| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-14页 |
| 1.1 莱茵衣藻 | 第8-9页 |
| 1.1.1 简介 | 第8页 |
| 1.1.2 作为模式生物的优势 | 第8-9页 |
| 1.2 纤毛 | 第9页 |
| 1.2.1 简介 | 第9页 |
| 1.2.2 纤毛病 | 第9页 |
| 1.3 纤毛内运输 | 第9-11页 |
| 1.3.1 IFT蛋白 | 第10页 |
| 1.3.2 BBS蛋白 | 第10-11页 |
| 1.4 小G蛋白BBS3的研究现状 | 第11-12页 |
| 1.5 大肠杆菌原核表达系统 | 第12页 |
| 1.6 本课题的研究内容及意义 | 第12-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-21页 |
| 2.1.1 仪器与设备 | 第14-15页 |
| 2.1.2 菌种与质粒 | 第15页 |
| 2.1.3 药品与试剂 | 第15-18页 |
| 2.1.4 培养基 | 第18-19页 |
| 2.1.5 相关溶液的配制 | 第19-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-36页 |
| 2.2.1 莱茵衣藻bbs3的生物信息学分析 | 第21-22页 |
| 2.2.2 莱茵衣藻bbs3b目的基因的获得 | 第22-25页 |
| 2.2.3 原核表达载体的构建 | 第25-28页 |
| 2.2.4 融合蛋白的表达 | 第28-29页 |
| 2.2.5 融合蛋白的纯化 | 第29-31页 |
| 2.2.6 免疫与抗血清效价检测 | 第31-33页 |
| 2.2.7 抗体的鉴定与纯化 | 第33-36页 |
| 3 结果与讨论 | 第36-49页 |
| 3.1 莱茵衣藻bbs3的生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 3.1.1 BBS3b的核苷酸与氨基酸序列 | 第36页 |
| 3.1.2 BBS3b的理化性质 | 第36-37页 |
| 3.2 莱茵衣藻bbs3b目的基因的获得 | 第37-38页 |
| 3.2.1 模板DNA的获得 | 第37页 |
| 3.2.2 bbs3b基因的获得 | 第37-38页 |
| 3.3 原核表达载体的构建 | 第38-41页 |
| 3.3.1 原核表达载体pGEX-2T,pET-28a(+)的获得 | 第38-39页 |
| 3.3.2 重组质粒pGEX-2T-BBS3b,pET-28a(+)-BBS3b的验证 | 第39-41页 |
| 3.4 融合蛋白的表达 | 第41-42页 |
| 3.4.1 pGEX-2T-BBS3b融合蛋白的表达 | 第41页 |
| 3.4.2 pET-28a(+)-BBS3b融合蛋白的表达 | 第41-42页 |
| 3.5 融合蛋白的纯化 | 第42-44页 |
| 3.5.1 GST-BBS3b融合蛋白的纯化 | 第42-43页 |
| 3.5.2 6×His-BBS3b融合蛋白的纯化 | 第43-44页 |
| 3.5.3 纯化效果分析 | 第44页 |
| 3.6 免疫与抗血清效价检测 | 第44-45页 |
| 3.7 抗体的鉴定与纯化 | 第45-49页 |
| 3.7.1 莱茵衣藻样品的定量 | 第45-46页 |
| 3.7.2 BBS3b抗体的Protein A纯化 | 第46-47页 |
| 3.7.3 BBS3b抗体的硝酸纤维素膜亲和纯化 | 第47页 |
| 3.7.4 抗体的专一性检测 | 第47-49页 |
| 4 结论 | 第49-50页 |
| 4.1 全文总结 | 第49页 |
| 4.2 论文的创新点 | 第49页 |
| 4.3 论文的不足之处 | 第49-50页 |
| 5 展望 | 第50-51页 |
| 6 参考文献 | 第51-59页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第59-60页 |
| 8 致谢 | 第60页 |
