摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第11-25页 |
1.1 植物突变体库研究进展 | 第11-16页 |
1.1.1 自发突变 | 第11-12页 |
1.1.2 物理辐射诱变 | 第12页 |
1.1.3 化学试剂诱变 | 第12-13页 |
1.1.4 生物学技术诱变 | 第13-16页 |
1.2 大豆突变体库研究进展 | 第16-24页 |
1.2.1 大豆理化诱变研究进展 | 第16-18页 |
1.2.2 CRISPR/Cas9 技术在大豆基因敲除中的研究进展 | 第18-19页 |
1.2.3 大豆转基因技术的进展 | 第19-20页 |
1.2.4 植物花形态发育研究进展 | 第20-24页 |
1.3 本课题的研究内容和意义 | 第24-25页 |
第2章 大豆突变体库的构建 | 第25-43页 |
2.1 材料与试剂 | 第25-26页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 实验试剂 | 第25页 |
2.1.3 实验耗材和仪器 | 第25-26页 |
2.1.4 实验溶液的配置 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-31页 |
2.2.1 诱变处理 | 第26-27页 |
2.2.2 播种与收获 | 第27页 |
2.2.3 表型调查 | 第27页 |
2.2.4 SSR分子检测 | 第27-29页 |
2.2.5 RT-qPCR基因表达分析 | 第29-31页 |
2.3 结果与分析 | 第31-40页 |
2.3.1 诱变效应分析 | 第31-32页 |
2.3.2 性状分析 | 第32-37页 |
2.3.3 突变体的SSR分子标记检测 | 第37-38页 |
2.3.4 RT-qPCR分析 | 第38-40页 |
2.4 讨论 | 第40-43页 |
第3章 CRISPR/Cas9 技术平台的构建 | 第43-65页 |
3.1 材料与方法 | 第43-48页 |
3.1.1 植物材料 | 第43页 |
3.1.2 菌株和质粒 | 第43-44页 |
3.1.3 实验试剂 | 第44页 |
3.1.4 培养基和培养液配方 | 第44-46页 |
3.1.5 实验耗材和仪器 | 第46-47页 |
3.1.6 PCR扩增所用的引物列表 | 第47-48页 |
3.2 实验方法 | 第48-56页 |
3.2.1 构建载体 | 第48-49页 |
3.2.2 载体的转化 | 第49-52页 |
3.2.3 农杆菌介导的大豆子叶节转化 | 第52-55页 |
3.2.4 发根农杆菌K599 诱导毛状根 | 第55-56页 |
3.3 结果与分析: | 第56-65页 |
3.3.1 靶点的选择 | 第56-58页 |
3.3.2 重组质粒转化农杆菌的鉴定 | 第58-59页 |
3.3.3 发根农杆菌诱导“天隆1 号”大豆发状根的检测 | 第59-60页 |
3.3.4 根癌农杆菌介导的大豆子叶节转化 | 第60-62页 |
3.3.5 小结与讨论 | 第62-65页 |
第4章 结论 | 第65-66页 |
第5章 创新点和展望 | 第66-67页 |
5.1 本研究的创新点 | 第66页 |
5.2 展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-77页 |
附录1 | 第77-81页 |
附录2 | 第81-85页 |
附录3 | 第85-87页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第87-88页 |
致谢 | 第88页 |