| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-30页 |
| 1 研究背景 | 第13-15页 |
| 2 大肠杆菌简介 | 第15-17页 |
| 2.1 大肠杆菌的特性 | 第15页 |
| 2.2 大肠杆菌的多重耐药机制 | 第15-17页 |
| 3 细菌生物膜 | 第17-29页 |
| 3.1 生物膜的定义 | 第17页 |
| 3.2 生物膜的形成 | 第17-19页 |
| 3.2.1 细菌粘附阶段 | 第18页 |
| 3.2.2 细菌微菌落形成和成熟阶段 | 第18-19页 |
| 3.2.3 细菌分离阶段 | 第19页 |
| 3.3 生物膜介导的耐药机制 | 第19-25页 |
| 3.3.1 抗菌剂无法渗透进入生物膜 | 第20-21页 |
| 3.3.2 生长缓慢 | 第21-22页 |
| 3.3.3 异质性 | 第22-23页 |
| 3.3.4 一般应激反应 | 第23页 |
| 3.3.5 群体感应 | 第23-24页 |
| 3.3.6 生物膜表型的介导机制 | 第24-25页 |
| 3.4 与生物膜形成有关的一些基因的介绍 | 第25-27页 |
| 3.4.1 自诱导物合成酶LuxS | 第25-26页 |
| 3.4.2 其它一些基因 | 第26-27页 |
| 3.5 生物膜的研究进展 | 第27-29页 |
| 3.5.1 国内对生物膜的研究进展 | 第27-28页 |
| 3.5.2 国外对生物膜的研究进展 | 第28-29页 |
| 4 本文的研究意义 | 第29-30页 |
| 第二章 氮磷营养盐对水源性大肠杆菌抗生素耐药表型的影响 | 第30-45页 |
| 1 材料和方法 | 第30-35页 |
| 1.1 材料 | 第30-31页 |
| 1.1.1 微宇宙 | 第30页 |
| 1.1.2 药品和试剂 | 第30-31页 |
| 1.1.2.1 培养基 | 第30页 |
| 1.1.2.2 标准菌株 | 第30页 |
| 1.1.2.3 抗生素标准品 | 第30-31页 |
| 1.1.2.4 常用试剂 | 第31页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第31页 |
| 1.2 方法 | 第31-35页 |
| 1.2.1 微宇宙的建立 | 第31页 |
| 1.2.2 试验设计 | 第31-32页 |
| 1.2.3 微宇宙水质指标的测定 | 第32-33页 |
| 1.2.3.1 总氮(TN)、总磷(TP)的测定 | 第32-33页 |
| 1.2.3.2 高锰酸盐指数(COD_(Mn))的测定 | 第33页 |
| 1.2.4 底泥样本的采集 | 第33页 |
| 1.2.5 大肠杆菌的分离纯化、鉴定和保存 | 第33-34页 |
| 1.2.5.1 大肠杆菌的分离纯化 | 第33-34页 |
| 1.2.5.2 大肠杆菌的鉴定 | 第34页 |
| 1.2.5.3 大肠杆菌的保存 | 第34页 |
| 1.2.6 大肠杆菌对7种抗菌药物的体外敏感试验 | 第34-35页 |
| 1.2.6.1 菌株样本 | 第34页 |
| 1.2.6.2 细菌的药敏试验 | 第34-35页 |
| 1.2.7 统计学处理 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-42页 |
| 2.1 微宇宙中总氮(TN)、总磷(TP)的变化 | 第35-36页 |
| 2.2 微宇宙中高锰酸盐指数(COD_(Mn))的变化 | 第36-37页 |
| 2.3 大肠杆菌的耐药表型 | 第37-42页 |
| 3 讨论 | 第42-45页 |
| 3.1 微宇宙中总氮(TN)、总磷(TP)的变化 | 第42页 |
| 3.2 微宇宙中高锰酸盐指数(COD_(Mn))的变化 | 第42页 |
| 3.3 大肠杆菌的耐药表型 | 第42-45页 |
| 第三章 大肠杆菌生物膜形成能力的检测 | 第45-54页 |
| 1 材料与方法 | 第45-47页 |
| 1.1 材料 | 第45页 |
| 1.1.1 样品 | 第45页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第45页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第45页 |
| 1.2 方法 | 第45-47页 |
| 1.2.1 玻璃试管法定性检测生物膜形成能力 | 第45-46页 |
| 1.2.2 半定量检测生物膜形成试验 | 第46-47页 |
| 1.2.3 数据处理与统计分析 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-52页 |
| 2.1 定性检测不同剂量组中大肠杆菌生物膜形成的情况 | 第47-49页 |
| 2.2 半定量检测不同剂量组中大肠杆菌生物膜形成的情况 | 第49-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 与大肠杆菌生物膜形成相关的几个基因的研究 | 第54-80页 |
| 1 材料与方法 | 第54-59页 |
| 1.1 材料 | 第54-55页 |
| 1.1.1 样品 | 第54页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第54页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第54-55页 |
| 1.1.4 PCR引物 | 第55页 |
| 1.2 方法 | 第55-59页 |
| 1.2.1 大肠杆菌总RNA的提取 | 第55-56页 |
| 1.2.1.1 提取方法 | 第55-56页 |
| 1.2.1.2 总RNA的检测 | 第56页 |
| 1.2.2 cDNA模板的制备 | 第56-57页 |
| 1.2.3 引物的可用性检测 | 第57-58页 |
| 1.2.4 荧光定量扩增效率检测 | 第58页 |
| 1.2.5 样本的荧光定量PCR检测 | 第58-59页 |
| 1.2.6 数据处理与统计分析 | 第59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-76页 |
| 2.1 目的基因普通PCR产物电泳结果 | 第59页 |
| 2.2 荧光定量PCR扩增效率检测结果 | 第59-60页 |
| 2.3 荧光定量PCR的检测结果 | 第60-76页 |
| 2.3.1 不同采样时间大肠杆菌luxS的表达情况 | 第60-64页 |
| 2.3.2 不同剂量组中大肠杆菌luxS的表达情况 | 第64-69页 |
| 2.3.3 不同采样时间大肠杆菌mqsR的表达情况 | 第69页 |
| 2.3.4 不同剂量组中大肠杆菌mqsR的表达情况 | 第69页 |
| 2.3.5 不同采样时间大肠杆菌3个鞭毛基因和Ⅰ型菌毛基因fimH的表达情况 | 第69-71页 |
| 2.3.6 不同剂量组中大肠杆菌3个鞭毛基因和Ⅰ型菌毛基因fimH的表达情况 | 第71-76页 |
| 3 讨论 | 第76-80页 |
| 3.1 引物的可用性验证 | 第76页 |
| 3.2 荧光定量PCR的检测结果 | 第76-80页 |
| 3.2.1 大肠杆菌luxS的表达情况 | 第76-77页 |
| 3.2.2 大肠杆菌mqsR的表达情况 | 第77页 |
| 3.2.3 大肠杆菌3个鞭毛基因和I型菌毛基因fimH的表达情况 | 第77-80页 |
| 全文结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-88页 |
| 符号说明 | 第88-89页 |
| 附录一 | 第89-91页 |
| 附录二 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 基金项目 | 第93-94页 |
| 已发表文献 | 第94页 |
