| 摘要 | 第1-114页 |
| Abstract | 第0-12页 |
| 缩略语表 | 第12-14页 |
| 1.前言 | 第14-46页 |
| ·根瘤菌和豆科植物的共生固氮 | 第14-24页 |
| ·根瘤菌侵染豆科植物的过程 | 第15页 |
| ·根瘤的分类及发育 | 第15-17页 |
| ·根瘤菌的发育 | 第17-19页 |
| ·根瘤的衰老 | 第19-24页 |
| ·根瘤衰老的特征 | 第19-21页 |
| ·根瘤衰老的影响因素 | 第21-22页 |
| ·根瘤衰老相关基因 | 第22-24页 |
| ·预防和延缓根瘤衰老的途径 | 第24页 |
| ·半胱氨酸蛋白酶 | 第24-29页 |
| ·植物半胱氨酸蛋白酶的分类 | 第25-26页 |
| ·木瓜蛋白酶家族(papain) | 第25页 |
| ·豆类半胱氨酸蛋白酶家族 | 第25-26页 |
| ·其它半胱氨酸蛋白酶家族 | 第26页 |
| ·植物半胱氨酸蛋白酶的功能 | 第26-28页 |
| ·参与植物各组织的衰老过程 | 第26页 |
| ·参与植物种子的发育过程 | 第26-27页 |
| ·参与植物对环境胁迫的反应 | 第27页 |
| ·其它功能 | 第27-28页 |
| ·根瘤衰老相关的半胱氨酸蛋白酶研究进展 | 第28页 |
| ·植物半胱氨酸蛋白酶抑制因子 | 第28-29页 |
| ·AsNODF32 | 第29页 |
| ·植物的转化技术 | 第29-39页 |
| ·植物转化的方法 | 第30-32页 |
| ·间接转化法 | 第30-31页 |
| ·直接转化法 | 第31-32页 |
| ·种质系统转化法 | 第32页 |
| ·植物转化受体系统 | 第32-36页 |
| ·植物组织培养 | 第32-34页 |
| ·愈伤组织再生系统 | 第34-35页 |
| ·胚状体再生系统 | 第35页 |
| ·芽直接分化再生系统 | 第35页 |
| ·原生质体再生系统 | 第35-36页 |
| ·生殖细胞受体系统 | 第36页 |
| ·影响转化成功的因素 | 第36-37页 |
| ·受体基因型及农杆菌类型 | 第36页 |
| ·植物材料的处理方法及共培养条件 | 第36-37页 |
| ·载体类型及抗生素 | 第37页 |
| ·植物转化载体 | 第37-38页 |
| ·豆科植物转化研究进展 | 第38-39页 |
| ·RNA沉默技术在植物基因功能研究中的应用 | 第39-44页 |
| ·RNA沉默现象的发现及机理 | 第40-41页 |
| ·RNA沉默引起基因沉默的途径及特点 | 第41页 |
| ·植物RNA沉默载体的构建策略 | 第41-42页 |
| ·RNA沉默技术在植物基因功能研究中的应用 | 第42-43页 |
| ·豆科植物RNA沉默研究进展 | 第43-44页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第44-46页 |
| 2.材料与方法 | 第46-60页 |
| ·材料 | 第46-52页 |
| ·质粒和菌株 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46-49页 |
| ·植物培养基、常用试剂及缓冲液配置 | 第49-51页 |
| ·引物 | 第51页 |
| ·植物转化及分子生物学相关试剂 | 第51-52页 |
| ·主要仪器 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-60页 |
| ·分子生物学基本操作 | 第52页 |
| ·转化受体系统建立的相关方法 | 第52页 |
| ·转化体系建立的相关方法 | 第52-53页 |
| ·Asnodf32在根瘤衰老过程中功能研究的相关方法 | 第53-57页 |
| ·数据分析 | 第57-58页 |
| ·技术路线 | 第58-60页 |
| 3.结果与讨论 | 第60-92页 |
| ·紫云英转化受体系统的建立 | 第60-69页 |
| ·体细胞胚受体系统的建立 | 第60-65页 |
| ·外植体类型、植物激素对体胚诱导的影响 | 第60-61页 |
| ·蔗糖浓度和外植体年龄对体胚诱导的影响 | 第61-62页 |
| ·CH对体胚诱导的影响 | 第62-63页 |
| ·植物激素对体胚生长及分化的影响 | 第63-64页 |
| ·小植株的再生及移栽 | 第64-65页 |
| ·愈伤组织再生系统的建立 | 第65-67页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第65-67页 |
| ·愈伤组织的分化及植株再生 | 第67页 |
| ·植株的再生及移栽 | 第67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-69页 |
| ·紫云英转化系统的建立 | 第69-74页 |
| ·基于根癌农杆菌的转化系统的建立 | 第69-70页 |
| ·转化程序 | 第69页 |
| ·转化植株的检测 | 第69-70页 |
| ·转化植株的结瘤实验 | 第70页 |
| ·基于发根农杆菌转化系统的建立 | 第70-72页 |
| ·发根的诱导 | 第71-72页 |
| ·发根的结瘤 | 第72页 |
| ·小结 | 第72-73页 |
| ·讨论 | 第73-74页 |
| ·Asnodr32在根瘤衰老过程中的功能研究 | 第74-89页 |
| ·Asnodf32基因的克隆 | 第74页 |
| ·Asnodf32RNAi载体的构建 | 第74-76页 |
| ·RNAi片段的克隆 | 第74页 |
| ·RNAi目的载体的构建 | 第74-75页 |
| ·重组质粒的验证 | 第75-76页 |
| ·根癌农杆菌EHA105转化植株的获得及检测 | 第76-78页 |
| ·转化植株的获得 | 第76-77页 |
| ·Asnodf32抑制效率的检测 | 第77-78页 |
| ·Asnodf32沉默的根瘤长度增加 | 第78页 |
| ·发根农杆菌K599转化复合型植株的获得及Asnodf32在根瘤衰老过程中作用的研究 | 第78-86页 |
| ·Asnodf32抑制效率的检测 | 第78-79页 |
| ·Asnodf32沉默根瘤长度增加 | 第79-80页 |
| ·Asnodf32的沉默延缓了根瘤的衰老 | 第80-82页 |
| ·根瘤细胞凋亡的TUNEL检测 | 第82-84页 |
| ·根瘤细胞内部结构的观察 | 第84-86页 |
| ·Asnodf32的沉默延长了根瘤有效固氮时间 | 第86页 |
| ·小结 | 第86-87页 |
| ·讨论 | 第87-89页 |
| ·Asnodf32在植物胁迫反应中的作用初探 | 第89-92页 |
| ·胁迫处理 | 第89页 |
| ·Asnodf32表达量的检测 | 第89-90页 |
| ·讨论 | 第90-92页 |
| 结论和创新点 | 第92-94页 |
| 文章发表情况 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-112页 |
| 致谢 | 第112-114页 |
| 附录 | 第114页 |