| 中文摘要 | 第14-16页 |
| ABSTRACT | 第16-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-30页 |
| 1.1 红球菌R04简介 | 第18-20页 |
| 1.1.1 联苯及多氯联苯的危害 | 第18-19页 |
| 1.1.2 红球菌R04是一种联苯降解菌株 | 第19-20页 |
| 1.2 原核细胞形态建成 | 第20-22页 |
| 1.2.1 细菌细胞壁 | 第20-21页 |
| 1.2.2 细菌细胞骨架 | 第21-22页 |
| 1.2.2.1 微管蛋白同源物——FtsZ | 第21页 |
| 1.2.2.2 肌动蛋白类似物——MreB家族 | 第21-22页 |
| 1.2.2.3 中间丝类似物——CreS | 第22页 |
| 1.3 细菌细胞分裂概述 | 第22-24页 |
| 1.4 枯草芽孢杆菌和大肠杆菌分裂的区别 | 第24-25页 |
| 1.5 本课题研究的目的及意义 | 第25页 |
| 参考文献 | 第25-30页 |
| 第二章 联苯代谢对红球菌R04细胞形态和分裂的影响 | 第30-41页 |
| 2.1 材料 | 第30-31页 |
| 2.1.1 菌株和培养基 | 第30-31页 |
| 2.1.2 主要试剂和仪器 | 第31页 |
| 2.2 方法 | 第31-32页 |
| 2.2.1 联苯(BP)标准曲线绘制 | 第31页 |
| 2.2.2 生物量测定及总代谢物和胞内代谢物取样 | 第31页 |
| 2.2.3 胞外代谢物的计算 | 第31-32页 |
| 2.2.4 样品测定 | 第32页 |
| 2.2.5 数据统计分析 | 第32页 |
| 2.2.6 荧光显微镜观察 | 第32页 |
| 2.3 结果 | 第32-38页 |
| 2.3.1 联苯标准曲线的绘制 | 第32页 |
| 2.3.2 产物检测 | 第32-33页 |
| 2.3.3 红球菌R04细胞的共代谢实验 | 第33-35页 |
| 2.3.4 荧光显微镜观察 | 第35-38页 |
| 2.3.4.1 联苯及联苯代谢物对红球菌R04野生型细胞的影响 | 第35-36页 |
| 2.3.4.2 联苯及联苯代谢物对红球菌R04缺陷型细胞的影响 | 第36-37页 |
| 2.3.4.3 联苯及联苯代谢物对大肠杆菌BL21细胞的影响 | 第37-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-41页 |
| 第三章 红球菌R04MreB蛋白纯化及表达量分析 | 第41-50页 |
| 3.1 材料 | 第41-42页 |
| 3.1.1 菌株、质粒和培养基 | 第41页 |
| 3.1.2 主要试剂和仪器 | 第41-42页 |
| 3.2 方法 | 第42-44页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第42页 |
| 3.2.2 目的基因的扩增 | 第42页 |
| 3.2.3 质粒的构建 | 第42页 |
| 3.2.4 目的蛋白的诱导表达 | 第42-43页 |
| 3.2.5 目的蛋白的纯化 | 第43页 |
| 3.2.6 多克隆抗体的制备 | 第43页 |
| 3.2.7 荧光显微镜观察 | 第43页 |
| 3.2.8 Western-blot检测 | 第43-44页 |
| 3.3 结果 | 第44-48页 |
| 3.3.1 MreB蛋白基因的扩增 | 第44页 |
| 3.3.2 重组表达载体的构建和鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3.3 MreB蛋白的表达 | 第45页 |
| 3.3.4 MreB蛋白的纯化 | 第45-46页 |
| 3.3.5 MreB抗体的制备与检测 | 第46页 |
| 3.3.6 荧光显微镜观察 | 第46-47页 |
| 3.3.7 不同碳源培养条件不同时期红球菌R04细胞MreB蛋白的表达检测 | 第47-48页 |
| 3.4 讨论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| 第四章 红球菌R04MreB蛋白在大肠杆菌中的表达和定位 | 第50-61页 |
| 4.1 材料 | 第50页 |
| 4.1.1 菌株、质粒和培养基 | 第50页 |
| 4.1.2 主要试剂和仪器 | 第50页 |
| 4.2 方法 | 第50-52页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第50-51页 |
| 4.2.2 目的基因的扩增 | 第51页 |
| 4.2.3 质粒的构建 | 第51-52页 |
| 4.2.3.1 重组质粒pGEX-6p-1-mreB的构建 | 第51页 |
| 4.2.3.2 重组质粒pET-m3c-mreB-gfp的构建 | 第51-52页 |
| 4.2.4 目的蛋白的诱导表达 | 第52页 |
| 4.2.4.1 MreB蛋白的诱导表达 | 第52页 |
| 4.2.4.2 MreB-GFP融合蛋白的诱导表达 | 第52页 |
| 4.2.5 荧光显微镜观察 | 第52页 |
| 4.2.5.1 MreB蛋白在大肠杆菌中的过表达 | 第52页 |
| 4.2.5.2 MreB蛋白在大肠杆菌中的定位 | 第52页 |
| 4.3 结果 | 第52-58页 |
| 4.3.1 红球菌R04MreB蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第52-55页 |
| 4.3.1.1 MreB蛋白基因的扩增 | 第53页 |
| 4.3.1.2 重组表达载体的构建和鉴定 | 第53-54页 |
| 4.3.1.3 MreB蛋白的诱导表达 | 第54页 |
| 4.3.1.4 荧光显微镜观察MreB蛋白在大肠杆菌中的过表达 | 第54-55页 |
| 4.3.2 红球菌R04MreB蛋白在大肠杆菌中的定位 | 第55-58页 |
| 4.3.2.1 MreB蛋白及绿色荧光蛋白基因的扩增 | 第55页 |
| 4.3.2.2 重组表达载体的构建和鉴定 | 第55-57页 |
| 4.3.2.3 MreB蛋白的诱导表达 | 第57页 |
| 4.3.2.4 荧光显微镜观察MreB蛋白在大肠杆菌中的定位 | 第57-58页 |
| 4.4 讨论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 个人简况与联系方式 | 第64-65页 |
