| 中文摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 一、前言 | 第8-9页 |
| 二、材料和方法 | 第9-21页 |
| 1.实验材料 | 第9-13页 |
| 1.1 结肠癌细胞株 | 第9页 |
| 1.2 BALB/c-nu小鼠、NOD/SCID小鼠 | 第9页 |
| 1.3 主要试剂 | 第9-10页 |
| 1.4 主要仪器设备和耗材 | 第10页 |
| 1.5 常用溶液配制 | 第10-13页 |
| 2.实验方法 | 第13-21页 |
| 2.1 癌细胞的培养及传代 | 第13-14页 |
| 2.2 癌移植瘤模型建立(Patientdrived Xenograft) | 第14页 |
| 2.3 癌PDX单细胞悬液(PDC)制备 | 第14-15页 |
| 2.4 胞仪分选移植瘤CEA~-以及CEA~+细胞亚群 | 第15页 |
| 2.5 磁珠分选细胞株CEA~-以CEA~+细胞亚群，方法参考以往文献[ | 第15-16页 |
| 2.6 成实验(Cloneformation assay),方法参考以往文献 | 第16页 |
| 2.7 球体形成实验 | 第16-17页 |
| 2.8 实验(Transwell-migration assay),方法参考以往文献 | 第17页 |
| 2.9 肿瘤细胞侵袭实验(Transwell-invasion assay) | 第17-18页 |
| 2.10 小鼠肺转移模型,方法参考以往文献 | 第18页 |
| 2.11 细胞总RNA提取(Trizol法) | 第18页 |
| 2.12 逆转录,方法参考以往文献 | 第18-19页 |
| 2.13 引物设计和合成 | 第19页 |
| 2.14 荧光定量PCR(SYGR荧光染料掺入法) | 第19-20页 |
| 2.15 Westernblot免疫印迹分析 | 第20页 |
| 2.16 细胞周期测定 | 第20页 |
| 2.17 数据统计及分析 | 第20-21页 |
| 三、实验结果 | 第21-31页 |
| 1.临床床数据表明循环肿瘤标志物高的患者,具有更高癌转移的可能性 | 第21页 |
| 2.循环肿瘤标志物CA19-9促进结肠癌肿瘤细胞及亚群的转移 | 第21-24页 |
| 2.1 循环肿瘤标志物CA19-9促进结肠癌细胞株的迁移 | 第21-22页 |
| 2.2 循环肿瘤标志物CA19-9促进结肠癌细胞亚群的转移 | 第22-24页 |
| 3.循环肿瘤标志物抑制结肠癌细胞的克隆形成 | 第24-25页 |
| 4.循环肿瘤标志物抑制结肠癌细胞的成球 | 第25-27页 |
| 4.1 循环肿瘤标志物CA19-9抑制结肠癌细胞成球 | 第25-26页 |
| 4.2 循环肿瘤标志物CA19-9抑制结肠癌CEA-亚群细胞成球 | 第26-27页 |
| 5.小鼠模型内肿瘤标志物CA19-9促进肺转移的形成 | 第27-28页 |
| 6.循环肿瘤标志物CA19-9对结直肠癌细胞细胞周期的影响 | 第28-29页 |
| 7.循环肿瘤标志物对肿瘤细胞影响的机制探索 | 第29-31页 |
| 7.1 循环肿瘤标志物处理后,肿瘤细胞转录水平的改变 | 第29页 |
| 7.2 循环肿瘤标志物处理后,肿瘤细胞蛋白水平的改变 | 第29-31页 |
| 四、讨论 | 第31-34页 |
| 参考文献 | 第34-38页 |
| 致谢 | 第38页 |
