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嗜酸氧化亚铁硫杆菌铁氧还蛋白还原酶的表达纯化及酶活测定

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-6页
目录第6-8页
第一章 绪论第8-23页
   ·生物冶金(Bioleaching)第8-10页
     ·研究进展第8-9页
     ·面临的主要挑战第9页
     ·A.ferrooxidans菌及其铁氧化系统介绍第9-10页
   ·铁氧还蛋白还原酶(Ferredoxin-NADP+reductase,FNR)第10-22页
     ·铁氧还蛋白还原酶简介第10-11页
     ·FNR的结构第11-13页
     ·FNR的系统分类第13-21页
     ·FNR的催化机理第21-22页
   ·课题的研究目的与研究内容第22-23页
     ·依据和目的第22页
     ·论文的主要研究内容第22页
     ·论文课题受资助情况第22-23页
第二章 实验方法第23-35页
   ·实验的材料第23-28页
     ·实验所用菌种第23页
     ·实验所用培养基第23-24页
     ·基因组提取试剂第24页
     ·质粒提取试剂第24页
     ·琼脂糖凝胶电泳第24-25页
     ·快速胶回收纯化试剂第25页
     ·不连续体系SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第25-26页
     ·SDS-PAGE胶保存试剂及装置第26-27页
     ·亲和纯化试剂第27-28页
     ·实验仪器与设备第28页
   ·实验方法第28-33页
     ·PCR扩增第28-29页
     ·酶切PCR产物及载体pLM 1第29页
     ·载体和目的片段的连接反应第29页
     ·重组质粒的转化第29页
     ·阳性克隆子的筛选第29-30页
     ·重组质粒的转化第30页
     ·蛋白质的表达条件第30-31页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第31-32页
     ·蛋白质的纯化第32-33页
   ·测试分析方法第33-35页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第33页
     ·紫外分光光度计扫描(UV Scanning)第33-34页
     ·分子结构模型图的模拟(Molecular structure modeling)第34-35页
第三章 铁氧还蛋白还原酶的表达纯化第35-41页
   ·FNR基因的克隆第35-37页
     ·FNR基因的克隆第35-36页
     ·阳性克隆的筛选第36-37页
   ·FNR的表达第37-40页
     ·FNR表达条件的确定第37-38页
     ·FNR大规模的表达第38页
     ·SDS-PAGE分析铁氧还蛋白还原酶第38-39页
     ·UV/Vis分析FNR第39-40页
   ·本章小结第40-41页
第四章 分子结构模拟第41-44页
   ·序列分析第41页
   ·结构模拟第41-43页
   ·本章小结第43-44页
第五章 活性测定第44-48页
   ·测活方法第44-47页
   ·测活结果第47页
   ·本章小结第47-48页
第六章 结论第48-49页
参考文献第49-58页
致谢第58-59页
研究成果第59页

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