英文缩写符号及中英文对照表 | 第1-13页 |
中文摘要 | 第13-15页 |
英文摘要 | 第15-18页 |
1 引言 | 第18-30页 |
·光合作用的光抑制 | 第18-22页 |
·光抑制的发生机理 | 第18-19页 |
·光抑制、光破坏的防御 | 第19-22页 |
·减少光吸收,增加光能利用能力 | 第19页 |
·通过状态转换向PSI 分配较多的光能 | 第19-20页 |
·依赖于叶黄素循环的热耗散 | 第20-21页 |
·光呼吸 | 第21页 |
·Mehler 反应 | 第21-22页 |
·叶黄素循环的组成 | 第22-25页 |
·叶黄素循环的主要功能 | 第22-25页 |
·热耗散 | 第23-24页 |
·防止膜脂过氧化 | 第24页 |
·稳定类囊体膜结构 | 第24页 |
·与ABA 合成途径 | 第24-25页 |
·蓝光的响应 | 第25页 |
·紫黄质脱环氧酶(VDE) | 第25-29页 |
·紫黄质脱环氧化酶的分子特性 | 第25-26页 |
·紫黄质脱环氧化酶的调节 | 第26-28页 |
·pH 值 | 第26-27页 |
·膜脂 | 第27页 |
·抗坏血酸(Vc) | 第27页 |
·巯基化合物和o-菲啶 | 第27页 |
·温度 | 第27-28页 |
·UV-B | 第28页 |
·紫黄质脱环氧化酶基因的研究 | 第28-29页 |
·VDE 基因的克隆 | 第28页 |
·VDE 基因的拷贝数 | 第28页 |
·VDE 基因mRNA 的器官特异性表达 | 第28页 |
·光强对VDE mRNA 水平表达的影响 | 第28-29页 |
·本研究的目的、意义 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-49页 |
·试验材料与处理 | 第30-31页 |
·植物材料 | 第30页 |
·材料处理 | 第30页 |
·番茄的处理 | 第30页 |
·烟草的处理 | 第30页 |
·菌株与质粒 | 第30-31页 |
·酶及生化试剂 | 第31页 |
·PCR 引物 | 第31页 |
·试验方法 | 第31-49页 |
·总RNA 的提取 | 第31-33页 |
·RNA 反转录 | 第33页 |
·番茄紫黄质脱环氧化酶基因全长的克隆 | 第33-34页 |
·真核表达载体的构建 | 第34-40页 |
·载体构建 | 第34-35页 |
·连接 | 第35页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
·转化及克隆筛选 | 第36页 |
·碱法小量提取质粒DNA | 第36-37页 |
·质粒DNA 的酶切鉴定 | 第37页 |
·电泳目的基因片段的回收 | 第37-38页 |
·DNA 序列测定 | 第38页 |
·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备及转化 | 第38-40页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第38-39页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第39页 |
·农杆菌介导转化烟草 | 第39-40页 |
·转基因烟草植株的PCR 检测 | 第40-41页 |
·CTAB 法微量法提取基因组DNA | 第40页 |
·转基因植株的PCR 筛选 | 第40-41页 |
·基因表达的半定量PCR 分析 | 第41页 |
·紫黄质脱环氧化酶的原核表达及Western 杂交 | 第41-46页 |
·原核表达载体的构建 | 第41-42页 |
·E.coli BL21 原核表达的诱导 | 第42页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第42-43页 |
·目的蛋白纯化 | 第43页 |
·抗体制备 | 第43-44页 |
·抗血清效价的测定(试管微量沉淀法) | 第44页 |
·Western 杂交过程 | 第44-46页 |
·转基因番茄生理指标的测定 | 第46-49页 |
·净光合速率的测定 | 第46-47页 |
·叶绿素荧光参数的测定 | 第47页 |
·叶黄素循环色素组分分析 | 第47页 |
·过氧化氢(H_2O_2)含量的测定 | 第47-48页 |
·O_2~(-|—) 的测定 | 第48页 |
·丙二醛(MDA)含量的测定 | 第48页 |
·叶绿素含量的测定 | 第48页 |
·可溶性蛋白的测定 | 第48-49页 |
3 结果与分析 | 第49-67页 |
·番茄VDE 基因的克隆 | 第49-50页 |
·番茄叶片总RNA 的提取及反转录 | 第49页 |
·番茄VDE 基因全长的克隆 | 第49-50页 |
·番茄VDE 基因的特征分析 | 第50-53页 |
·LeVDE 氨基酸序列同源性分析 | 第50-52页 |
·LeVDE 基因编码蛋白的生化特性分析 | 第52-53页 |
·编码基因蛋白的疏水性分析 | 第52页 |
·番茄VDE 蛋白的跨膜特性分析 | 第52-53页 |
·LeVDE 在大肠杆菌中的表达 | 第53-56页 |
·原核表达载体pET::LeVDE 的构建 | 第53-54页 |
·SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第54-55页 |
·低温弱光和强光下LeVDE 在蛋白水平的表达特征 | 第55-56页 |
·LeVDE 转化烟草 | 第56-60页 |
·正、反义表达载体的构建 | 第56-57页 |
·表达载体的检测 | 第57-60页 |
·转LeVDE 基因对总叶绿素含量以及叶绿素a/b 的影响 | 第60-61页 |
·过量和抑制LeVDE 的表达影响PSII 对光抑制的敏感性 | 第61-67页 |
·过量和抑制LeVDE的表达在强光胁迫下对PSII光抑制敏感性的影响 | 第61-62页 |
·LeVDE 的过量和抑制表达对叶黄素循环脱环氧化状态的影响 | 第61页 |
·过量与抑制LeVDE 的表达对强光胁迫下NPQ 的影响 | 第61-62页 |
·过量与抑制 LeVDE 的表达对强光胁迫下对光合速率的影响 | 第62页 |
·过量与抑制LeVDE 的表达对强光胁迫下对Fv/Fm的影响 | 第62页 |
·过量和抑制LeVDE表达在低温弱光胁迫下对PSII光抑制敏感性的影响 | 第62-67页 |
·LeVDE 的过量表达和抑制对低温弱光胁迫下叶黄素循环脱环氧化状态和NPQ 的影响 | 第62-64页 |
·过量与抑制 LeVDE 的表达在低温弱光胁迫下对光合速率的影响 | 第64-65页 |
·过量与抑制LeVDE 的表达在低温弱光胁迫下对Fv/Fm的影响 | 第65页 |
·过量与抑制 LeVDE 的表达在低温弱光胁迫下对的 H_2O_2和O_2~(-|—) 的影响 | 第65页 |
·过量与抑制LeVDE 的表达在低温弱光胁迫下对的MDA的影响 | 第65-67页 |
4 讨论 | 第67-70页 |
·LeVDE 基因编码紫黄质脱环氧化酶 | 第67-68页 |
·过量和抑制 LeVDE 的表达在强光和低温弱光胁迫下对 PSII光抑制敏感性的影响 | 第68-70页 |
5 主要结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |
攻读学位期间撰写的论文 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |