| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-20页 |
| 1 柿果贮藏保鲜技术的研究现状 | 第9-10页 |
| 2 乙烯对果实成熟的作用 | 第10页 |
| 3 乙烯的生物合成 | 第10-11页 |
| ·乙烯生物合成的途径 | 第10页 |
| ·乙烯生物合成的关键酶基因 | 第10-11页 |
| ·乙烯受体基因 | 第11页 |
| 4 调控果实成熟的基因工程研究 | 第11-14页 |
| ·反义RNA技术 | 第11-12页 |
| ·RNA干扰技术 | 第12-14页 |
| 5 农杆菌介导的遗传转化 | 第14-18页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化机理 | 第14-16页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化研究进展 | 第16页 |
| ·高效遗传转化系统的影响因素 | 第16-18页 |
| 6 本研究的目的意义 | 第18-20页 |
| 第一章 上西早生柿ETR5基因克隆及RNA干扰植物表达载体的构建 | 第20-28页 |
| 1 材料与试剂 | 第20-21页 |
| ·试验材料及主要仪器 | 第20-21页 |
| ·主要试剂溶液的配制 | 第21页 |
| 2 方法 | 第21-23页 |
| ·表达载体引物设计 | 第21-22页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第22页 |
| ·正反义片断的连接 | 第22-23页 |
| ·表达载体的构建 | 第23页 |
| ·RNAi植物表达载体转化农杆菌EHA101 | 第23页 |
| ·阳性菌落的鉴定 | 第23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-25页 |
| ·柿果ETR5基因RNAi植物表达载体的鉴定 | 第23-25页 |
| ·农杆菌中表达载体的菌液PCR鉴定 | 第25页 |
| 4 讨论 | 第25-27页 |
| ·表达载体的选择 | 第25页 |
| ·限制性内切酶的使用 | 第25-26页 |
| ·连接片段的浓度比 | 第26页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
| 5 结论 | 第27-28页 |
| 第二章 PSAMK311-ETR5-RNAI植物表达载体对上西柿的遗传转化 | 第28-37页 |
| 1 材料与试剂 | 第28-30页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·农杆菌菌株和质粒 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·主要试验试剂及配方 | 第29-30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| 2 试验方法 | 第30-32页 |
| ·菌株的活化 | 第30页 |
| ·遗传转化基本工艺 | 第30页 |
| ·AS浓度及添加方式对遗传转化的影响 | 第30-31页 |
| ·Spc梯度筛选的遗传转化的影响 | 第31页 |
| ·利用优化后的遗传转化工艺得到抗性苗 | 第31页 |
| ·转化植株的PCR鉴定 | 第31-32页 |
| ·评价指标和计算公式 | 第32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-34页 |
| ·AS对遗传转化的影响 | 第32-33页 |
| ·Spc梯度筛选对遗传转化的影响 | 第33-34页 |
| ·利用优化后遗传转化工艺转化上西柿的试验 | 第34页 |
| ·转化植株的PCR鉴定 | 第34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| ·影响遗传转化的因素 | 第34-35页 |
| ·选择培养过程中转化和再生细胞的一致性 | 第35-36页 |
| 5 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-42页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第42-43页 |
| 作者简历 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 发表论文 | 第45-51页 |