摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
前言 | 第13-15页 |
第一章 理论研究 | 第15-25页 |
1 中医对肺纤维化的认识 | 第15-17页 |
1.1 肺纤维化病名归属 | 第15页 |
1.2 肺纤维化病因、病机 | 第15-16页 |
1.3 辨证论治 | 第16-17页 |
2 西医学对肺纤维化的认识 | 第17-20页 |
2.1 发病机制 | 第17-18页 |
2.2 诊断 | 第18-19页 |
2.3 治疗 | 第19-20页 |
2.4 未来展望 | 第20页 |
3 IPF与衰老 | 第20-23页 |
3.1 基因组不稳定 | 第20-21页 |
3.2 端粒缩短 | 第21页 |
3.3 表观遗传学改变 | 第21页 |
3.4 蛋白组稳态失衡 | 第21页 |
3.5 营养感受失调 | 第21-22页 |
3.6 线粒体功能障碍 | 第22页 |
3.7 细胞衰老 | 第22页 |
3.8 干细胞衰竭 | 第22页 |
3.9 细胞间通讯改变 | 第22-23页 |
4 细胞衰老与肺纤维化 | 第23页 |
5 陈皮碱性提取物的前期研究基础 | 第23-24页 |
6 立题依据 | 第24-25页 |
第二章 陈皮碱性提取物定性分析 | 第25-30页 |
1 前言 | 第25页 |
2 材料与方法 | 第25-27页 |
2.1 试剂和仪器 | 第25-26页 |
2.2 CAE提取方法 | 第26页 |
2.3 供试样品制备 | 第26-27页 |
2.4 色谱及质谱分析条件 | 第27页 |
2.5 数据采集和分析 | 第27页 |
3 CAE 中化学成分定性分析结果 | 第27-29页 |
4 讨论 | 第29-30页 |
第三章 陈皮碱性提取物抗小鼠肺纤维化作用 | 第30-48页 |
1 前言 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-38页 |
2.1 抗体、试剂和仪器 | 第31-32页 |
2.2 动物实验流程 | 第32-33页 |
2.3 石蜡切片制作 | 第33页 |
2.4 苏木精-伊红染色(Hematoxylin & eosin staining,H&E) | 第33-34页 |
2.5 马松染色(Masson staining) | 第34页 |
2.6 Ashcroft评分 | 第34-35页 |
2.7 ELISA检测血清中TGF-β和TNF-α含量测定 | 第35-36页 |
2.8 Western Blot检测 | 第36-38页 |
2.9 数据统计和分析 | 第38页 |
3 结果 | 第38-45页 |
3.1 CAE对肺纤维化模型小鼠的作用 | 第38-45页 |
3.2 CAE对肝脏毒性作用 | 第45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
第四章 陈皮碱性提取物抑制肺成纤维细胞衰老发挥抗肺纤维化作用分子机制研究 | 第48-80页 |
1 前言 | 第48-49页 |
2 材料与方法 | 第49-57页 |
2.1 抗体、试剂和仪器 | 第49-50页 |
2.2 肺组织冰冻切片制备 | 第50页 |
2.3 免疫荧光 | 第50页 |
2.4 细胞分离和培养 | 第50-52页 |
2.5 β-半乳糖苷酶染色 | 第52-53页 |
2.6 western blot实验 | 第53页 |
2.7 Real-time qPCR | 第53-56页 |
2.8 慢病毒转染细胞实验 | 第56页 |
2.9 小鼠肺纤维化的模型建立与给药治疗 | 第56页 |
2.10 体内干扰小鼠肺组织COX-2基因与给药治疗 | 第56-57页 |
2.11 H&E染色 | 第57页 |
2.12 Masson染色 | 第57页 |
2.13 数据处理与统计分析 | 第57页 |
3 结果 | 第57-77页 |
3.1 CAE可以抑制肺组织中成纤维细胞衰老 | 第57-60页 |
3.2 CAE在体外可以抑制依托泊苷诱导的细胞衰老 | 第60-66页 |
3.3 CAE可以抑制衰老相关分泌因子(SASP)表达 | 第66页 |
3.4 CAE通过p53抑制肺成纤维细胞衰老 | 第66-69页 |
3.5 CAE激活COX-2和细胞衰老相关 | 第69-72页 |
3.6 体内验证COX-2在CAE抑制成纤维细胞衰老中的作用 | 第72-77页 |
4 讨论 | 第77-80页 |
总结 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-91页 |
附录 | 第91-101页 |
附录一、缩略词表 | 第91-93页 |
附录二、文献综述 | 第93-101页 |
参考文献 | 第97-101页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第101-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
作者简介 | 第103页 |