| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-33页 |
| 1 研究目的与意义 | 第15-16页 |
| 2 国内外研究进展 | 第16-32页 |
| 2.1 绵羊的发情 | 第16-20页 |
| 2.1.1 绵羊的性功能发育过程 | 第16页 |
| 2.1.2 绵羊的卵巢 | 第16-17页 |
| 2.1.3 绵羊的发情 | 第17-18页 |
| 2.1.4 绵羊发情的调控机理 | 第18-19页 |
| 2.1.5 绵羊的季节性发情 | 第19页 |
| 2.1.6 季节性发情的调控机制 | 第19-20页 |
| 2.2 Leptin的研究进展 | 第20-28页 |
| 2.2.1 Leptin的发现 | 第21-22页 |
| 2.2.2 Leptin的生物学特性 | 第22页 |
| 2.2.3 Leptin与能量的关系 | 第22-23页 |
| 2.2.4 Leptin对下丘脑-垂体-性腺轴的调节 | 第23-25页 |
| 2.2.5 Leptin对动物初情期的调节 | 第25-26页 |
| 2.2.6 Leptin对发情周期的调节 | 第26-27页 |
| 2.2.7 Leptin与季节性繁殖 | 第27-28页 |
| 2.3 LncRNA的研究进展 | 第28-32页 |
| 2.3.1 LncRNA简介 | 第28页 |
| 2.3.2 LncRNA的特征 | 第28-29页 |
| 2.3.3 LncRNA的作用机制 | 第29-31页 |
| 2.3.4 LncRNA与卵巢 | 第31-32页 |
| 3 研究内容 | 第32-33页 |
| 第二章 试验研究 | 第33-81页 |
| 试验一 Leptin长受体与绵羊发情相关性分析 | 第33-41页 |
| 1 材料与方法 | 第33-35页 |
| 1.1 材料 | 第33-34页 |
| 1.2 方法 | 第34-35页 |
| 1.2.1 总RNA提取及cDNA的合成 | 第34页 |
| 1.2.2 绵羊Leptin长受体基因实时荧光定量PCR检测 | 第34页 |
| 1.2.3 实时荧光定量PCR数据分析 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-39页 |
| 2.1 Leptin长受体在不同品种绵羊发情不同时期的组织表达变化 | 第35-37页 |
| 2.2 不同发情阶段不同组织leptin长受体的表达变化 | 第37-38页 |
| 2.3 不同品种不同组织leptin长受体表达变化 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-40页 |
| 4 小结 | 第40-41页 |
| 试验二 绵羊卵巢采集及RNA测序分析 | 第41-54页 |
| 1 材料与方法 | 第42-46页 |
| 1.1 材料 | 第42页 |
| 1.1.1 动物 | 第42页 |
| 1.1.2 试验试剂 | 第42页 |
| 1.1.3 实验仪器 | 第42页 |
| 1.2 方法 | 第42-46页 |
| 1.2.1 卵巢样品采集 | 第42-43页 |
| 1.2.2 血清样本采集及LH和P测定 | 第43页 |
| 1.2.3 实时荧光定量PCR引物设计 | 第43-44页 |
| 1.2.4 反转录和实时荧光定量PCR | 第44页 |
| 1.2.5 卵巢文库构建和测序 | 第44-45页 |
| 1.2.6 数据质量控制和转录组组装 | 第45页 |
| 1.2.7 基因表达水平的量化 | 第45-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-52页 |
| 2.1 绵羊繁殖状态检验 | 第46-47页 |
| 2.2 卵巢形态学观察 | 第47-48页 |
| 2.3 黄体形成相关基因检测 | 第48-49页 |
| 2.4 RNA测序文库构建 | 第49页 |
| 2.5 转录组测序 | 第49页 |
| 2.6 参考基因组比对 | 第49-50页 |
| 2.7 数据成分分析 | 第50页 |
| 2.8 表达水平对比分析 | 第50-51页 |
| 2.9 RNA测序相关性检查 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-53页 |
| 4 小结 | 第53-54页 |
| 试验三 季节性发情相关lncRNA及leptin相关lncRNA的筛选与分析 | 第54-70页 |
| 1 材料与方法 | 第54-56页 |
| 1.1 材料 | 第54页 |
| 1.1.1 动物 | 第54页 |
| 1.1.2 实验仪器 | 第54页 |
| 1.1.3 试剂耗材 | 第54页 |
| 1.2 方法 | 第54-56页 |
| 1.2.1 编码潜能性和保守性分析 | 第54-55页 |
| 1.2.2 靶基因预测 | 第55页 |
| 1.2.3 差异表达分析 | 第55页 |
| 1.2.4 GO和KEGG富集分析 | 第55页 |
| 1.2.5 实时荧光定量PCR | 第55-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-68页 |
| 2.1 LncRNA的筛选鉴定 | 第56-58页 |
| 2.2 LncRNA筛选结果分析 | 第58-59页 |
| 2.3 差异表达lncRNA和mRNA的筛选 | 第59-61页 |
| 2.4 差异表达mRNA和lncRNA靶基因的GO和KEGG分析 | 第61-64页 |
| 2.5 差异表达lncRNA-mRNA联合分析 | 第64-65页 |
| 2.6 Leptin相关lncRNA的筛选 | 第65-66页 |
| 2.7 Leptin相关lncRNA与预测靶基因的联合分析 | 第66-68页 |
| 3 讨论 | 第68页 |
| 4 小结 | 第68-70页 |
| 试验四 差异表达基因FSHR在不同繁殖状态绵羊卵巢中的表达及与leptin的相关性分析 | 第70-81页 |
| 1 材料与方法 | 第70-72页 |
| 1.1 材料 | 第70页 |
| 1.1.1 动物 | 第70页 |
| 1.2 方法 | 第70-72页 |
| 1.2.1 卵巢样品采集 | 第70页 |
| 1.2.2 血清FSH、E2和leptin浓度测定 | 第70页 |
| 1.2.3 颗粒细胞采集 | 第70页 |
| 1.2.4 颗粒细胞培养 | 第70-71页 |
| 1.2.5 反转录和实时荧光定量PCR | 第71-72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-78页 |
| 2.1 春季绵羊卵巢FSHR和ER的表达 | 第72页 |
| 2.2 秋季绵羊卵巢FSHR和ER的表达 | 第72-73页 |
| 2.3 卵巢FSHR和ER表达的对比分析 | 第73-74页 |
| 2.4 血清FSH和E2测定 | 第74-75页 |
| 2.5 Leptin血清浓度检测 | 第75-76页 |
| 2.6 卵巢leptin长受体的表达分析 | 第76页 |
| 2.7 绵羊颗粒细胞分离培养 | 第76-77页 |
| 2.8 Leptin对颗粒细胞leptin长受体、FSHR和ERβ表达的影响 | 第77页 |
| 2.9 Leptin对其相关lncRNA的影响 | 第77-78页 |
| 2.10 Leptin对黄体形成相关基因STAR的影响 | 第78页 |
| 3 讨论 | 第78-80页 |
| 4 小结 | 第80-81页 |
| 第三章 全文总结 | 第81-82页 |
| 第四章 本文创新点及展望 | 第82-83页 |
| 1 创新点 | 第82页 |
| 2 展望 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 作者简介 | 第96-97页 |
| 附件 | 第97页 |
