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大豆天隆一号突变体库及CRISPR/Cas9技术平台的初步构建

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 绪论第11-25页
    1.1 植物突变体库研究进展第11-16页
        1.1.1 自发突变第11-12页
        1.1.2 物理辐射诱变第12页
        1.1.3 化学试剂诱变第12-13页
        1.1.4 生物学技术诱变第13-16页
    1.2 大豆突变体库研究进展第16-24页
        1.2.1 大豆理化诱变研究进展第16-18页
        1.2.2 CRISPR/Cas9 技术在大豆基因敲除中的研究进展第18-19页
        1.2.3 大豆转基因技术的进展第19-20页
        1.2.4 植物花形态发育研究进展第20-24页
    1.3 本课题的研究内容和意义第24-25页
第2章 大豆突变体库的构建第25-43页
    2.1 材料与试剂第25-26页
        2.1.1 植物材料第25页
        2.1.2 实验试剂第25页
        2.1.3 实验耗材和仪器第25-26页
        2.1.4 实验溶液的配置第26页
    2.2 实验方法第26-31页
        2.2.1 诱变处理第26-27页
        2.2.2 播种与收获第27页
        2.2.3 表型调查第27页
        2.2.4 SSR分子检测第27-29页
        2.2.5 RT-qPCR基因表达分析第29-31页
    2.3 结果与分析第31-40页
        2.3.1 诱变效应分析第31-32页
        2.3.2 性状分析第32-37页
        2.3.3 突变体的SSR分子标记检测第37-38页
        2.3.4 RT-qPCR分析第38-40页
    2.4 讨论第40-43页
第3章 CRISPR/Cas9 技术平台的构建第43-65页
    3.1 材料与方法第43-48页
        3.1.1 植物材料第43页
        3.1.2 菌株和质粒第43-44页
        3.1.3 实验试剂第44页
        3.1.4 培养基和培养液配方第44-46页
        3.1.5 实验耗材和仪器第46-47页
        3.1.6 PCR扩增所用的引物列表第47-48页
    3.2 实验方法第48-56页
        3.2.1 构建载体第48-49页
        3.2.2 载体的转化第49-52页
        3.2.3 农杆菌介导的大豆子叶节转化第52-55页
        3.2.4 发根农杆菌K599 诱导毛状根第55-56页
    3.3 结果与分析:第56-65页
        3.3.1 靶点的选择第56-58页
        3.3.2 重组质粒转化农杆菌的鉴定第58-59页
        3.3.3 发根农杆菌诱导“天隆1 号”大豆发状根的检测第59-60页
        3.3.4 根癌农杆菌介导的大豆子叶节转化第60-62页
        3.3.5 小结与讨论第62-65页
第4章 结论第65-66页
第5章 创新点和展望第66-67页
    5.1 本研究的创新点第66页
    5.2 展望第66-67页
参考文献第67-77页
附录1第77-81页
附录2第81-85页
附录3第85-87页
攻读学位期间取得的研究成果第87-88页
致谢第88页

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