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中华蜜蜂成年工蜂中肠乳酸菌的分离鉴定与菌群影响因素研究

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 引言第12-23页
    1.1 昆虫共生菌研究概况第12-14页
        1.1.1 昆虫内共生菌种类第12页
        1.1.2 昆虫内共生菌对宿主的作用第12-14页
    1.2 蜜蜂体内的共生菌第14-20页
        1.2.1 蜜蜂肠道正常菌群第14-18页
        1.2.2 蜜蜂肠道中的病原菌第18页
        1.2.3 蜜蜂的肠道共生菌对蜜蜂的作用第18-20页
    1.3 蜜蜂肠道微生物的研究方法概况第20-23页
        1.3.1 传统的分类鉴定方法第20-21页
        1.3.2 分子生物学方法第21-23页
    1.4 研究目的与意义第23页
2 材料与方法第23-37页
    2.1 实验材料第23-26页
        2.1.1 蜜蜂第23页
        2.1.2 试剂第23-24页
        2.1.3 试剂的配制第24-26页
        2.1.4 主要仪器第26页
    2.2 实验方法第26-37页
        2.2.1 中蜂成年工蜂中肠乳酸菌的分离、纯化与增殖培养第26-28页
        2.2.2 肠道分离细菌的革兰氏染色第28页
        2.2.3 肠道分离细菌16S rDNA的扩增及序列分析第28-30页
        2.2.4 肠道分离细菌的生化鉴定第30页
        2.2.5 四株肠道分离细菌对中蜂工蜂的安全性测试第30-31页
        2.2.6 不同条件和培养基下细菌生长曲线的测定第31-32页
        2.2.7 东方蜜蜂微孢子虫孢子的获取第32-33页
        2.2.8 东方蜜蜂微孢子虫的接种及接种中蜂工蜂的饲养第33页
        2.2.9 不同日龄中蜂工蜂中肠的无菌获取及中蜂工蜂肠道菌差异分析第33-36页
        2.2.10 不同饲料和孢子感染量下工蜂中微孢子虫感染量计数第36页
        2.2.11 数据处理第36-37页
3 结果与分析第37-59页
    3.1 菌株的筛选第37-38页
    3.2 16S rDNA序列分析第38-39页
    3.3 系统进化分析第39-40页
    3.4 生化鉴定结果第40-41页
    3.5 乳酸菌和粘质沙雷氏菌对中蜂工蜂的安全性第41-42页
    3.6 不同条件和培养基下细菌生长曲线的测定第42-50页
        3.6.1 8株乳酸菌标准曲线的制作第42-45页
        3.6.2 不同条件下8株乳酸菌的生长曲线第45-50页
    3.7 不同提取方法提取中蜂工蜂肠道DNA纯度比较第50页
    3.8 不同饲料和不同孢子量感染下蜜蜂的累积死亡率第50-52页
    3.9 不同饲料和不同孢子量感染下中蜂工蜂东方蜜蜂微孢子虫感染量的差异第52-53页
    3.10 不同饲料和不同孢子量感染下中蜂工蜂肠道细菌的差异第53-59页
4 讨论第59-63页
参考文献第63-71页
附录第71-75页
致谢第75页

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