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马耳他布鲁氏菌M5-90 bp26基因缺失疫苗株的构建及安全性和免疫原性评估

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-15页
1 引言第15-37页
   ·布鲁氏菌的简介第15-22页
     ·布鲁氏菌的历史第15页
     ·布鲁氏菌种和生物型的分类第15-17页
     ·布鲁氏菌病原学特征第17-22页
   ·布鲁氏菌病第22-25页
     ·布鲁氏菌病的危害第22-23页
     ·流行病学第23-25页
   ·布鲁氏菌病的诊断第25-29页
     ·病原学鉴定第25-27页
     ·血清学检测方法第27-28页
     ·变态反应(过敏反应)试验第28-29页
   ·疫苗第29-33页
     ·传统疫苗第29-31页
     ·基因工程疫苗第31-33页
   ·布鲁氏菌病在中国的流行第33-35页
     ·中国布鲁氏菌病流行概况第33-34页
     ·中国布鲁氏菌病流行优势菌株第34页
     ·中国布鲁氏菌病诊断主要难点第34-35页
   ·BP26蛋白的特性第35页
   ·本研究目的和意义第35-37页
2 材料与方法第37-51页
   ·实验材料第37-39页
     ·细菌与质粒第37-38页
     ·引物第38页
     ·试剂第38页
     ·试验动物第38页
     ·试验仪器第38-39页
     ·抗血清第39页
   ·实验方法第39-51页
     ·同源重组质粒pSP-bp26-k的构建第39-42页
     ·缺失株M5-90-26的构建与PCR鉴定第42-43页
     ·缺失株M5-90-26生物学特性鉴定第43-45页
     ·缺失株M5-90-26的生长曲线测定第45页
     ·缺失株M5-90-26 Western blot鉴定第45-46页
     ·缺失株M5-90-26在小鼠体内免疫保护评估第46-48页
     ·缺失株M5-90-26在羊体内的安全性及免疫原性评估第48-50页
     ·统计分析第50-51页
3 结果与分析第51-72页
   ·同源重组载体pSP-bp26-k的构建及鉴定第51-53页
     ·同源臂基因与卡那霉素抗性基因扩增及序列测定第51-52页
     ·同源重组质粒pSP-bp26-k鉴定第52-53页
   ·缺失株M5-90-26鉴定第53-56页
     ·缺失株M5-90-26的PCR鉴定第53-54页
     ·缺失株M5-90-26 Western blot鉴定第54-56页
   ·缺失株M5-90-26生物学特性研究第56-58页
     ·缺失株M5-90-26生化特性鉴定第56页
     ·缺失株M5-90-26的形态学第56-57页
     ·缺失株M5-90-26的生长曲线第57-58页
   ·缺失株M5-90-26在小鼠体内免疫保护评估第58-67页
     ·小鼠康复时间的测定第58-59页
     ·小鼠短期免疫保护试验第59-62页
     ·小鼠免疫持续期试验第62-63页
     ·BP26抗体的监测第63-65页
     ·s-LPS抗体的监测第65-67页
   ·缺失株M5-90-26在羊体内的免疫原性试验第67-68页
     ·缺失株M5-90-26免疫后的抗体水平监测第67-68页
     ·缺失株M5-90-26免疫后淋巴细胞增殖试验第68页
   ·缺失株M5-90-26在羊体内的安全性评估第68-72页
     ·缺失株M5-90-26体外排菌检测第68页
     ·缺失株M5-90-26水平传播试验第68-70页
     ·缺失株M5-90-26体内残留毒力试验第70页
     ·缺失株M5-90-26毒力返强实验第70-72页
4 讨论第72-80页
   ·缺失株M5-90-26作为疫苗的理论与实践依据第72-73页
   ·缺失株M5-90-26的构建策略第73-74页
   ·缺失株M5-90-26筛选与鉴定第74-75页
   ·缺失株M5-90-26生物学特性的鉴定第75-76页
   ·缺失株M5-90-26在小鼠体内BP26抗体的检测第76-77页
   ·缺失株M5-90-26在小鼠体内免疫保护评估第77页
   ·缺失株M5-90-26在羊体内的免疫原性及安全性评估第77-80页
5 结论第80-81页
致谢第81-82页
参考文献第82-94页
附录第94-95页
攻读学位期间发表的学术论文第95页

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