中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1. 引言 | 第12-33页 |
1.1 流感病毒简述 | 第12-22页 |
1.1.1 流感与流感病毒 | 第12-13页 |
1.1.2 A型流感病毒的基因组结构和生物学特性 | 第13-18页 |
1.1.3 A型流感病毒的复制周期 | 第18-22页 |
1.2 流感病毒与机体免疫 | 第22-27页 |
1.2.1 识别与逃逸 | 第22-25页 |
1.2.2 细胞因子的诱导与产生 | 第25-27页 |
1.3 MicroRNA简介 | 第27-33页 |
1.3.1 MicroRNA的定义 | 第27页 |
1.3.2 MicroRNA的产生 | 第27-29页 |
1.3.3 MicroRNA的机制 | 第29-30页 |
1.3.4 MicroRNA与病毒诱导的免疫反应 | 第30-33页 |
2 材料与方法 | 第33-47页 |
2.1 实验材料 | 第33-38页 |
2.1.1 流感病毒株 | 第33页 |
2.1.2 细胞系与菌株 | 第33页 |
2.1.3 质粒 | 第33-34页 |
2.1.4 小分子干扰RNA | 第34页 |
2.1.5 实验试剂 | 第34-36页 |
2.1.6 仪器设备 | 第36-37页 |
2.1.7 引物 | 第37-38页 |
2.2 实验方法 | 第38-47页 |
2.2.1 细胞系的培养 | 第38-39页 |
2.2.2 质粒的构建 | 第39-41页 |
2.2.3 转染 | 第41-42页 |
2.2.4 Luciferase活性检测 | 第42页 |
2.2.5 基因的mRNA表达的分析 | 第42-44页 |
2.2.6 Western Blot | 第44-46页 |
2.2.7 统计学分析 | 第46-47页 |
3 实验结果 | 第47-70页 |
3.1 miR-302a对流感病毒H3N2侵染的影响 | 第47-51页 |
3.1.1 基因芯片筛选 | 第47-48页 |
3.1.2 验证miR-302a的表达 | 第48页 |
3.1.3 miR-302a参与流感病毒H3N2的复制 | 第48-49页 |
3.1.4 miR-302a mimics促进流感病毒H3N2的复制和转录 | 第49-50页 |
3.1.5 miR-302a inhibitors抑制流感病毒H3N2的复制和转录 | 第50-51页 |
3.2 IRF5为miR-302a的靶标基因 | 第51-58页 |
3.2.1 生物信息学预测 | 第51-52页 |
3.2.2 双荧光色素酶检测 | 第52-55页 |
3.2.3 IRF5的mRNA表达检测 | 第55-56页 |
3.2.4 IRF5的蛋白质水平检测 | 第56-57页 |
3.2.5 流感H3N2侵染下miR-302a与IRF5的表达 | 第57-58页 |
3.3 IRF5基因调控流感病毒H3N2的复制 | 第58-61页 |
3.3.1 过表达IRF5抑制流感病毒H3N2的复制和转录 | 第58-60页 |
3.3.2 下调IRF5表达促进流感病毒H3N2的复制和转录 | 第60-61页 |
3.4 miR-302a/IRF5对流感病毒介导的宿主免疫反应的影响 | 第61-65页 |
3.4.1 IRF5参与流感病毒介导的宿主免疫反应 | 第61-63页 |
3.4.2 miR-302a通过调控IRF5参与流感病毒介导的宿主免疫反应 | 第63-65页 |
3.5 miR-302a/IRF5对TLR7细胞通路的调控 | 第65-70页 |
3.5.1 IRF5参与TLR7而非TLR3细胞通路 | 第65-66页 |
3.5.2 miR-302a调控TLR7细胞通路 | 第66-70页 |
4 讨论 | 第70-78页 |
5 小结 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-98页 |
致谢 | 第98页 |