摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩写词及其英汉对照 | 第8-12页 |
1 前言 | 第12-20页 |
1.1 水稻稻瘟病抗病性的研究 | 第12-13页 |
1.1.1 稻瘟病抗性基因研究的意义 | 第12-13页 |
1.1.2 稻瘟病抗性的类型 | 第13页 |
1.2 NBS-LRR类抗病蛋白的结构与功能 | 第13-14页 |
1.2.1 N-末端CC结构域 | 第13-14页 |
1.2.2 NBS结构域 | 第14页 |
1.2.3 LRR结构域 | 第14页 |
1.2.4 Ct NL(C末端非LRR区域)结构域 | 第14页 |
1.3 植物先天免疫的防御体系 | 第14-16页 |
1.4 植物抗病基因与病原菌相对应无毒基因之间的识别机制 | 第16-18页 |
1.4.1 直接互作模式 | 第16页 |
1.4.2 间接互作模式 | 第16-18页 |
1.5 酵母双杂交系统(yeast two-hybrid system, Y2H)简介 | 第18页 |
1.5.1 酵母双杂交系统的原理 | 第18页 |
1.5.2 酵母双杂交系统的应用 | 第18页 |
1.6 本研究的目的及主要内容 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-27页 |
2.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 菌物材料 | 第20页 |
2.1.2 基因材料 | 第20页 |
2.1.3 主要试剂 | 第20页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-27页 |
2.2.1 Y2H载体构建 | 第21-23页 |
2.2.2 TA克隆的构建 | 第23-24页 |
2.2.3 定点突变 | 第24-25页 |
2.2.4 酵母双杂交(yeast two-hybrid, Y2H) | 第25-26页 |
2.2.5 亚细胞定位 | 第26-27页 |
3 结果与分析 | 第27-46页 |
3.1 Avr Pik与Pik位点5个等位基因在全长及CC结构域的互作 | 第27页 |
3.2 Pik-1 及Pikp-1 的CC结构域的活性鉴定 | 第27-29页 |
3.2.1 Pik-1 等位基因蛋白CC结构域的二级结构预测 | 第27-28页 |
3.2.2 基于Y2H的Pik-1 及Pikp-1 CC结构域截短蛋白与无毒蛋白的互作 | 第28-29页 |
3.3 CC结构域内最小活性片段的鉴定 | 第29-35页 |
3.3.1 Pik-1/Pikp-1_(CC(1-97))基序的再截短 | 第29-31页 |
3.3.2 Pikp-1_(CC(131-190))基序的再截短 | 第31-32页 |
3.3.3 Pik-1_(CC(191-264))基序的再截短 | 第32-34页 |
3.3.4 Pikp-1_(CC(191-264))基序的再截短 | 第34-35页 |
3.4 CC结构域内功能性特异位点的鉴定 | 第35-44页 |
3.4.1 Pik-1 与Pikp-1 在CC_(131-190)范围内特异性位点的鉴定 | 第36-38页 |
3.4.2 Pik-1 与Pikp-1 在CC_(191-264)范围内特异性位点的鉴定 | 第38-44页 |
3.5 Pik-1 及Pikp-1 CC结构域有关片段的亚细胞定位 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-50页 |
4.1 稻瘟病抗性基因Pik家族的应用 | 第46页 |
4.2 Pik位点在进化上的分化 | 第46-47页 |
4.3 Pik位点蛋白体外互作的分析 | 第47-48页 |
4.4 Pik等位基因的亚细胞定位分析 | 第48页 |
4.5 本研究的创新点 | 第48页 |
4.6 下一步的研究设想 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-60页 |
附录A:实验方法 | 第60-68页 |
附录B:本研究所用引物总表 | 第68-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
作者简介 | 第74-75页 |
导师简介 | 第75页 |