摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 引言 | 第12-23页 |
1.1 昆虫共生菌研究概况 | 第12-14页 |
1.1.1 昆虫内共生菌种类 | 第12页 |
1.1.2 昆虫内共生菌对宿主的作用 | 第12-14页 |
1.2 蜜蜂体内的共生菌 | 第14-20页 |
1.2.1 蜜蜂肠道正常菌群 | 第14-18页 |
1.2.2 蜜蜂肠道中的病原菌 | 第18页 |
1.2.3 蜜蜂的肠道共生菌对蜜蜂的作用 | 第18-20页 |
1.3 蜜蜂肠道微生物的研究方法概况 | 第20-23页 |
1.3.1 传统的分类鉴定方法 | 第20-21页 |
1.3.2 分子生物学方法 | 第21-23页 |
1.4 研究目的与意义 | 第23页 |
2 材料与方法 | 第23-37页 |
2.1 实验材料 | 第23-26页 |
2.1.1 蜜蜂 | 第23页 |
2.1.2 试剂 | 第23-24页 |
2.1.3 试剂的配制 | 第24-26页 |
2.1.4 主要仪器 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-37页 |
2.2.1 中蜂成年工蜂中肠乳酸菌的分离、纯化与增殖培养 | 第26-28页 |
2.2.2 肠道分离细菌的革兰氏染色 | 第28页 |
2.2.3 肠道分离细菌16S rDNA的扩增及序列分析 | 第28-30页 |
2.2.4 肠道分离细菌的生化鉴定 | 第30页 |
2.2.5 四株肠道分离细菌对中蜂工蜂的安全性测试 | 第30-31页 |
2.2.6 不同条件和培养基下细菌生长曲线的测定 | 第31-32页 |
2.2.7 东方蜜蜂微孢子虫孢子的获取 | 第32-33页 |
2.2.8 东方蜜蜂微孢子虫的接种及接种中蜂工蜂的饲养 | 第33页 |
2.2.9 不同日龄中蜂工蜂中肠的无菌获取及中蜂工蜂肠道菌差异分析 | 第33-36页 |
2.2.10 不同饲料和孢子感染量下工蜂中微孢子虫感染量计数 | 第36页 |
2.2.11 数据处理 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-59页 |
3.1 菌株的筛选 | 第37-38页 |
3.2 16S rDNA序列分析 | 第38-39页 |
3.3 系统进化分析 | 第39-40页 |
3.4 生化鉴定结果 | 第40-41页 |
3.5 乳酸菌和粘质沙雷氏菌对中蜂工蜂的安全性 | 第41-42页 |
3.6 不同条件和培养基下细菌生长曲线的测定 | 第42-50页 |
3.6.1 8株乳酸菌标准曲线的制作 | 第42-45页 |
3.6.2 不同条件下8株乳酸菌的生长曲线 | 第45-50页 |
3.7 不同提取方法提取中蜂工蜂肠道DNA纯度比较 | 第50页 |
3.8 不同饲料和不同孢子量感染下蜜蜂的累积死亡率 | 第50-52页 |
3.9 不同饲料和不同孢子量感染下中蜂工蜂东方蜜蜂微孢子虫感染量的差异 | 第52-53页 |
3.10 不同饲料和不同孢子量感染下中蜂工蜂肠道细菌的差异 | 第53-59页 |
4 讨论 | 第59-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
附录 | 第71-75页 |
致谢 | 第75页 |