| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-23页 |
| ·血管内皮细胞生长因子（VEGF）的研究现状 | 第12-13页 |
| ·VEGF 概述 | 第12页 |
| ·VEGF 家族 | 第12页 |
| ·VEGF 的分子结构 | 第12-13页 |
| ·VEGF 的功能 | 第13页 |
| ·VEGF 的表达分布 | 第13页 |
| ·血管内皮细胞生长因子受体（VEGFR）的研究现状 | 第13-20页 |
| ·VEGFR 概述 | 第13页 |
| ·VEGFR 家族 | 第13-19页 |
| ·VEGFR 的表达调控 | 第19-20页 |
| ·VEGFR 与肿瘤的关系 | 第20-21页 |
| ·VEGFR 与肿瘤发生 | 第20-21页 |
| ·VEGFR 与肿瘤的发展 | 第21页 |
| ·抗肿瘤治疗前景 | 第21-23页 |
| 第二章 VEGFR-1 原核表达载体的构建及鉴定 | 第23-39页 |
| ·实验材料 | 第23-27页 |
| ·材料及试剂 | 第23页 |
| ·实验仪器 | 第23-24页 |
| ·主要溶液配制 | 第24-27页 |
| ·实验方法 | 第27-33页 |
| ·化学合成目的基因片段 | 第27页 |
| ·目的基因的扩增 | 第27-29页 |
| ·质粒的提取 | 第29-30页 |
| ·pET-28a（+）/VEGFR-1 表达载体的构建 | 第30-31页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·连接产物的转化及重组质粒的筛选与鉴定 | 第32-33页 |
| ·实验结果 | 第33-36页 |
| ·目的基因PCR 扩增结果 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第34-36页 |
| ·讨论 | 第36-39页 |
| ·目的基因VEGFR-1 的获得 | 第36页 |
| ·引物设计的原则 | 第36页 |
| ·引物使用及保存 | 第36-37页 |
| ·引物熔解温度（Tm） | 第37页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第37页 |
| ·提取质粒 | 第37页 |
| ·原核表达载体pET28a（+）的选择 | 第37-38页 |
| ·pET-28a（+）/ VEGFR-1 表达重组体的构建和鉴定 | 第38-39页 |
| 第三章 重组VEGFR-1 基因在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第39-59页 |
| ·材料与方法 | 第39-47页 |
| ·实验材料 | 第39-42页 |
| ·实验方法 | 第42-47页 |
| ·实验结果 | 第47-55页 |
| ·重组工程菌BL21/VEGFR-1 的表达结果和目标蛋白表达形式检测 | 第47-49页 |
| ·重组工程菌BL21/ VEGFR-1 的最佳表达条件的摸索 | 第49-53页 |
| ·凝胶层析（分子筛层析）进一步纯化蛋白VEGFR-1 | 第53-55页 |
| ·重组VEGFR-1 目的蛋白免疫印迹鉴定结果 | 第55页 |
| ·目的蛋白含量测定的结果 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-59页 |
| ·表达宿主菌的选择 | 第55-56页 |
| ·融合标签用于蛋白的纯化 | 第56页 |
| ·最适表达条件的优化 | 第56-57页 |
| ·缓冲液pH 值 | 第57页 |
| ·保持重组蛋白活性 | 第57页 |
| ·可溶重组蛋白的分离纯化 | 第57页 |
| ·Western blotting 分析 | 第57-58页 |
| ·晶体的培养 | 第58页 |
| ·动物实验 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 附录 | 第69页 |
