摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
引言 | 第13-15页 |
1 试剂与设备 | 第15-21页 |
1.1 细胞系与主要试剂 | 第15-16页 |
1.2 仪器与设备 | 第16-17页 |
1.3 主要溶剂的配制 | 第17-21页 |
2 方法 | 第21-33页 |
2.1 细胞培养和转染 | 第21-22页 |
2.1.1 细胞培养 | 第21页 |
2.1.2 细胞复苏 | 第21页 |
2.1.3 细胞冻存 | 第21页 |
2.1.4 细胞传代 | 第21-22页 |
2.1.5 细胞计数 | 第22页 |
2.1.6 细胞转染 | 第22页 |
2.2 敲低OCILRP2稳定株的筛选 | 第22-24页 |
2.2.1 构建OCILRP2shRNA慢病毒载体 | 第22-23页 |
2.2.2 慢病毒颗粒的制备 | 第23页 |
2.2.3 筛选嘌呤霉素的最佳浓度 | 第23页 |
2.2.4 慢病毒颗粒感染与细胞筛选 | 第23-24页 |
2.3 敲低OCILRP2的验证 | 第24-27页 |
2.3.1 Westernblot检测细胞中OCILRP2的蛋白表达 | 第24-25页 |
2.3.2 RT-qPCR检测细胞中OCILRP2的表达 | 第25-27页 |
2.4 细胞功能检测 | 第27-30页 |
2.4.1 细胞粘附能力的检测 | 第27页 |
2.4.2 细胞迁移能力的检测 | 第27-28页 |
2.4.3 细胞内吞能力的检测 | 第28-29页 |
2.4.4 细胞因子的检测 | 第29页 |
2.4.5 细胞NO分泌的检测 | 第29-30页 |
2.5 TLR4通路中相关蛋白的检测 | 第30-32页 |
2.5.1 信号通路中蛋白的检测 | 第30页 |
2.5.2 NF-?B的活性检测 | 第30-31页 |
2.5.3 NF-?B核转位的检测 | 第31-32页 |
2.6 统计学分析 | 第32-33页 |
3 结果 | 第33-43页 |
3.1 沉默OCILRP2基因的验证 | 第33页 |
3.2 沉默OCILRP2抑制RAW264.7巨噬细胞的粘附能力 | 第33-34页 |
3.3 沉默OCILRP2抑制RAW264.7巨噬细胞的迁移能力 | 第34-38页 |
3.3.1 沉默OCILRP2抑制RAW264.7巨噬细胞的划痕愈合能力 | 第34-35页 |
3.3.2 沉默OCILRP2抑制RAW264.7巨噬细胞的迁移能力 | 第35-36页 |
3.3.3 沉默OCILRP2抑制RAW264.7巨噬细胞的趋化能力 | 第36-38页 |
3.4 沉默OCILRP2抑制RAW264.7巨噬细胞的内吞功能 | 第38-39页 |
3.4.1 沉默OCILRP2抑制RAW264.7巨噬细胞的吞饮能力 | 第38页 |
3.4.2 沉默OCILRP2抑制RAW264.7巨噬细胞的吞噬能力 | 第38-39页 |
3.5 沉默OCILRP2抑制RAW264.7巨噬细胞炎性细胞因子的释放 | 第39页 |
3.6 沉默OCILRP2抑制RAW264.7巨噬细胞分泌NO及表达iNOS的能力 | 第39-40页 |
3.7 沉默OCILRP2不影响C-Raf、AKT、p44/42、p38的磷酸化水平 | 第40-41页 |
3.8 沉默OCILRP2下调TBK1、IRF3、TAK1、IκB-α、p65的磷酸化水平 | 第41页 |
3.9 沉默OCILRP2抑制巨噬细胞NF-?B的活化 | 第41-42页 |
3.10 沉默OCILRP2抑制巨噬细胞NF-?B核转位 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
5 结论 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
综述 | 第53-63页 |
参考文献 | 第57-63页 |
致谢 | 第63-65页 |
攻读学位期间参加的学术会议及研究成果 | 第65-66页 |