| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第16-21页 |
| 第一章 绪论 糖尿病性心肌病发病机制与药物研发现状 | 第21-43页 |
| 1.1 概述 | 第21-22页 |
| 1.2 糖尿病性心肌病的特征与诊断 | 第22-25页 |
| 1.2.1 结构变化 | 第22-23页 |
| 1.2.2 功能变化 | 第23-24页 |
| 1.2.3 诊断方法 | 第24-25页 |
| 1.3 糖尿病性心肌病的发病机制 | 第25-35页 |
| 1.3.1 病理因素 | 第25-28页 |
| 1.3.2 分子信号通路 | 第28-32页 |
| 1.3.3 代谢紊乱及调控信号通路 | 第32-35页 |
| 1.4 针对糖尿病性心肌病的药物开发 | 第35-39页 |
| 1.4.1 流行病学与治疗难题 | 第35页 |
| 1.4.2 现有治疗药物 | 第35-37页 |
| 1.4.3 新型药物研发 | 第37-39页 |
| 1.5 本课题的研究方案 | 第39-42页 |
| 1.6 总结与展望 | 第42-43页 |
| 第二章 大鼠一型糖尿病性心肌病模型的建立与验证 | 第43-60页 |
| 2.1 前言 | 第43-46页 |
| 2.2 材料与方法 | 第46-53页 |
| 2.2.1 动物 | 第46页 |
| 2.2.2 试剂 | 第46-47页 |
| 2.2.3 仪器设备 | 第47-48页 |
| 2.2.4 耗材 | 第48页 |
| 2.2.5 一型糖尿病模型构建 | 第48页 |
| 2.2.6 血糖浓度测定 | 第48-49页 |
| 2.2.7 动物分组 | 第49页 |
| 2.2.8 活体动物血液动力学和心功能检测 | 第49页 |
| 2.2.9 内脏分离与血浆制备 | 第49-50页 |
| 2.2.10 组织学分析 | 第50-51页 |
| 2.2.11 信使RNA(mRNA)表达水平检测 | 第51-53页 |
| 2.2.12 数据统计 | 第53页 |
| 2.3 结果 | 第53-57页 |
| 2.3.1 糖尿病心肌病的肥大和纤维化改变 | 第53-54页 |
| 2.3.2 糖尿病心肌病变的心功能下降 | 第54-55页 |
| 2.3.3 糖尿病心肌病变的肥大和纤维化标志物的变化 | 第55-57页 |
| 2.4 讨论 | 第57-59页 |
| 2.4.1 糖尿病性心肌病的动物模型 | 第57-58页 |
| 2.4.2 大鼠一型糖尿病引起的心肌病模型 | 第58-59页 |
| 2.5 本章总结 | 第59-60页 |
| 第三章 异甜菊醇钠对糖尿病性心肌病的保护作用 | 第60-108页 |
| 3.1 前言 | 第60页 |
| 3.2 材料与方法 | 第60-74页 |
| 3.2.1 试剂、药液与耗材 | 第60-61页 |
| 3.2.2 本研究用到的试剂盒清单 | 第61-62页 |
| 3.2.3 PCR引物 | 第62-63页 |
| 3.2.4 SDS-PAGE/Western blot检测试剂 | 第63-64页 |
| 3.2.5 仪器 | 第64页 |
| 3.2.6 动物造模与检测等 | 第64页 |
| 3.2.7 分组与给药 | 第64页 |
| 3.2.8 体重与生理常数测定 | 第64-65页 |
| 3.2.9 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测 | 第65-67页 |
| 3.2.10 组织总抗氧化(T-AOC)能力 | 第67页 |
| 3.2.11 组织超氧化物歧化酶(SOD)活性 | 第67页 |
| 3.2.12 组织还原型谷胱甘肽(GSH)水平检测 | 第67-68页 |
| 3.2.13 组织丙二醛(MDA)浓度测定 | 第68-69页 |
| 3.2.14 组织三磷酸腺苷(ATP)含量检测 | 第69页 |
| 3.2.15 血浆甘油三酯(TG)分析 | 第69页 |
| 3.2.16 血浆总胆固醇(T-CHO)检测 | 第69-70页 |
| 3.2.17 血浆谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)测定 | 第70页 |
| 3.2.18 血清肌酐(Cr)测定 | 第70页 |
| 3.2.19 血尿氮(BUN)检测 | 第70页 |
| 3.2.20 实时荧光定量PCR检测基因表达 | 第70-71页 |
| 3.2.21 蛋白裂解与浓度测定 | 第71页 |
| 3.2.22 蛋白电泳与杂交(SDS-PAGE/Western blotting) | 第71-73页 |
| 3.2.23 免疫组化染色(IHC) | 第73-74页 |
| 3.2.24 数据分析与统计 | 第74页 |
| 3.3 结果 | 第74-99页 |
| 3.3.1 糖尿病引起大鼠体重下降及STVNa对体重的影响 | 第74-75页 |
| 3.3.2 血糖浓度 | 第75页 |
| 3.3.3 血浆胰岛素浓度及胰岛素抵抗指数 | 第75-76页 |
| 3.3.4 STVNa提高心肌组织内ATP水平 | 第76-77页 |
| 3.3.5 糖尿病对心功能的影响及药物的保护作用 | 第77-79页 |
| 3.3.6 STVNa可有效抑制糖尿病引起的心肌肥大 | 第79-81页 |
| 3.3.7 STVNa可有效缓解糖尿病引起的心肌纤维化 | 第81-83页 |
| 3.3.8 STVNa可降低糖尿病引起的氧化应激 | 第83-87页 |
| 3.3.9 STVNa可显著抑制糖尿病引起的炎症反应 | 第87-91页 |
| 3.3.10 STVNa对血脂代谢无显著影响 | 第91-92页 |
| 3.3.11 STVNa可在一定程度上改善糖尿病引起的肾功能与肝功能下降 | 第92-93页 |
| 3.3.12 STVNa不影响糖尿病导致的晚期糖基化终末产物(AGE) | 第93-94页 |
| 3.3.13 药物作用的分子信号通路检测 | 第94-96页 |
| 3.3.14 异甜菊醇钠对正常大鼠的影响 | 第96-99页 |
| 3.4 讨论 | 第99-106页 |
| 3.4.1 糖尿病心肌病变引起氧化应激和炎症反应 | 第99-101页 |
| 3.4.2 STVNa对糖尿病大鼠机体代谢及内脏损伤的保护作用 | 第101-102页 |
| 3.4.3 STVNa分子作用机制的初步分析 | 第102-103页 |
| 3.4.4 异甜菊醇与血糖、胰岛素及糖尿病 | 第103-104页 |
| 3.4.5 异甜菊醇钠的安全性 | 第104-105页 |
| 3.4.6 糖尿病性心肌病药物开发 | 第105-106页 |
| 3.5 本章总结 | 第106-108页 |
| 第四章 异甜菊醇钠对高葡萄糖诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用 | 第108-143页 |
| 4.1 前言 | 第108-109页 |
| 4.2 材料与方法 | 第109-118页 |
| 4.2.1 试剂 | 第109-110页 |
| 4.2.2 耗材 | 第110-111页 |
| 4.2.3 仪器设备 | 第111页 |
| 4.2.4 细胞培养、传代与计数 | 第111页 |
| 4.2.5 高糖培养细胞的分组与药物处理 | 第111-112页 |
| 4.2.6 细胞活力测定 | 第112-113页 |
| 4.2.7 细胞内ROS水平检测 | 第113页 |
| 4.2.8 细胞裂解液的总抗氧化能力测定 | 第113页 |
| 4.2.9 细胞培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)活性测定 | 第113-114页 |
| 4.2.10 总RNA提取、逆转录与实时定量荧光PCR检测 | 第114页 |
| 4.2.11 蛋白提取纯化与浓度测定 | 第114-115页 |
| 4.2.12 蛋白电泳与Western杂交分析 | 第115页 |
| 4.2.13 细胞能量代谢仪测定心肌细胞糖酵解 | 第115-116页 |
| 4.2.14 糖酵解及氧化磷酸化抑制与药物作用研究 | 第116-117页 |
| 4.2.15 核酸干扰(RNAi)检测 | 第117-118页 |
| 4.2.16 数据统计 | 第118页 |
| 4.3 结果 | 第118-135页 |
| 4.3.1 不同浓度葡萄糖对H9c2细胞活力的影响 | 第118-119页 |
| 4.3.2 STVNa对高糖抑制的H9c2细胞活力的作用 | 第119页 |
| 4.3.3 STVNa显著抑制高糖引起的细胞膜损伤 | 第119-120页 |
| 4.3.4 STVNa对过氧化氢抑制的H9c2细胞活力的作用 | 第120-121页 |
| 4.3.5 STVNa及TMZ对正常H9c2细胞活力的影响 | 第121-122页 |
| 4.3.6 STVNa有效抑制高葡萄糖引起的H9c2细胞肥大和纤维化 | 第122-124页 |
| 4.3.7 STVNa抑制高糖引起的H9c2细胞氧化应激 | 第124-127页 |
| 4.3.8 STVNa有效抑制高葡萄糖诱导的H9c2细胞炎症基因的表达 | 第127页 |
| 4.3.9 STVNa对RAGE基因的表达无显著影响 | 第127-128页 |
| 4.3.10 STVNa抑制、TMZ激活糖尿病性心肌病激活的ERK信号通路 | 第128-129页 |
| 4.3.11 STVNa及TMZ抑制糖尿病性心肌病激活的NF-κB信号通路 | 第129页 |
| 4.3.12 TMZ显著激活AMPK信号通路 | 第129-130页 |
| 4.3.13 STVNa和TMZ都通过激活PI3K/Akt信号通路保护心肌细胞 | 第130-131页 |
| 4.3.14 STVNa和TMZ对ROS相关的TRPC3/Nox-2的影响 | 第131-132页 |
| 4.3.15 STVNa及TMZ对糖酵解的影响 | 第132-134页 |
| 4.3.16 STVNa及TMZ对氧化磷酸化的影响 | 第134-135页 |
| 4.4 讨论 | 第135-141页 |
| 4.4.1 高糖培养心肌细胞引起的信号通路改变 | 第135-136页 |
| 4.4.2 STVNa及TMZ对高糖诱导的心肌细胞信号转导紊乱的作用 | 第136-138页 |
| 4.4.3 不同条件诱导的心肌细胞损伤及药物的保护作用 | 第138-139页 |
| 4.4.4 STVNa对葡萄糖吸收与代谢作用的分析 | 第139-141页 |
| 4.4.5 体外细胞模型作为DCM研究的局限性 | 第141页 |
| 4.5 本章总结 | 第141-143页 |
| 结论与展望 | 第143-148页 |
| 结论 | 第143-144页 |
| 创新之处 | 第144-145页 |
| 展望 | 第145-148页 |
| 参考文献 | 第148-163页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第163-164页 |
| 致谢 | 第164-166页 |
| 附件 | 第166页 |
