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绿盲蝽钠离子通道克隆、序列分析和功能表达

致谢第4-7页
摘要第7-8页
1 文献综述第8-18页
    1.1 绿盲蝽研究进展第8-11页
        1.1.1 绿盲蝽形态特征与生活习性第8页
        1.1.2 绿盲蝽发生与危害第8-9页
        1.1.3 绿盲蝽的分布第9页
        1.1.4 国内外盲蝽的抗性研究第9-11页
        1.1.5 昆虫对拟除虫菊酯杀虫剂的抗性研究第11页
    1.2 电压门控钠离子通道的研究第11-14页
        1.2.1 钠离子通道第11-13页
        1.2.2 脊椎动物钠离子通道第13页
        1.2.3 昆虫钠离子通道第13-14页
    1.3 昆虫钠离子通道与抗性的研究第14-17页
        1.3.1 位点突变与抗性第14-15页
        1.3.2 选择性剪切与抗性第15页
        1.3.3 RNA编辑与抗性第15页
        1.3.4 钠离子通道与拟除虫菊酯抗性第15-17页
    1.4 爪蟾卵母细胞双电极电压钳技术的研究第17-18页
        1.4.1 爪蟾卵母细胞第17页
        1.4.2 双电极电压钳技术第17-18页
2 引言第18-19页
3 材料与方法第19-28页
    3.1 绿盲蝽钠离子通道克隆第19-25页
        3.1.1 供试昆虫第19页
        3.1.2 供试试剂第19页
        3.1.3 仪器和设备第19页
        3.1.4 试剂配制第19-20页
        3.1.5 引物设计第20页
        3.1.6 总RNA粗提取第20-21页
        3.1.7 反转录合成cDNA第21-22页
        3.1.8 PCR反应、电泳验证及纯化回收第22页
        3.1.9 PGH19载体质粒双酶切及纯化回收第22-23页
        3.1.10 PCR纯化回收产物与载体连接第23-24页
        3.1.11 大肠杆菌 DH5α转化第24页
        3.1.12 重组质粒验证第24-25页
        3.1.13 序列测序与分析第25页
    3.2 绿盲蝽钠离子通道表达第25-28页
        3.2.1 供试材料第25页
        3.2.2 供试试剂及仪器第25页
        3.2.3 试剂配制第25页
        3.2.4 环状质粒单酶切及纯化回收第25-26页
        3.2.5 体外合成cRNA及纯化回收第26页
        3.2.6 爪蟾卵母细胞的酶离及准备第26-27页
        3.2.7 cRNA的显微注射第27页
        3.2.8 电流记录第27页
        3.2.9 河豚毒素检测绿盲蝽钠离子通道第27页
        3.2.10 数据分析第27-28页
4 结果与分析第28-42页
    4.1 绿盲蝽钠离子通道全长基因克隆及分析第28-35页
        4.1.1 绿盲蝽钠离子通道全长基因克隆第28-30页
        4.1.2 AlNa_v同源性和系统发生分析第30-34页
        4.1.3 AlNa_v结构域预测第34-35页
    4.2 绿盲蝽钠离子通道基因选择性剪切和RNA编辑第35-37页
        4.2.1 AlNa_v选择性剪切第35-36页
        4.2.2 AlNa_v RNA编辑第36-37页
    4.3 绿盲蝽钠离子通道在非洲爪蟾卵母细胞中表达第37-42页
        4.3.1 AlNa_v和TipE质粒单酶切第37-38页
        4.3.2 AlNa_v和TipE合成cRNA浓度及A260/A280的测定第38页
        4.3.3 绿盲蝽钠离子通道在非洲爪蟾卵母细胞中的功能性表达第38-39页
        4.3.4 河豚毒素检测绿盲蝽钠离子通道第39-40页
        4.3.5 绿盲蝽钠离子通道变异体variants门控特征第40-42页
5 结论与讨论第42-45页
    5.1 绿盲蝽钠离子通道基因全长克隆第42页
    5.2 绿盲蝽钠离子通道基因选择性剪切和RNA编辑第42-43页
    5.3 绿盲蝽钠离子通道突变位点及功能表达第43-45页
参考文献第45-55页
ABSTRACT第55-56页

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