |
| 2 试验方法 | 第46-49页 |
| ·差异片段的回收 | 第46页 |
| ·差异片段的二次扩增 | 第46-47页 |
| ·差异片段纯化 | 第47页 |
| ·目的片段与 pMD18-T -vector 的连接 | 第47-48页 |
| ·大肠杆菌 DH5α 感受态细胞的制备——CaCl_2法 | 第48页 |
| ·连接产物的转化 | 第48-49页 |
| ·重组质粒的PCR 检测 | 第49页 |
| ·序列测定及分析 | 第49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-58页 |
| ·差异片段的二次扩增 | 第49-50页 |
| ·TDFs 的序列分析结果 | 第50-58页 |
| 4 讨论 | 第58-61页 |
| ·萜类合成路径中的酶 | 第58-59页 |
| ·苯丙烷类代谢途径中的酶 | 第59页 |
| ·脂肪酸衍生物合成途径的主要调控酶 | 第59-61页 |
| 第四章 利用 RT-PCR 技术分离 CFAT, LOX cDNA 3′端序列 | 第61-69页 |
| 1 材料与方法 | 第61-64页 |
| ·材料 | 第61页 |
| ·方法 | 第61-64页 |
| ·总RNA 的提取及cDNA 第一链的合成 | 第61-62页 |
| ·引物设计 | 第62页 |
| ·利用RT-PCR 技术扩增CFAT, LOX 片段3′序列 | 第62-64页 |
| ·目的片段的回收纯化、克隆、测序 | 第64页 |
| ·序列分析 | 第64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-68页 |
| ·总 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成 | 第64-65页 |
| ·利RT-PCR 技术扩增CFAT、LOX 片段3′序列 | 第65-66页 |
| ·PCR 产物序列分析 | 第66-68页 |
| ·CFAT 3′PCR 产物序列分析 | 第66-67页 |
| ·LOX 3′PCR 产物序列分析 | 第67-68页 |
| 3 讨论 | 第68-69页 |
| 第五章 小结 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
