摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第11-13页 |
第二章 材料与方法 | 第13-31页 |
2.1 研究资料及仪器设备 | 第13-16页 |
2.1.1 研究对象 | 第13页 |
2.1.2 主要仪器与试剂 | 第13-15页 |
2.1.3 主要溶液配制 | 第15-16页 |
2.2 实验流程与方法 | 第16-31页 |
2.2.1 细胞培养与鉴定 | 第16-17页 |
2.2.2 细胞冻存 | 第17页 |
2.2.3 细胞复苏 | 第17页 |
2.2.4 实验分组 | 第17-18页 |
2.2.5 MTT法 | 第18页 |
2.2.6 免疫荧光 | 第18-19页 |
2.2.7 siRNA转染 | 第19-21页 |
2.2.8 RT-PCR分析 | 第21-24页 |
2.2.9 蛋白样品提取 | 第24页 |
2.2.10 蛋白质定量(BCA法)及配平 | 第24-25页 |
2.2.11 Western Blot | 第25-26页 |
2.2.12 Pulldown assay | 第26-28页 |
2.2.13 Annexin V-FITC/PI凋亡检测 | 第28页 |
2.2.14 流式细胞仪BD Accuri C6日常操作流程 | 第28-30页 |
2.2.15 统计学处理分析 | 第30-31页 |
第三章 结果 | 第31-61页 |
3.1 内皮细胞鉴定 | 第31页 |
3.2 RhoA、Rac1、Cdc42沉默的筛选及鉴定 | 第31-33页 |
3.3 RhoA沉默显著降低TNF-α诱导的内皮细胞毒性 | 第33-36页 |
3.3.1 RhoA沉默显著提高TNF-α诱导的内皮细胞存活率 | 第33-34页 |
3.3.2 RhoA沉默显著降低TNF-α诱导的内皮细胞凋亡 | 第34-36页 |
3.4 TNF-α诱导Rho A活化,而对Rac1、Cdc42的活化无明显作用 | 第36-38页 |
3.5 RhoA沉默抑制TNF-α诱导ROCK1表达及ROCK活化 | 第38-40页 |
3.5.1 RhoA沉默抑制TNF-α诱导ROCK1表达 | 第38-39页 |
3.5.2 RhoA沉默抑制TNF-α诱导ROCK活化 | 第39-40页 |
3.6 ROCK抑制可减少TNF-α诱导的内皮细胞毒性 | 第40-43页 |
3.7 RhoA/ROCK信号通路介导TNF-α诱导的Vimentin裂解和磷酸化 | 第43-46页 |
3.8 ROCK抑制可减少TNF-α诱导的caspase3和caspase8的活化 | 第46-48页 |
3.9 RhoA/ROCK信号通路介导TNF-α诱导的Vimentin和phospho-Vimentin的重排 | 第48-50页 |
3.10 TNF-α可诱导Raf-1的磷酸化 | 第50-51页 |
3.11 Raf-1抑制不影响ROCK1表达和ROCK活化 | 第51-53页 |
3.12 Raf-1/CK2通路可介导TNF-α诱导的Vimentin和phospho-Vimentin表达,但不影响TNF-α诱导的Vimentin裂解 | 第53-55页 |
3.13 Raf-1/CK2通路可介导TNF-α诱导的Vimentin和phospho-Vimentin的重排 | 第55-57页 |
3.14 Raf-1/CK2通路可介导TNF-α诱导的内皮细胞毒性 | 第57-61页 |
第四章 讨论 | 第61-63页 |
第五章 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-68页 |
英文缩写词表 | 第68-70页 |
综述 | 第70-80页 |
综述参考文献 | 第76-80页 |
在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目 | 第80-81页 |
A:在国内外刊物上发表的论文 | 第80页 |
B:所主持的项目 | 第80页 |
C:所参与的项目 | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |