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人miR-302a调控IRF5基因表达在流感病毒感染机制中的研究

中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1. 引言第12-33页
    1.1 流感病毒简述第12-22页
        1.1.1 流感与流感病毒第12-13页
        1.1.2 A型流感病毒的基因组结构和生物学特性第13-18页
        1.1.3 A型流感病毒的复制周期第18-22页
    1.2 流感病毒与机体免疫第22-27页
        1.2.1 识别与逃逸第22-25页
        1.2.2 细胞因子的诱导与产生第25-27页
    1.3 MicroRNA简介第27-33页
        1.3.1 MicroRNA的定义第27页
        1.3.2 MicroRNA的产生第27-29页
        1.3.3 MicroRNA的机制第29-30页
        1.3.4 MicroRNA与病毒诱导的免疫反应第30-33页
2 材料与方法第33-47页
    2.1 实验材料第33-38页
        2.1.1 流感病毒株第33页
        2.1.2 细胞系与菌株第33页
        2.1.3 质粒第33-34页
        2.1.4 小分子干扰RNA第34页
        2.1.5 实验试剂第34-36页
        2.1.6 仪器设备第36-37页
        2.1.7 引物第37-38页
    2.2 实验方法第38-47页
        2.2.1 细胞系的培养第38-39页
        2.2.2 质粒的构建第39-41页
        2.2.3 转染第41-42页
        2.2.4 Luciferase活性检测第42页
        2.2.5 基因的mRNA表达的分析第42-44页
        2.2.6 Western Blot第44-46页
        2.2.7 统计学分析第46-47页
3 实验结果第47-70页
    3.1 miR-302a对流感病毒H3N2侵染的影响第47-51页
        3.1.1 基因芯片筛选第47-48页
        3.1.2 验证miR-302a的表达第48页
        3.1.3 miR-302a参与流感病毒H3N2的复制第48-49页
        3.1.4 miR-302a mimics促进流感病毒H3N2的复制和转录第49-50页
        3.1.5 miR-302a inhibitors抑制流感病毒H3N2的复制和转录第50-51页
    3.2 IRF5为miR-302a的靶标基因第51-58页
        3.2.1 生物信息学预测第51-52页
        3.2.2 双荧光色素酶检测第52-55页
        3.2.3 IRF5的mRNA表达检测第55-56页
        3.2.4 IRF5的蛋白质水平检测第56-57页
        3.2.5 流感H3N2侵染下miR-302a与IRF5的表达第57-58页
    3.3 IRF5基因调控流感病毒H3N2的复制第58-61页
        3.3.1 过表达IRF5抑制流感病毒H3N2的复制和转录第58-60页
        3.3.2 下调IRF5表达促进流感病毒H3N2的复制和转录第60-61页
    3.4 miR-302a/IRF5对流感病毒介导的宿主免疫反应的影响第61-65页
        3.4.1 IRF5参与流感病毒介导的宿主免疫反应第61-63页
        3.4.2 miR-302a通过调控IRF5参与流感病毒介导的宿主免疫反应第63-65页
    3.5 miR-302a/IRF5对TLR7细胞通路的调控第65-70页
        3.5.1 IRF5参与TLR7而非TLR3细胞通路第65-66页
        3.5.2 miR-302a调控TLR7细胞通路第66-70页
4 讨论第70-78页
5 小结第78-79页
参考文献第79-98页
致谢第98页

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