中文摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-12页 |
1 综述 | 第13-29页 |
1.1 气体信号分子H_2S的研究现状 | 第13-15页 |
1.2 H_2S的生理作用 | 第15-23页 |
1.2.1 动物中H_2S的生理作用 | 第15-16页 |
1.2.2 植物中H_2S的生理作用 | 第16-23页 |
1.3 H_2S的内源产生酶 | 第23-26页 |
1.3.1 动物中H_2S产生关键酶 | 第23-24页 |
1.3.2 植物中H_2S产生关键酶 | 第24-26页 |
1.4 本实验的研究内容及意义 | 第26-29页 |
2 pET28a-AtMST原核表达载体的构建 | 第29-39页 |
2.1 材料和试剂 | 第29-30页 |
2.1.1 植株、菌种及载体 | 第29页 |
2.1.2 试剂和仪器 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-35页 |
2.2.1 拟南芥RNA的提取及反转录 | 第30-31页 |
2.2.2 目的基因AtMST的克隆及目的片段的回收 | 第31-32页 |
2.2.3 重组载体的构建及转化 | 第32-33页 |
2.2.4 大肠杆菌BL21(DE3)和DH5α感受态细胞的制备及重组子的转化 | 第33-34页 |
2.2.5 重组质粒的提取、酶切及测序鉴定 | 第34-35页 |
2.3 实验结果 | 第35-39页 |
2.3.1 植株培养 | 第35-36页 |
2.3.2 拟南芥RNA的提取、反转录以及目的基因AtMST的克隆 | 第36-37页 |
2.3.3 重组载体pET28a-AtMST的构建与转化 | 第37-38页 |
2.3.4 测序鉴定 | 第38-39页 |
3 AtMST的诱导表达及纯化 | 第39-43页 |
3.1 材料和试剂 | 第39页 |
3.1.1 菌体 | 第39页 |
3.1.2 试剂和仪器 | 第39页 |
3.2 实验方法 | 第39-41页 |
3.2.1 大肠杆菌中AtMST的诱导表达与纯化 | 第39-40页 |
3.2.2 SDS-PAGE蛋白电泳胶体的制备 | 第40-41页 |
3.2.3 蛋白样品的制备 | 第41页 |
3.3 实验结果 | 第41-43页 |
4 AtMST催化产生H_2S的酶活测定 | 第43-45页 |
4.1 试剂和仪器 | 第43页 |
4.1.1 试剂 | 第43页 |
4.1.2 仪器 | 第43页 |
4.2 H_2S产率测定 | 第43-44页 |
4.3 实验结果 | 第44-45页 |
5 讨论 | 第45-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
附录 | 第58-59页 |
攻读硕士学位期间取得的成果 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
个人简况 | 第61-64页 |