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RhoGTP酶在肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导内皮细胞损伤中的作用及机制研究

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第一章 绪论第11-13页
第二章 材料与方法第13-31页
    2.1 研究资料及仪器设备第13-16页
        2.1.1 研究对象第13页
        2.1.2 主要仪器与试剂第13-15页
        2.1.3 主要溶液配制第15-16页
    2.2 实验流程与方法第16-31页
        2.2.1 细胞培养与鉴定第16-17页
        2.2.2 细胞冻存第17页
        2.2.3 细胞复苏第17页
        2.2.4 实验分组第17-18页
        2.2.5 MTT法第18页
        2.2.6 免疫荧光第18-19页
        2.2.7 siRNA转染第19-21页
        2.2.8 RT-PCR分析第21-24页
        2.2.9 蛋白样品提取第24页
        2.2.10 蛋白质定量(BCA法)及配平第24-25页
        2.2.11 Western Blot第25-26页
        2.2.12 Pulldown assay第26-28页
        2.2.13 Annexin V-FITC/PI凋亡检测第28页
        2.2.14 流式细胞仪BD Accuri C6日常操作流程第28-30页
        2.2.15 统计学处理分析第30-31页
第三章 结果第31-61页
    3.1 内皮细胞鉴定第31页
    3.2 RhoA、Rac1、Cdc42沉默的筛选及鉴定第31-33页
    3.3 RhoA沉默显著降低TNF-α诱导的内皮细胞毒性第33-36页
        3.3.1 RhoA沉默显著提高TNF-α诱导的内皮细胞存活率第33-34页
        3.3.2 RhoA沉默显著降低TNF-α诱导的内皮细胞凋亡第34-36页
    3.4 TNF-α诱导Rho A活化,而对Rac1、Cdc42的活化无明显作用第36-38页
    3.5 RhoA沉默抑制TNF-α诱导ROCK1表达及ROCK活化第38-40页
        3.5.1 RhoA沉默抑制TNF-α诱导ROCK1表达第38-39页
        3.5.2 RhoA沉默抑制TNF-α诱导ROCK活化第39-40页
    3.6 ROCK抑制可减少TNF-α诱导的内皮细胞毒性第40-43页
    3.7 RhoA/ROCK信号通路介导TNF-α诱导的Vimentin裂解和磷酸化第43-46页
    3.8 ROCK抑制可减少TNF-α诱导的caspase3和caspase8的活化第46-48页
    3.9 RhoA/ROCK信号通路介导TNF-α诱导的Vimentin和phospho-Vimentin的重排第48-50页
    3.10 TNF-α可诱导Raf-1的磷酸化第50-51页
    3.11 Raf-1抑制不影响ROCK1表达和ROCK活化第51-53页
    3.12 Raf-1/CK2通路可介导TNF-α诱导的Vimentin和phospho-Vimentin表达,但不影响TNF-α诱导的Vimentin裂解第53-55页
    3.13 Raf-1/CK2通路可介导TNF-α诱导的Vimentin和phospho-Vimentin的重排第55-57页
    3.14 Raf-1/CK2通路可介导TNF-α诱导的内皮细胞毒性第57-61页
第四章 讨论第61-63页
第五章 结论第63-64页
参考文献第64-68页
英文缩写词表第68-70页
综述第70-80页
    综述参考文献第76-80页
在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目第80-81页
    A:在国内外刊物上发表的论文第80页
    B:所主持的项目第80页
    C:所参与的项目第80-81页
致谢第81页

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