缩略语表 | 第7-10页 |
中文摘要 | 第10-15页 |
英文摘要 | 第15-20页 |
前言 | 第21-23页 |
文献回顾 | 第23-35页 |
第一部分 外泌体的分离、鉴定及差异表达分析 | 第35-53页 |
1 材料 | 第35-37页 |
1.1 细胞系与培养基 | 第35页 |
1.2 主要仪器 | 第35-36页 |
1.3 主要试剂 | 第36-37页 |
2 方法 | 第37-42页 |
2.1 细胞培养液exosomes提取 | 第37页 |
2.2 细胞培养液exosomes的鉴定 | 第37-39页 |
2.3 细胞培养液exosomes中miR-141 的表达 | 第39-40页 |
2.4 细胞培养液exosomes NGS差异表达分析 | 第40-42页 |
3 结果 | 第42-50页 |
3.1 细胞培养液exosomes提取 | 第42-43页 |
3.2 细胞培养液exosomes的鉴定 | 第43-45页 |
3.3 细胞培养液exosomes中miR-141 的表达 | 第45-46页 |
3.4 细胞培养液exosomes NGS差异表达分析 | 第46-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
第二部分 EXOSOMAL MIR-141-3P体外促进成骨细胞活性 | 第53-64页 |
1 材料 | 第53-54页 |
1.1 细胞系与培养基 | 第53页 |
1.2 主要仪器 | 第53-54页 |
1.3 主要试剂 | 第54页 |
2 方法 | 第54-57页 |
2.1 示踪慢病毒转染 | 第54-55页 |
2.2 细胞共培养体系构建 | 第55页 |
2.3 miR-141-3p mimics转染 | 第55页 |
2.4 成骨细胞活性检测 | 第55-57页 |
3 结果 | 第57-62页 |
3.1 共培养体系构建 | 第57页 |
3.2 慢病毒示踪 | 第57-59页 |
3.3 miR-141-3p mimics转染 | 第59-60页 |
3.4 成骨细胞活性检测 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-64页 |
第三部分 EXOSOMAL MIR-141-3P的器官靶向性及体内对成骨细胞的作用 | 第64-73页 |
1 材料 | 第64-65页 |
1.1 实验材料 | 第64页 |
1.2 主要仪器 | 第64-65页 |
1.3 主要试剂 | 第65页 |
2 方法 | 第65-67页 |
2.1 Exosomal miR-141-3p器官靶向性研究 | 第65-66页 |
2.2 Exosomal miR-141-3p体内对成骨细胞的作用 | 第66页 |
2.3 骨组织中miR-141-3p的表达 | 第66-67页 |
3 结果 | 第67-71页 |
3.1 生物成像分析 | 第67-68页 |
3.2 Exosomes的器官靶向性分析 | 第68-69页 |
3.3 Exosomal miR-141-3p体内对成骨细胞的作用 | 第69-70页 |
3.4 骨组织中miR-141-3p的表达 | 第70-71页 |
4 讨论 | 第71-73页 |
第四部分 MIR-141-3P靶基因验证及DLC1相关信号通路的变化 | 第73-91页 |
1 材料 | 第73-74页 |
1.1 主要仪器 | 第73页 |
1.2 主要试剂 | 第73-74页 |
2 方法 | 第74-80页 |
2.1 双荧光素酶载体构建 | 第74-75页 |
2.2 突变载体构建 | 第75-76页 |
2.3 miR-141-3p靶点验证 | 第76-77页 |
2.4 DLC1 shRNA载体构建 | 第77-78页 |
2.5 DLC1 shRNA转染 | 第78页 |
2.6 Western-blot检测相关信号通路的表达 | 第78-79页 |
2.7 RT-PCR检测相关基因的表达 | 第79-80页 |
3 结果 | 第80-89页 |
3.1 双荧光素酶载体构建 | 第80-82页 |
3.2 突变载体构建 | 第82-83页 |
3.3 miR-141-3p靶点验证 | 第83-85页 |
3.4 DLC1 shRNA载体构建 | 第85-87页 |
3.5 DLC1相关信号通路分子的表达 | 第87-89页 |
4 讨论 | 第89-91页 |
第五部分 EXOSOMAL MIR-141-3P促进前列腺癌成骨性骨转移 | 第91-109页 |
1 材料 | 第91-92页 |
1.1 实验材料 | 第91页 |
1.2 主要仪器 | 第91-92页 |
1.3 主要试剂 | 第92页 |
2 方法 | 第92-97页 |
2.1 前列腺癌骨转移动物模型构建 | 第92-93页 |
2.2 组织切片染色观察 | 第93-96页 |
2.3 骨组织中miR-141-3p的表达 | 第96-97页 |
2.4 生存分析 | 第97页 |
3 结果 | 第97-107页 |
3.1 前列腺癌骨转移动物模型构建 | 第97-100页 |
3.2 前列腺癌骨转移的病理性改变 | 第100-104页 |
3.3 骨组织中miR-141-3p的表达 | 第104-105页 |
3.4 生存分析 | 第105-107页 |
4 讨论 | 第107-109页 |
小结 | 第109-110页 |
参考文献 | 第110-125页 |
个人简历和研究成果 | 第125-127页 |
致谢 | 第127-128页 |