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拟南芥AtRSA1调节植物侧根生长和气孔运动的分子机制

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩略词表第13-15页
文献综述第15-45页
    1 植物糖代谢及其与ABA互作关系第15-45页
        1.1 植物体内糖代谢及其生理作用第15-28页
            1.1.1 糖代谢中TCA循环第15-16页
            1.1.2 蔗糖的代谢与运输第16-18页
            1.1.3 乙酰辅酶A的代谢中枢作用第18-21页
            1.1.4 糖代谢的信号转导及其作用第21-28页
        1.2 糖和ABA互作调控植物生长发育第28-34页
            1.2.1 调控种子发育第28-29页
            1.2.2 调控种子萌发第29-31页
            1.2.3 调控根系构型第31-32页
            1.2.4 调控植株生长和衰老第32-34页
        1.3 保卫细胞糖代谢和ABA调控的气孔运动第34-43页
            1.3.1 保卫细胞具有有限的光合作用能力第34-35页
            1.3.2 保卫细胞糖代谢与气孔运动第35-40页
            1.3.3 ABA对保卫细胞代谢水平的影响第40-41页
            1.3.4 气孔近似昼夜节律与糖代谢第41-43页
        1.4 结语:研究目的和意义第43-45页
研究报告第45-118页
    2 ABA调控拟南芥根系形态建成突变体筛选和相关基因克隆第45-73页
        2.1 前言第45-46页
        2.2 实验材料第46-47页
            2.2.1 植物材料和菌株第46-47页
            2.2.2 转基因质粒载体第47页
            2.2.3 实验试剂第47页
        2.3 实验方法第47-56页
            2.3.1 植物材料的种植第47页
            2.3.2 突变体筛选第47-48页
            2.3.3 根生长指标统计第48-49页
            2.3.4 气孔开度统计第49页
            2.3.5 拟南芥小量基因组DNA提取第49页
            2.3.6 图位克隆第49-52页
            2.3.7 基因表达分析第52-53页
            2.3.8 转基因植物的获得第53-56页
        2.4 结果和分析第56-68页
            2.4.1 ABA反应突变体筛选标准的建立第56-57页
            2.4.2 潜在突变体鉴定和功能初步分析第57-60页
            2.4.3 突变体E8/rsa1-1的表型分析第60-62页
            2.4.4 rsa1-1的遗传学分析第62-63页
            2.4.5 rsa1-1的图位克隆第63-65页
            2.4.6 等位突变体rsa1-2表型分析第65-67页
            2.4.7 rsa1-1/AtRSA1转基因植株回补其被ABA抑制的侧根生长表型第67-68页
        2.5 讨论第68-73页
            2.5.1 ABA调节根系构型形成和发育的遗传学筛选体系第68-71页
            2.5.2 AtRSA1调控植物的侧根生长和气孔反应第71-73页
    3 ATRSA1在ABA调节的侧根和幼苗发育以及气孔运动中的作用第73-83页
        3.1 前言第73页
        3.2 实验材料第73-74页
            3.2.1 植物材料第73页
            3.2.2 实验试剂第73-74页
        3.3 实验方法第74-75页
            3.3.1 萌发率和子叶变绿的统计第74页
            3.3.2 根生长指标的统计第74页
            3.3.3 失水率的计算第74页
            3.3.4 气孔开度的统计第74页
            3.3.5 气孔密度的统计第74页
            3.3.6 远红外成像技术第74-75页
            3.3.7 蜡质观察第75页
        3.4 结果和分析第75-81页
            3.4.1 ABA抑制rsa1-1幼苗形态建成第75-76页
            3.4.2 H_2O_2影响rsa1-1侧根生长第76-77页
            3.4.3 生长素不能恢复rsa1-1侧根生长第77-78页
            3.4.4 rsa1-1气孔反应表型鉴定第78-81页
        3.5 讨论第81-83页
    4 ATRSA1表达及其与ABA关系第83-97页
        4.1 前言第83页
        4.2 实验材料第83-84页
            4.2.1 植物材料和菌株第83页
            4.2.2 转基因质粒载体第83-84页
            4.2.3 实验试剂第84页
        4.3 实验方法第84-89页
            4.3.1 基因亚细胞定位第84-85页
            4.3.2 基因表达分析第85-86页
            4.3.3 基因的组织定位第86-87页
            4.3.4 酵母单杂交方法第87-88页
            4.3.5 基因枪介导的瞬时转化第88-89页
        4.4 结果和分析第89-95页
            4.4.1 AtRSA1定位于过氧化物酶体中第89-90页
            4.4.2 AtRSA1在各组织中表达情况第90-91页
            4.4.3 ABA诱导幼苗中AtRSA1的表达第91-92页
            4.4.4 ABA促进保卫细胞内AtRSA1的表达第92-93页
            4.4.5 AtRSA1启动子区ABRE元件与转录因子ABFs结合第93-94页
            4.4.6 AtRSA1启动子区ABRE元件通过与ABF4结合响应ABA第94-95页
        4.5 讨论第95-97页
    5 ATRSA1调节侧根生长和气孔运动的机制第97-117页
        5.1 前言第97-98页
        5.2 实验材料第98页
            5.2.1 植物材料和菌株第98页
            5.2.2 实验试剂第98页
        5.3 实验方法第98-101页
            5.3.1 有机酸含量的测定第98页
            5.3.2 蔗糖含量的测定第98页
            5.3.3 气孔开度的统计第98-99页
            5.3.4 电生理学实验第99页
            5.3.5 保卫细胞pH测定第99-101页
        5.4 结果和分析第101-112页
            5.4.1 AtRSA1的功能缺失降低苹果酸等的积累第101-102页
            5.4.2 rsa1对ABA引起的苹果酸等的含量降低不敏感第102-103页
            5.4.3 ABA抑制acs侧根发育第103-104页
            5.4.4 多种代谢物对rsa1侧根发育的影响第104-105页
            5.4.5 AtRSA1表达影响苹果酸含量和气孔开度第105-106页
            5.4.6 苹果酸恢复rsa1-1气孔开度小的表型第106-108页
            5.4.7 AtRSA1与苹果酸和AtABCB14转运子关系第108-110页
            5.4.8 rsa1-1保卫细胞质膜K~+通道活性降低第110页
            5.4.9 苹果酸恢复rsa1-1的K~+通道活性第110-111页
            5.4.10 AtRSA1影响保卫细胞胞内pH第111-112页
        5.5 讨论第112-117页
            5.5.1 AtRSA1参与ABA相关的渗透调节机制第112-113页
            5.5.2 膨压调控的侧根发生和保卫细胞运动第113-115页
            5.5.3 AtRSA1调节侧根发生和气孔开放模型第115-117页
    6 结论第117-118页
参考文献第118-139页
致谢第139-140页

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