| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略表(Abbreviation) | 第11-13页 |
| 1. 文献综述 | 第13-28页 |
| 1.1 猪链球菌及猪链球菌病 | 第13-19页 |
| 1.1.1 前言 | 第13-14页 |
| 1.1.2 病原学及血清型 | 第14-15页 |
| 1.1.3 流行病学 | 第15-17页 |
| 1.1.4 临床症状及病理变化 | 第17-19页 |
| 1.2 猪链球菌2型的致病机制 | 第19-25页 |
| 1.2.1 猪链球菌在宿主上皮细胞中的黏附和侵入 | 第19-21页 |
| 1.2.2 猪链球菌在宿主血液中的生存与扩散 | 第21-23页 |
| 1.2.3 猪链球菌引起宿主产生过度的炎性反应 | 第23-25页 |
| 1.3 猪链球菌及猪链球菌病的防治 | 第25-27页 |
| 1.3.1 猪链球菌病的防治现状 | 第25-26页 |
| 1.3.2 猪链球菌病的防治措施 | 第26-27页 |
| 1.4 基质金属蛋白酶研究进展 | 第27页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第27-28页 |
| 2. 材料与方法 | 第28-57页 |
| 2.1 实验材料及准备 | 第28-33页 |
| 2.1.1 菌种与质粒 | 第28页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.1.4 培养基的制备 | 第30页 |
| 2.1.5 抗生素和缓冲液的配制 | 第30-31页 |
| 2.1.6 蛋白表达和纯化相关试剂 | 第31页 |
| 2.1.7 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳相关试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.8 Western Blot相关试剂 | 第32页 |
| 2.1.9 ELISA相关试剂 | 第32-33页 |
| 2.1.10 实验动物及细胞 | 第33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-57页 |
| 2.2.1 菌株培养条件 | 第33-34页 |
| 2.2.2 重组蛋白表达菌株的构建 | 第34-42页 |
| 2.2.3 重组蛋白表达与纯化 | 第42-47页 |
| 2.2.4 细胞株的培养及传代 | 第47页 |
| 2.2.5 重组蛋白促炎活性的检测 | 第47-52页 |
| 2.2.6 缺失突变体△1330的构建 | 第52页 |
| 2.2.7 缺失突变株生长曲线的测定 | 第52页 |
| 2.2.8 缺失突变株致炎效果的检测 | 第52-53页 |
| 2.2.9 缺失突变株毒力的测定 | 第53页 |
| 2.2.10 缺失突变株感染小鼠后细胞因子的检测 | 第53-54页 |
| 2.2.11 缺失突变株组织含菌量的测定 | 第54页 |
| 2.2.12 缺失突变株与野生株感染后体内细胞因子的测定 | 第54-55页 |
| 2.2.13 缺失突变株与野生株革兰氏染色镜检 | 第55页 |
| 2.2.14 细菌肽聚糖的提取 | 第55-56页 |
| 2.2.15 HP1330酶学底物的鉴定 | 第56-57页 |
| 3. 结果与分析 | 第57-71页 |
| 3.1 HP1330表达载体的构建 | 第57页 |
| 3.2 重组蛋白SDS-PAGE检测及Western Blot验证 | 第57-58页 |
| 3.3 重组蛋白1330中LPS的测定 | 第58-59页 |
| 3.4 重组蛋白浓度测定 | 第59页 |
| 3.5 重组蛋白促炎效果的检测 | 第59-61页 |
| 3.5.1 实时荧光定量检测HP1330促炎功能 | 第60页 |
| 3.5.2 Elisa检测HP1330促炎功能 | 第60-61页 |
| 3.6 重组蛋白促炎信号通路的检测 | 第61-63页 |
| 3.7 重组蛋白信号通路受体的检测 | 第63-64页 |
| 3.8 缺失突变株△1330的鉴定 | 第64页 |
| 3.9 缺失突变株△1330与SC19生长曲线的测定 | 第64-65页 |
| 3.10 缺失突变株△1330与SC19革兰氏染色 | 第65-67页 |
| 3.11 缺失突变株△1330毒力的评价 | 第67页 |
| 3.12 缺失突变株△1330致炎效果的体外评价 | 第67-68页 |
| 3.13 缺失突变株△1330感染小鼠后相关细胞因子的检测 | 第68-69页 |
| 3.14 体内组织含菌量测定 | 第69-70页 |
| 3.15 HP1330底物的鉴定 | 第70-71页 |
| 4. 讨论 | 第71-75页 |
| 4.1 HP1330的促炎活性及促炎机制的探索 | 第72-73页 |
| 4.2 △1330与野生菌SC19在致炎能力上与形态学上的差异 | 第73-75页 |
| 5. 结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
