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外泌体介导miR-141调控前列腺癌骨转移微环境的分子机制

缩略语表第7-10页
中文摘要第10-15页
英文摘要第15-20页
前言第21-23页
文献回顾第23-35页
第一部分 外泌体的分离、鉴定及差异表达分析第35-53页
    1 材料第35-37页
        1.1 细胞系与培养基第35页
        1.2 主要仪器第35-36页
        1.3 主要试剂第36-37页
    2 方法第37-42页
        2.1 细胞培养液exosomes提取第37页
        2.2 细胞培养液exosomes的鉴定第37-39页
        2.3 细胞培养液exosomes中miR-141 的表达第39-40页
        2.4 细胞培养液exosomes NGS差异表达分析第40-42页
    3 结果第42-50页
        3.1 细胞培养液exosomes提取第42-43页
        3.2 细胞培养液exosomes的鉴定第43-45页
        3.3 细胞培养液exosomes中miR-141 的表达第45-46页
        3.4 细胞培养液exosomes NGS差异表达分析第46-50页
    4 讨论第50-53页
第二部分 EXOSOMAL MIR-141-3P体外促进成骨细胞活性第53-64页
    1 材料第53-54页
        1.1 细胞系与培养基第53页
        1.2 主要仪器第53-54页
        1.3 主要试剂第54页
    2 方法第54-57页
        2.1 示踪慢病毒转染第54-55页
        2.2 细胞共培养体系构建第55页
        2.3 miR-141-3p mimics转染第55页
        2.4 成骨细胞活性检测第55-57页
    3 结果第57-62页
        3.1 共培养体系构建第57页
        3.2 慢病毒示踪第57-59页
        3.3 miR-141-3p mimics转染第59-60页
        3.4 成骨细胞活性检测第60-62页
    4 讨论第62-64页
第三部分 EXOSOMAL MIR-141-3P的器官靶向性及体内对成骨细胞的作用第64-73页
    1 材料第64-65页
        1.1 实验材料第64页
        1.2 主要仪器第64-65页
        1.3 主要试剂第65页
    2 方法第65-67页
        2.1 Exosomal miR-141-3p器官靶向性研究第65-66页
        2.2 Exosomal miR-141-3p体内对成骨细胞的作用第66页
        2.3 骨组织中miR-141-3p的表达第66-67页
    3 结果第67-71页
        3.1 生物成像分析第67-68页
        3.2 Exosomes的器官靶向性分析第68-69页
        3.3 Exosomal miR-141-3p体内对成骨细胞的作用第69-70页
        3.4 骨组织中miR-141-3p的表达第70-71页
    4 讨论第71-73页
第四部分 MIR-141-3P靶基因验证及DLC1相关信号通路的变化第73-91页
    1 材料第73-74页
        1.1 主要仪器第73页
        1.2 主要试剂第73-74页
    2 方法第74-80页
        2.1 双荧光素酶载体构建第74-75页
        2.2 突变载体构建第75-76页
        2.3 miR-141-3p靶点验证第76-77页
        2.4 DLC1 shRNA载体构建第77-78页
        2.5 DLC1 shRNA转染第78页
        2.6 Western-blot检测相关信号通路的表达第78-79页
        2.7 RT-PCR检测相关基因的表达第79-80页
    3 结果第80-89页
        3.1 双荧光素酶载体构建第80-82页
        3.2 突变载体构建第82-83页
        3.3 miR-141-3p靶点验证第83-85页
        3.4 DLC1 shRNA载体构建第85-87页
        3.5 DLC1相关信号通路分子的表达第87-89页
    4 讨论第89-91页
第五部分 EXOSOMAL MIR-141-3P促进前列腺癌成骨性骨转移第91-109页
    1 材料第91-92页
        1.1 实验材料第91页
        1.2 主要仪器第91-92页
        1.3 主要试剂第92页
    2 方法第92-97页
        2.1 前列腺癌骨转移动物模型构建第92-93页
        2.2 组织切片染色观察第93-96页
        2.3 骨组织中miR-141-3p的表达第96-97页
        2.4 生存分析第97页
    3 结果第97-107页
        3.1 前列腺癌骨转移动物模型构建第97-100页
        3.2 前列腺癌骨转移的病理性改变第100-104页
        3.3 骨组织中miR-141-3p的表达第104-105页
        3.4 生存分析第105-107页
    4 讨论第107-109页
小结第109-110页
参考文献第110-125页
个人简历和研究成果第125-127页
致谢第127-128页

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