| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-35页 |
| 1.1 肉碱的生理功能及研究进展 | 第17-23页 |
| 1.1.1 肉碱的发现 | 第17页 |
| 1.1.2 肉碱的合成和代谢 | 第17-19页 |
| 1.1.3 ALC的生物合成 | 第19页 |
| 1.1.4 内源性ALC | 第19-20页 |
| 1.1.5 ALC的生理功能 | 第20-22页 |
| 1.1.6 肉碱在调控动物繁殖中的作用 | 第22-23页 |
| 1.2 肉碱对卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响 | 第23-28页 |
| 1.2.1 卵母细胞成熟质量和发育潜能的获得 | 第23-25页 |
| 1.2.2 卵母细胞体外成熟质量与能量的关系 | 第25-26页 |
| 1.2.3 脂肪酸支持COCs发育 | 第26-27页 |
| 1.2.4 脂类在卵母细胞及胚胎中的储存及利用 | 第27页 |
| 1.2.5 肉碱调节脂类代谢与卵母细胞成熟及胚胎发育的关系 | 第27-28页 |
| 1.3 肉碱与脂类对卵母细胞冷冻的研究 | 第28-29页 |
| 1.3.1 卵母细胞冷冻保存技术 | 第28页 |
| 1.3.2 冷冻对卵母细胞造成的损伤 | 第28-29页 |
| 1.3.3 脂类影响卵母细胞冷冻 | 第29页 |
| 1.3.4 肉碱对卵母细胞冷冻效果的影响 | 第29页 |
| 1.4 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱测定卵母细胞及胚胎中脂类成分的研究 | 第29-31页 |
| 1.4.1 细胞内脂类含量的测定方法 | 第30页 |
| 1.4.2 MALDI-TOF MS技术检测脂类成分及应用 | 第30-31页 |
| 1.5 代谢组学方法评价卵母细胞及胚胎质量的研究 | 第31-33页 |
| 1.5.1 代谢组学及研究内容 | 第31-32页 |
| 1.5.2 代谢组学检测的优势 | 第32页 |
| 1.5.3 代谢组学在辅助生殖领域的应用 | 第32-33页 |
| 1.5.4 代谢组学检测卵母细胞及胚胎的策略 | 第33页 |
| 1.6 水牛卵母细胞体外成熟及影响因素 | 第33-34页 |
| 1.6.1 水牛卵母细胞体外成熟与卵母细胞得率 | 第33页 |
| 1.6.2 水牛卵母细胞体外成熟与成熟液成分 | 第33-34页 |
| 1.6.3 水牛卵母细胞体外成熟与类固醇激素 | 第34页 |
| 1.6.4 水牛卵母细胞体外成熟与能量物质 | 第34页 |
| 1.7 选题依据及研究内容 | 第34-35页 |
| 第二章 ALC影响水牛卵母细胞体外成熟及后续胚胎发育的研究 | 第35-52页 |
| 前言 | 第35-36页 |
| 2.1 试验材料 | 第36-39页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第36-37页 |
| 2.1.2 试验用卵巢 | 第37页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第37-38页 |
| 2.1.4 主要溶液的配制 | 第38页 |
| 2.1.5 引物合成 | 第38-39页 |
| 2.2 试验方法 | 第39-43页 |
| 2.2.1 卵丘卵母细胞复合体的收集 | 第39页 |
| 2.2.2 ALC添加浓度的选择 | 第39-40页 |
| 2.2.3 ALC添加浓度的确定 | 第40页 |
| 2.2.4 ALC对卵母细胞和卵丘细胞的作用效果 | 第40-42页 |
| 2.2.5 试验设计 | 第42-43页 |
| 2.2.6 数据统计和分析 | 第43页 |
| 2.3 试验结果 | 第43-49页 |
| 2.3.1 不同浓度ALC对水牛卵母细胞体外成熟及后续胚胎发育效果的影响 | 第43-44页 |
| 2.3.2 ALC对卵丘细胞增殖的影响 | 第44-45页 |
| 2.3.3 ALC对成熟卵母细胞和卵丘细胞中ROS和ATP含量的影响 | 第45-46页 |
| 2.3.4 ALC对成熟卵母细胞内线粒体分布模式及成熟卵母细胞和卵丘细胞中mtDNA含量的影响 | 第46-47页 |
| 2.3.5 ALC对雌二醇和孕酮分泌的影响 | 第47-48页 |
| 2.3.6 ALC对成熟卵母细胞和卵丘细胞中StAR,P450scc,GDF9和BMP15表达水平的影响 | 第48-49页 |
| 2.4 分析和讨论 | 第49-51页 |
| 2.5 小结 | 第51-52页 |
| 第三章 ALC影响水牛卵丘卵母细胞复合体的代谢液代谢指纹图谱研究 | 第52-66页 |
| 前言 | 第52-53页 |
| 3.1 试验材料 | 第53-55页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第53页 |
| 3.1.2 试验用卵巢 | 第53页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第53-54页 |
| 3.1.4 主要溶液的配制 | 第54-55页 |
| 3.2 试验方法 | 第55-57页 |
| 3.2.1 卵丘卵母细胞复合体的收集 | 第55页 |
| 3.2.2 卵丘卵母细胞复合体的体外成熟 | 第55-56页 |
| 3.2.3 样品收集 | 第56页 |
| 3.2.4 代谢液分析 | 第56-57页 |
| 3.3 试验结果 | 第57-63页 |
| 3.3.1 负离子模式下,UPLC-MS分析不同组别代谢液的代谢指纹图谱 | 第57-58页 |
| 3.3.2 多变量数据分析 | 第58-60页 |
| 3.3.3 差异代谢物的筛选及鉴定 | 第60-62页 |
| 3.3.4 不同试验组中差异代谢物的含量 | 第62-63页 |
| 3.4 分析和讨论 | 第63-65页 |
| 3.5 小结 | 第65-66页 |
| 第四章 ALC影响水牛体外成熟卵母细胞和卵丘细胞中脂类指纹图谱的研究 | 第66-79页 |
| 前言 | 第66-67页 |
| 4.1 试验材料 | 第67-69页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第67-68页 |
| 4.1.2 试验用卵巢 | 第68页 |
| 4.1.3主要仪器设备 | 第68页 |
| 4.1.4 主要溶液的配制 | 第68-69页 |
| 4.2 试验方法 | 第69-71页 |
| 4.2.1 卵丘卵母细胞复合体的收集 | 第69页 |
| 4.2.2 卵丘卵母细胞复合体体外成熟 | 第69页 |
| 4.2.3 脂类指纹图谱的测定 | 第69页 |
| 4.2.4 脂类指纹图谱数据分析及脂类鉴定 | 第69-70页 |
| 4.2.5 卵母细胞内总脂含量的测定 | 第70页 |
| 4.2.6 试验设计 | 第70页 |
| 4.2.7 数据统计 | 第70-71页 |
| 4.3 试验结果 | 第71-77页 |
| 4.3.1 ALC对成熟卵丘细胞中脂类指纹图谱表达的影响 | 第71-72页 |
| 4.3.2 ALC对成熟卵母细胞中脂类指纹图谱表达的影响 | 第72-75页 |
| 4.3.3 ALC对成熟卵母细胞中总脂含量的影响 | 第75-77页 |
| 4.4 分析和讨论 | 第77-78页 |
| 4.5 小结 | 第78-79页 |
| 第五章 ALC影响水牛体外成熟卵母细胞冷冻效果及脂类指纹图谱的研究 | 第79-95页 |
| 前言 | 第79-80页 |
| 5.1 试验材料与方法 | 第80-82页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第80-81页 |
| 5.1.2 试验用卵巢 | 第81页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第81页 |
| 5.1.4 主要溶液的配制 | 第81-82页 |
| 5.2 试验方法 | 第82-85页 |
| 5.2.1 卵丘卵母细胞复合体的收集 | 第82页 |
| 5.2.2 不同试验组的设置 | 第82-83页 |
| 5.2.3 卵母细胞的冷冻 | 第83页 |
| 5.2.4 卵母细胞的解冻 | 第83页 |
| 5.2.5 卵母细胞的孤雌激活 | 第83页 |
| 5.2.6 线粒体mtDNA的测定 | 第83页 |
| 5.2.7 线粒体膜电位测定 | 第83-84页 |
| 5.2.8 脂类指纹图谱的测定 | 第84页 |
| 5.2.9 脂类指纹图谱数据分析及脂类鉴定 | 第84页 |
| 5.2.10 试验设计 | 第84-85页 |
| 5.2.11 数据分析 | 第85页 |
| 5.3 试验结果 | 第85-93页 |
| 5.3.1 冷冻和ALC对卵母细胞孤雌激活胚胎发育能力的影响 | 第85-86页 |
| 5.3.2 冷冻和ALC对卵母细胞线粒体mtDNA含量的影响 | 第86-87页 |
| 5.3.3 冷冻和ALC对卵母细胞线粒体膜电位的影响 | 第87-88页 |
| 5.3.4 冷冻和ALC对卵母细胞脂类指纹图谱的影响 | 第88-93页 |
| 5.4 分析和讨论 | 第93-94页 |
| 5.5 小结 | 第94-95页 |
| 全文结论 | 第95页 |
| 论文创新点 | 第95页 |
| 本研究尚需继续深入研究内容 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-121页 |
| 附录 | 第121-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第124页 |
