| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 绪论 | 第15-29页 |
| 1.1 蛙病毒概述 | 第15-25页 |
| 1.1.1 蛙病毒的分类 | 第15-17页 |
| 1.1.2 蛙病毒的形态、在细胞内的复制及分子特征 | 第17-19页 |
| 1.1.3 蛙病毒的分布和宿主以及流行病学研究现状 | 第19-22页 |
| 1.1.4 蛙病毒引起的宿主免疫 | 第22-23页 |
| 1.1.5 蛙病毒的病理症状及诊断技术 | 第23-25页 |
| 1.1.6 蛙病毒的防治的研究现状 | 第25页 |
| 1.2 东北林蛙概述 | 第25-26页 |
| 1.2.1 东北林蛙的分布及生物学特征 | 第25-26页 |
| 1.2.2 东北林蛙感染蛙病毒的种群现状 | 第26页 |
| 1.3 转录组学概述 | 第26-27页 |
| 1.3.1 转录组测序技术的发展 | 第26页 |
| 1.3.2 高通量转录组学的技术路线 | 第26-27页 |
| 1.3.3 高通量转录组学在两栖类动物研究中的应用 | 第27页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第27-29页 |
| 2 黑龙江省蛙病毒分布区内东北林蛙蛙病毒株的分离鉴定 | 第29-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第29页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-37页 |
| 2.2.1 野外采样 | 第30-31页 |
| 2.2.2 样品组织DNA的提取 | 第31页 |
| 2.2.3 引物设计 | 第31-32页 |
| 2.2.4 蛙病毒检测方法的建立 | 第32-33页 |
| 2.2.5 蛙病毒检测结果的分析与鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.6 东北林蛙的组织病理学观察 | 第34-35页 |
| 2.2.7 东北林蛙蛙病毒的分离、细胞培养及滴度测定 | 第35-36页 |
| 2.2.8 东北林蛙蛙病毒的滴度测定及电镜观察 | 第36-37页 |
| 2.3 实验结果 | 第37-44页 |
| 2.3.1 PCR及LAMP检测结果 | 第37-39页 |
| 2.3.2 调查区域东北林蛙蛙病毒的带毒率统计结果 | 第39-40页 |
| 2.3.3 调查区域东北林蛙蛙病毒的基因序列比对及进化树分析 | 第40-41页 |
| 2.3.4 东北林蛙蛙病毒的病理学检查 | 第41-42页 |
| 2.3.5 东北林蛙蛙病毒在EPC细胞上的分离及培养 | 第42-43页 |
| 2.3.6 东北林蛙蛙病毒的滴度及电镜结果 | 第43-44页 |
| 2.4 讨论 | 第44-45页 |
| 2.5 本章小结 | 第45-47页 |
| 3 蛙病毒胁迫下东北林蛙的转录组学研究及相关通路基因的验证 | 第47-63页 |
| 3.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第47-48页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第48页 |
| 3.1.3 实验动物及毒株 | 第48页 |
| 3.2 实验方法 | 第48-51页 |
| 3.2.1 实验室人工感染实验 | 第48页 |
| 3.2.2 林蛙肝脏组织的RNA提取及质量检测 | 第48页 |
| 3.2.3 林蛙肝脏组织转录组的高通量测序 | 第48-49页 |
| 3.2.4 林蛙肝脏组织转录组的生物信息分析流程 | 第49页 |
| 3.2.5 转录组测序的差异表达基因的验证 | 第49-51页 |
| 3.2.6 三个通路相关基因的mRNA表达变化研究 | 第51页 |
| 3.3 实验结果 | 第51-59页 |
| 3.3.1 林蛙肝脏转录本基因序列的统计及功能注释 | 第51-53页 |
| 3.3.2 蛙病毒胁迫下差异表达基因的统计与KEGG富集分析 | 第53-55页 |
| 3.3.3 蛙病毒胁迫下差异表达基因的验证 | 第55-57页 |
| 3.3.4 蛙病毒胁迫下三个重要免疫相关基因的mRNA表达变化 | 第57-59页 |
| 3.4 讨论 | 第59-61页 |
| 3.5 本章小结 | 第61-63页 |
| 4 黄芪、板蓝根注射液抗东北林蛙蛙病毒的体内外实验 | 第63-79页 |
| 4.1 实验材料 | 第63-64页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第63页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第63-64页 |
| 4.1.3 实验动物及毒株 | 第64页 |
| 4.2 实验方法 | 第64-69页 |
| 4.2.1 蛙病毒感染细胞模型的建立 | 第64页 |
| 4.2.2 EPC细胞对黄芪和板蓝根注射液的半数细胞毒浓度测定 | 第64-66页 |
| 4.2.3 黄芪和板蓝根注射液对蛙病毒的体外抗病毒效应的评估 | 第66-67页 |
| 4.2.4 黄芪和板蓝根注射液对蛙病毒的体内抗病毒效应的评估 | 第67-69页 |
| 4.3 实验结果 | 第69-77页 |
| 4.3.1 黄芪和板蓝根注射液对蛙病毒的体外抗病毒效应的评估 | 第69-73页 |
| 4.3.2 黄芪和板蓝根注射液对蛙病毒的体内抗病毒效应的评估 | 第73-77页 |
| 4.4 讨论 | 第77-78页 |
| 4.5 本章小结 | 第78-79页 |
| 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-94页 |
| 附录 | 第94-100页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101-103页 |
| 附件 | 第103-104页 |
