| 目录 | 第1-7页 |
| 图表目录 | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 一 引言 | 第12-19页 |
| 1 BRs的研究进展 | 第12-14页 |
| ·BR的生理功能 | 第12-13页 |
| ·BR的信号转导 | 第13-14页 |
| 2 MSL离子通道 | 第14-17页 |
| ·MSL基因家族 | 第14-16页 |
| ·MSL基因的表达调控 | 第16页 |
| ·植物MSL蛋白对各种刺激的响应 | 第16-17页 |
| 3 研究目的及意义 | 第17-19页 |
| 二 实验材料与方法 | 第19-34页 |
| 1 Realtime PCR检测基因表达水平 | 第19-20页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·拟南芥总RNA提取及反转录 | 第19-20页 |
| ·Realtime PCR引物设计及合成 | 第20页 |
| ·Realtime PCR | 第20页 |
| 2 Gateway系统构建过表达及亚细胞定位载体 | 第20-24页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·拟南芥总RNA提取及反转录 | 第21页 |
| ·拟南芥总DNA提取 | 第21页 |
| ·引物序列 | 第21页 |
| ·PCR扩增目的基因CDS全长 | 第21-22页 |
| ·入门载体构建 | 第22-23页 |
| ·表达载体构建 | 第23-24页 |
| ·转化根癌农杆菌gv3101 | 第24页 |
| 3 RNA干扰载体构建 | 第24-28页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·拟南芥总RNA提取及反转录 | 第24页 |
| ·RNA干扰靶位点的确定及引物设计 | 第24-26页 |
| ·RNA干扰片段的PCR扩增 | 第26页 |
| ·RNA干扰片段连接pMD 18-T载体 | 第26-27页 |
| ·RNA干扰片段正向连接pTCK309载体 | 第27-28页 |
| ·RNA干扰片段反向连接pTCK309-S重组载体 | 第28页 |
| ·RNA干扰载体转化根癌农杆菌gv3101 | 第28页 |
| 4 Artificial miRNA干扰载体构建 | 第28-34页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·Artificial miRNA引物设计 | 第29页 |
| ·Artificial miRNA转录模板的扩增原理 | 第29-30页 |
| ·Overlapping PCR | 第30-32页 |
| ·Artificial miRNA转录模板连接pMD18-T载体 | 第32-33页 |
| ·Artificial miRNA转录模板连接目的载体pSN1301 | 第33页 |
| ·Artificial miRNA干扰载体转化根癌农杆菌gv3101 | 第33-34页 |
| 三 实验结果 | 第34-63页 |
| 1 MSL蛋白生物信息学分析 | 第34-39页 |
| ·MSL1 | 第34-35页 |
| ·MSL11 | 第35-36页 |
| ·MSL9 | 第36-37页 |
| ·MSL10 | 第37-38页 |
| ·MSL12 | 第38-39页 |
| 2 MSL基因的表达模式 | 第39-42页 |
| ·MSL1 | 第39-40页 |
| ·MSL9 | 第40-41页 |
| ·MSL10 | 第41-42页 |
| 3 过表达和亚细胞定位载体构建 | 第42-49页 |
| ·入门载体构建 | 第42-45页 |
| ·表达载体构建 | 第45-47页 |
| ·农杆菌菌液PCR鉴定 | 第47-49页 |
| 4 RNA干扰载体的构建 | 第49-56页 |
| ·重组T载体鉴定 | 第49-51页 |
| ·pTCK309-S重组质粒鉴定 | 第51-53页 |
| ·pTCK309-S-A重组质粒鉴定 | 第53-56页 |
| ·pTCK309 RNA干扰载体农杆菌菌液PCR鉴定 | 第56页 |
| 5 Artificial miRNA干扰载体构建 | 第56-63页 |
| ·Overlapping PCR | 第56-58页 |
| ·重组T载体鉴定 | 第58-60页 |
| ·pSN1301重组载体鉴定 | 第60-62页 |
| ·AmiRNA干扰载体农杆菌菌液PCR鉴定 | 第62-63页 |
| 四 讨论 | 第63-67页 |
| 1 MSL基因家族的生物信息学分析 | 第63-64页 |
| ·拟南芥MSL基因家族的进化关系 | 第63页 |
| ·拟南芥MSL蛋白的拓扑结构预测 | 第63-64页 |
| ·拟南芥MSL基因的组织特异性表达 | 第64页 |
| 2 MSL基因的表达调控 | 第64-66页 |
| ·MSL1 | 第64-65页 |
| ·MSL9 | 第65页 |
| ·MSL10 | 第65-66页 |
| 3 MSL蛋白的功能研究 | 第66-67页 |
| 五 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
