| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 缩写名词表 | 第13-14页 |
| 1 前言 | 第14-31页 |
| ·植物逆境胁迫应答的分子机制 | 第14-20页 |
| ·植物逆境胁迫应答信号传导的一般途径 | 第14-16页 |
| ·植物对外界刺激的感应 | 第16页 |
| ·上游信号和内源信号 | 第16-17页 |
| ·Ca~(2+)的调控及磷酸级联反应 | 第17页 |
| ·转录因子的调控 | 第17-19页 |
| ·下游抗逆基因的表达 | 第19-20页 |
| ·植物RNA代谢与逆境胁迫应答 | 第20-25页 |
| ·HYL1:双链RNA结合蛋白 | 第20-21页 |
| ·ABH1:mRNA帽子结合蛋白 | 第21页 |
| ·SAD1:Sm-like snRNP蛋白 | 第21-22页 |
| ·AKIP1:单链RNA结合蛋白 | 第22-23页 |
| ·SRL1:SR-like剪接蛋白 | 第23页 |
| ·LOS4:类RNA解旋酶蛋白 | 第23-24页 |
| ·STABILIZED1:pre-mRNA剪接子 | 第24-25页 |
| ·FCA:RNA结合蛋白 | 第25页 |
| ·SKIP的功能研究 | 第25-30页 |
| ·SNW/SKIP的结构特点 | 第25-27页 |
| ·SKIP参与mRNA形成和运输的多个步骤 | 第27-29页 |
| ·SKIP调控多种信号途径 | 第29-30页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
| 2 材料和方法 | 第31-43页 |
| ·水稻材料 | 第31页 |
| ·菌株和载体 | 第31-33页 |
| ·候选基因的选择与验证 | 第33页 |
| ·载体构建及遗传转化 | 第33-34页 |
| ·转化载体的构建 | 第33-34页 |
| ·遗传转化 | 第34页 |
| ·基因表达分析 | 第34-35页 |
| ·RNA的抽提和Northern杂交 | 第34-35页 |
| ·反转录及Real-time PCR | 第35页 |
| ·Nuclear run on分析 | 第35页 |
| ·核蛋白的抽提和Western Blot | 第35-36页 |
| ·水稻苗期材料的逆境胁迫和激素处理 | 第36页 |
| ·转基因植株苗期抗逆性实验 | 第36-38页 |
| ·转基因植株苗期抗盐性实验 | 第36页 |
| ·转基因植株苗期ABA敏感性实验 | 第36-37页 |
| ·转基因植株苗期模拟干旱实验 | 第37页 |
| ·转基因植株苗期抗旱性实验 | 第37页 |
| ·转基因植株苗期耐冷性实验 | 第37-38页 |
| ·转基因植株成株期抗旱实验 | 第38-39页 |
| ·转基因植株成株期大田抗旱实验 | 第38页 |
| ·转基因植株成株期PVC管抗旱实验 | 第38-39页 |
| ·抗逆性相关生理指标测定 | 第39-40页 |
| ·钠钾离子浓度测定 | 第39页 |
| ·细胞膜透性检测 | 第39页 |
| ·过氧化物歧化酶(SOD)比活力测定 | 第39-40页 |
| ·丙二醛(MDA)含量测定 | 第40页 |
| ·组织细胞学实验 | 第40-41页 |
| ·石蜡切片 | 第40页 |
| ·整体装片(Whole mount) | 第40页 |
| ·原位杂交(In situ hybridization) | 第40-41页 |
| ·亚细胞定位 | 第41页 |
| ·酵母互补实验 | 第41页 |
| ·蛋白质互作分析 | 第41-43页 |
| ·酵母双杂交 | 第41-42页 |
| ·蛋白质原核表达 | 第42页 |
| ·GST pull down | 第42-43页 |
| ·生物信息学分析 | 第43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-107页 |
| ·候选基因的载体构建、遗传转化及检测结果 | 第43-44页 |
| ·候选基因的表达分析 | 第44-45页 |
| ·T1代转基因植株的抗逆筛选 | 第45-48页 |
| ·T1代转基因植株苗期抗盐筛选 | 第45-47页 |
| ·T1代转基因植株成株期抗旱筛选 | 第47-48页 |
| ·OsSKIPa(V2Chip 15-O06)基因的功能研究 | 第48-103页 |
| ·OsSKIPa基因的序列分析 | 第48-54页 |
| ·OsSKIPa基因的表达模式分析 | 第54-59页 |
| ·OsSKIPa可互补酵母同源基因prp45的缺失突变体 | 第59-60页 |
| ·OsSKIPa RNAi抑制表达转基因植株(S59R)的表型分析 | 第60-66页 |
| ·OsSKIPa超表达转基因植株(S58S)的抗逆性分析 | 第66-79页 |
| ·OsSKIPa调节转基因水稻ROS的清除能力 | 第79-81页 |
| ·OsSKIPa抑制表达和超表达转基因植株中基因表达变化分析 | 第81-89页 |
| ·OsSKIPa的蛋白互作研究 | 第89-103页 |
| ·RAMY1(V2Chip 20-L04)基因功能的初步分析 | 第103-107页 |
| ·RAMY在不同水稻品种中具有不同的等位基因 | 第103-105页 |
| ·RAMY1的组织表达谱 | 第105页 |
| ·RAMY1超表达导致转基因植株根卷曲 | 第105-107页 |
| 4 讨论 | 第107-114页 |
| ·OsSKIPa基因功能的探讨 | 第107-110页 |
| ·保守的SNW/SKIP蛋白参与调控多个途径 | 第107页 |
| ·OsSKIPa决定细胞活力和植物生长 | 第107-108页 |
| ·OsSKIPa调控水稻的抗逆性 | 第108-110页 |
| ·SKIP互作蛋白 | 第110页 |
| ·RAMY1基因功能的探讨 | 第110-111页 |
| ·RAMY1调节水稻的抗逆性 | 第110-111页 |
| ·RAMY1影响水稻的根构型 | 第111页 |
| ·下一步工作设想 | 第111-114页 |
| ·抗逆功能基因的应用 | 第111-112页 |
| ·OsSKIPa互作蛋白的功能研究 | 第112页 |
| ·其它候选基因的功能研究 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 附录 | 第123-165页 |
| 附录Ⅰ.引物列表 | 第123-128页 |
| 附录Ⅱ.S58S和S59R的芯片分析数据列表 | 第128-155页 |
| 附录Ⅲ.部分实验的详细操作程序 | 第155-164页 |
| 附录Ⅳ.作者简介 | 第164-165页 |
