| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章绪论 | 第13-20页 |
| 1.1 百合现状 | 第13页 |
| 1.2 百合三种主要病毒简介及其检测方法研究进展 | 第13-17页 |
| 1.2.1 百合三种主要病毒及其危害 | 第13-15页 |
| 1.2.1.1 百合无症病毒及危害 | 第14页 |
| 1.2.1.2 百合斑驳病毒及危害 | 第14-15页 |
| 1.2.1.3 黄瓜花叶病毒及危害 | 第15页 |
| 1.2.2 百合三种主要病毒感染相关诊断技术 | 第15-17页 |
| 1.2.2.1 百合无症病毒感染相关诊断技术 | 第15-16页 |
| 1.2.2.2 百合斑驳病毒感染相关诊断技术 | 第16-17页 |
| 1.2.2.3 黄瓜花叶病毒感染相关诊断技术 | 第17页 |
| 1.3 常用核酸诊断技术简介 | 第17-18页 |
| 1.3.1 环介导等温扩增检测方法 | 第17-18页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 1.5 创新点 | 第19-20页 |
| 第二章百合无症病毒LAMP可视化快速检测试剂盒的研制 | 第20-38页 |
| 2.1 材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 病毒来源 | 第20-21页 |
| 2.1.2 引物设计 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂（盒） | 第21-22页 |
| 2.2 方法 | 第22-30页 |
| 2.2.1 RNA提取 | 第22页 |
| 2.2.2 逆转录 | 第22-23页 |
| 2.2.3 常规PCR体系 | 第23页 |
| 2.2.4 PCR产物的克隆与测序检测 | 第23-25页 |
| 2.2.4.1 胶回收 | 第23-24页 |
| 2.2.4.2 胶回收产物检测 | 第24页 |
| 2.2.4.3 克隆 | 第24页 |
| 2.2.4.4 转化 | 第24-25页 |
| 2.2.4.5 PCR方法鉴定阳性克隆 | 第25页 |
| 2.2.4.6 阳性克隆菌液扩大培养 | 第25页 |
| 2.2.4.7 测序 | 第25页 |
| 2.2.5 标准品阳性质粒模板的制备 | 第25-26页 |
| 2.2.6 LSV LAMP检测方法的建立 | 第26-27页 |
| 2.2.7 LSV LAMP可视化 | 第27页 |
| 2.2.8 LSV LAMP试剂盒的组装 | 第27-28页 |
| 2.2.9 LSV LAMP检测试剂盒的灵敏度试验 | 第28页 |
| 2.2.10 LSV LAMP检测试剂盒的特异性试验 | 第28-29页 |
| 2.2.11 LSV LAMP检测试剂盒的稳定性试验 | 第29页 |
| 2.2.12 LSV RT-LAMP的建立 | 第29-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-37页 |
| 2.3.1 LSV的PCR产物检测 | 第30页 |
| 2.3.2 PCR产物的克隆与测序检测 | 第30-32页 |
| 2.3.2.1 PCR胶回收产物 | 第30-31页 |
| 2.3.2.2 克隆产物的检测 | 第31页 |
| 2.3.2.3 测序结果 | 第31-32页 |
| 2.3.3 反应条件的优化 | 第32-33页 |
| 2.3.4 灵敏度检测 | 第33-34页 |
| 2.3.5 特异性检测 | 第34-35页 |
| 2.3.6 LSV LAMP检测试剂盒的灵敏度试验 | 第35页 |
| 2.3.7 LSV LAMP检测试剂盒的特异性试验 | 第35-36页 |
| 2.3.8 LSV LAMP检测试剂盒的稳定性试验 | 第36页 |
| 2.3.9 LSV LAMP反应可视化结果 | 第36页 |
| 2.3.10 LSV RT-LAMP检测法的建立 | 第36-37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-38页 |
| 第三章百合斑驳病毒LAMP可视化快速检测试剂盒的研制 | 第38-52页 |
| 3.1 材料 | 第38-39页 |
| 3.1.1 病毒来源 | 第38-39页 |
| 3.1.2 引物设计 | 第39页 |
| 3.2 方法 | 第39-43页 |
| 3.2.1 RNA的提取 | 第39页 |
| 3.2.2 逆转录 | 第39页 |
| 3.2.3 常规PCR体系 | 第39-40页 |
| 3.2.4 PCR产物的克隆与测序 | 第40页 |
| 3.2.4.1 胶回收 | 第40页 |
| 3.2.4.2 胶回收后的产物检测 | 第40页 |
| 3.2.4.3 连接反应体系 | 第40页 |
| 3.2.4.4 转化 | 第40页 |
| 3.2.4.5 PCR方法鉴定阳性克隆 | 第40页 |
| 3.2.4.6 阳性克隆菌液扩大培养 | 第40页 |
| 3.2.4.7 测序 | 第40页 |
| 3.2.5 标准品阳性质粒模板的制备 | 第40页 |
| 3.2.6 LMo V LAMP检测方法的建立 | 第40-41页 |
| 3.2.7 LMo V LAMP可视化试验 | 第41页 |
| 3.2.8 LMo V LAMP试剂盒的组装 | 第41-42页 |
| 3.2.9 LMo V LAMP检测试剂盒的灵敏度试验 | 第42页 |
| 3.2.10 LMo V LAMP检测试剂盒的特异性试验 | 第42-43页 |
| 3.2.11 LMo V LAMP检测试剂盒的稳定性试验 | 第43页 |
| 3.2.12 LMo V RT-LAMP的建立 | 第43页 |
| 3.3 结果与分析 | 第43-50页 |
| 3.3.1 LMo V的PCR扩增产物的检测 | 第43-44页 |
| 3.3.2 PCR产物的克隆与测序检测 | 第44-45页 |
| 3.3.2.1 PCR胶回收产物 | 第44页 |
| 3.3.2.2 克隆产物的检测 | 第44-45页 |
| 3.3.2.3 测序结果 | 第45页 |
| 3.3.3 反应条件的优化 | 第45-47页 |
| 3.3.4 灵敏度检测 | 第47-48页 |
| 3.3.5 特异性的检测 | 第48-49页 |
| 3.3.6 LMo V LAMP检测试剂盒的灵敏度试验 | 第49页 |
| 3.3.7 LMo V LAMP检测试剂盒的特异性试验 | 第49页 |
| 3.3.8 LMo V LAMP检测试剂盒的稳定性试验 | 第49-50页 |
| 3.3.9 LMo V LAMP反应可视化结果的判定 | 第50页 |
| 3.3.10 LMo V RT-LAMP的建立 | 第50页 |
| 3.4 讨论 | 第50-52页 |
| 第四章黄瓜花叶病毒LAMP可视化快速检测试剂盒的研制 | 第52-66页 |
| 4.1 材料 | 第52-53页 |
| 4.1.1 病毒来源 | 第52页 |
| 4.1.2 引物设计 | 第52-53页 |
| 4.2 方法 | 第53-57页 |
| 4.2.1 RNA的提取 | 第53页 |
| 4.2.2 逆转录 | 第53页 |
| 4.2.3 常规PCR体系 | 第53页 |
| 4.2.4 PCR产物的克隆与测序检测 | 第53-54页 |
| 4.2.4.1 胶回收 | 第53页 |
| 4.2.4.2 胶回收后的产物检测 | 第53页 |
| 4.2.4.3 连接反应体系 | 第53页 |
| 4.2.4.4 转化 | 第53页 |
| 4.2.4.5 PCR方法鉴定阳性克隆 | 第53页 |
| 4.2.4.6 阳性克隆菌液扩大培养 | 第53-54页 |
| 4.2.4.7 测序 | 第54页 |
| 4.2.5 标准品阳性质粒模板的制备 | 第54页 |
| 4.2.6 CMV LAMP检测法的建立 | 第54页 |
| 4.2.7 CMV LAMP可视化试验 | 第54页 |
| 4.2.8 CMV LAMP试剂盒的组装 | 第54-55页 |
| 4.2.9 CMV LAMP检测试剂盒的灵敏度试验 | 第55-56页 |
| 4.2.10 CMV LAMP检测试剂盒的特异性试验 | 第56页 |
| 4.2.11 CMV LAMP检测试剂盒的稳定性试验 | 第56页 |
| 4.2.12 CMV RT-LAMP的建立 | 第56-57页 |
| 4.3 结果与分析 | 第57-64页 |
| 4.3.1 CMV的PCR扩增产物的检测 | 第57页 |
| 4.3.2 PCR产物的克隆与测序检测 | 第57-59页 |
| 4.3.2.1 PCR胶回收产物 | 第57-58页 |
| 4.3.2.2 克隆产物的检测 | 第58页 |
| 4.3.2.3 测序结果 | 第58-59页 |
| 4.3.3 反应条件的优化 | 第59-60页 |
| 4.3.4 灵敏度的检测 | 第60-61页 |
| 4.3.5 特异性的检测 | 第61-62页 |
| 4.3.6 CMV LAMP检测试剂盒的灵敏度试验 | 第62-63页 |
| 4.3.7 CMV LAMP检测试剂盒的特异性试验 | 第63页 |
| 4.3.8 CMV LAMP检测试剂盒的稳定性试验 | 第63页 |
| 4.3.9 CMV LAMP反应可视化结果的判定 | 第63-64页 |
| 4.3.10 CMV RT-LAMP检测法的建立 | 第64页 |
| 4.4 讨论 | 第64-66页 |
| 第五章全文总结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 附录 | 第73-76页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
