中文摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
英文缩略语 | 第8-9页 |
前言 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
一、丹参的研究概况 | 第10-18页 |
1 丹参的本草研究 | 第10页 |
2 丹参的药效研究 | 第10页 |
3 丹参的化学成分 | 第10-11页 |
4 丹参的形态特征 | 第11页 |
5 丹参的资源分布 | 第11-12页 |
6 丹参的分子生物学研究概况 | 第12-15页 |
7 丹参二萜途径上关键酶基因概述 | 第15-16页 |
8 gateway 克隆技术的原理 | 第16-17页 |
9 报告基因的选择研究 | 第17-18页 |
二、本实验研究的目的与意义 | 第18-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-33页 |
一、材料、试剂与仪器 | 第19-20页 |
1 材料 | 第19页 |
2 常用试剂 | 第19-20页 |
3 主要仪器 | 第20页 |
二、方法 | 第20-33页 |
1 无菌苗的获得 | 第20页 |
2 CPS 过表达载体的构建 | 第20-25页 |
3 空过表达载体的构建 | 第25-26页 |
4 发根农杆菌ACC10060 农杆菌感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
5 电击转化 | 第27-28页 |
6 丹参Hyg 适宜抗性的选择 | 第28页 |
7 ACCC10060 介导丹参内源基因转化 | 第28-29页 |
8 阳性毛状根的鉴定 | 第29页 |
9 根癌农杆菌EH105 感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
10 pH7WG2D-CPS 电击转化 | 第30页 |
11 pH7WG2D-Ent14 电击转化 | 第30页 |
12 pH7WG2D-CPS 电击转化的阳性鉴定 | 第30页 |
13 pH7WG2D-Ent14 电击转化的阳性鉴定 | 第30页 |
14 EH105 介导内源基因丹参转化 | 第30-31页 |
15 EH105介导外源基因烟草的转化 | 第31-33页 |
第三章 结果 | 第33-41页 |
一、无菌苗的获得 | 第33页 |
二、CPS 过表达载体的构建 | 第33-35页 |
1 克隆基因两侧引入attB 重组位点 | 第33页 |
2 BP 反应产物的转化及阳性克隆的鉴定 | 第33-34页 |
3 LR 反应后阳性克隆的鉴定 | 第34-35页 |
三、空过表达载体的检测 | 第35-36页 |
四、pH7WG2D-CPS 电击转化的阳性鉴定 | 第36页 |
五、pH7WG2D-Entr4 电击转化的阳性鉴定 | 第36页 |
六、丹参Hyg 适宜抗性的选择 | 第36-37页 |
七、农杆菌ACCC10060 介导CPS 基因的转化 | 第37-38页 |
八、pH7WG2D-CPS 电击转化到EH105 中的阳性鉴定 | 第38页 |
九、pH7WG2D-Entr4 电击转化到 EH105 中的阳性鉴定 | 第38页 |
十、EH105 介导内源基因丹参转化 | 第38-40页 |
十一、EH105 介导外源基因烟草的转化 | 第40-41页 |
第四章 讨论 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |