| 缩略词表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一部分 丹酚酸A抗心肌缺血再灌注损伤体外研究 | 第15-42页 |
| 一. 主要材料、试剂与仪器设备 | 第15-18页 |
| 二.实验方法 | 第18-24页 |
| 1. 动物 | 第18页 |
| 2. 细胞培养 | 第18页 |
| 3. 丹酚酸A体外分子水平氧自由基清除实验 | 第18-21页 |
| ·DPPH自由基清除实验 | 第18-19页 |
| ·超氧阴离子(superoxide anion,O_2·~-)清除实验 | 第19页 |
| ·羟自由基(hydroxy radical,·OH)清除实验 | 第19页 |
| ·过氧自由基(peroxide radical,ROO~.)清除实验 | 第19-20页 |
| ·过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)清除实验 | 第20页 |
| ·过氧化亚硝酸盐(peroxynitrite,ONOO~-)清除实验 | 第20-21页 |
| 4. 丹酚酸A对低氧/复灌诱导H9c2细胞损伤的保护作用 | 第21-23页 |
| ·丹酚酸A对低氧/复灌诱导细胞存活率下降的影响 | 第21页 |
| ·荧光显微镜及激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内ROS水平 | 第21-22页 |
| ·流式细胞术检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial menbrane potential,ΔΨm) | 第22-23页 |
| 5. 丹酚酸A对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用 | 第23页 |
| 6. 统计方法 | 第23-24页 |
| 三.实验结果 | 第24-38页 |
| 1. 体外分子水平氧自由基清除活性 | 第24-30页 |
| ·筛选结果 | 第24页 |
| ·丹酚酸A体外清除氧自由基活性 | 第24-30页 |
| 2. 丹酚酸A对低氧/复灌损伤诱导细胞存活率下降的影响 | 第30-31页 |
| 3. 荧光显微镜及激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内活性氧水平 | 第31-33页 |
| ·DHE染色 | 第31-32页 |
| ·H_2DCF-DA染色 | 第32-33页 |
| 4. 细胞线粒体膜电位(Mitochondria Menbrane Potential,MMP,ΔΨm)测定 | 第33-34页 |
| 5. 大鼠离体心脏冠脉流量的时效关系与量效关系 | 第34-35页 |
| 6. 大鼠离体心脏左室舒张末压的时效关系与量效关系 | 第35-36页 |
| 7. 大鼠离体心脏左室内压最大上升速率的时效关系与量效关系 | 第36-37页 |
| 8. 大鼠离体心脏左室内压最大下降速率的时效关系与量效关系 | 第37-38页 |
| 四.讨论 | 第38-42页 |
| 第二部分 WS070117抗脂质过氧化损伤研究 | 第42-64页 |
| 一. 主要材料、试剂与仪器设备 | 第42-44页 |
| 二. 实验方法 | 第44-52页 |
| 1. 动物 | 第44页 |
| 2. 细胞培养 | 第44-45页 |
| 3. WS070117体外清除氧自由基实验 | 第45-47页 |
| ·DPPH自由基清除实验 | 第45页 |
| ·超氧阴离子(superoxide anion,O_2·~-)清除实验 | 第45页 |
| ·羟基自由基(hydroxy radical,·OH)清除实验 | 第45-46页 |
| ·过氧自由基(superoxide radical,ROO~.)清除实验 | 第46页 |
| ·过氧化氢(Hydrogen peroxide,H_2O_2)清除实验 | 第46页 |
| ·过氧化亚硝酸盐(peroxynitrite,ONOO~-)清除实验 | 第46-47页 |
| 4. WS070117对TNF-α诱导细胞氧化损伤保护作用 | 第47-49页 |
| ·TNF-a处理时间和浓度确定 | 第47页 |
| ·流式细胞术检测细胞内ROS水平 | 第47-48页 |
| ·化学发光法检测细胞内NADPH氧化酶活性 | 第48-49页 |
| 5. WS070117对apoE-/-小鼠氧化应激水平的影响 | 第49-52页 |
| ·免疫荧光检测肝脏内ROS产生 | 第49页 |
| ·脂质过氧化检测 | 第49-50页 |
| ·总SOD检测 | 第50-52页 |
| 6. 统计方法 | 第52页 |
| 三.实验结果 | 第52-62页 |
| 1. 体外分子水平氧自由基清除活性 | 第52-57页 |
| ·筛药结果 | 第52页 |
| ·WS070117体外分子水平氧自由基活性 | 第52-57页 |
| 2. 流式细胞术检测细胞内ROS水平 | 第57-59页 |
| 3. 化学发光法检测细胞内NADPH氧化酶(NOX)活性 | 第59-60页 |
| 4. apoE-/-小鼠肝脏活性氧染色 | 第60页 |
| 5. apoE-/-小鼠血清及肝脏脂质过氧化水平 | 第60-61页 |
| 6. apoE-/-小鼠肝脏总SOD活力 | 第61-62页 |
| 四.讨论 | 第62-64页 |
| 综合讨论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简历 | 第73-74页 |
| 硕士期间撰写论文 | 第74页 |
