| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| 1.1. 未知功能基因的研究现状及意义 | 第12-13页 |
| 1.1.1. 未知功能基因研究的现状 | 第12页 |
| 1.1.2. 研究未知功能基因的意义 | 第12-13页 |
| 1.1.3. 研究植物中未知功能基因蛋白的途径 | 第13页 |
| 1.2. 逆境胁迫对植物的影响 | 第13-16页 |
| 1.2.1. 逆境胁迫对水稻产量的影响 | 第13-14页 |
| 1.2.2. 植物逆境应答分子机制研究进展 | 第14页 |
| 1.2.3. 几种典型非生物逆境胁迫对植物的影响 | 第14-16页 |
| 1.3. 植物逆境应答信号的途径及其组分 | 第16-22页 |
| 1.3.1. 植物非生物胁迫的一般途径 | 第16-17页 |
| 1.3.2. 非生物胁迫信号的潜在感受器 | 第17页 |
| 1.3.3. 非生物胁迫应答中活性氧的作用 | 第17-18页 |
| 1.3.4. 逆境胁迫信号依赖于脱落酸 | 第18-19页 |
| 1.3.5. 脱落酸生物合成基因的调控 | 第19-21页 |
| 1.3.6. 盐及相关受体在逆境胁迫信号中作用 | 第21页 |
| 1.3.7. 转录因子在逆境胁迫信号中的作用 | 第21-22页 |
| 1.4. 本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 水稻多逆境诱导基因OsUF1的分析及克隆 | 第23-41页 |
| 2.1. 材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1. 植物材料、菌株和克隆载体 | 第23页 |
| 2.1.2. 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.1.3. 主要培养基 | 第24-25页 |
| 2.2. 实验方法 | 第25-33页 |
| 2.2.1. 基因芯片分析 | 第25页 |
| 2.2.2. 半定量PCR分析 | 第25-29页 |
| 2.2.3. OsUF1基因的克隆 | 第29-33页 |
| 2.3. 结果与分析 | 第33-41页 |
| 2.3.1. 基因芯片结果 | 第33-34页 |
| 2.3.2. OsUF1基因表达谱数据分析 | 第34-35页 |
| 2.3.3. OsUF1基因的克隆 | 第35页 |
| 2.3.4. OsUF1基因序列分析 | 第35-37页 |
| 2.3.5. OsUF1在不同逆境条件下的半定量分析 | 第37-39页 |
| 2.3.6. OsUF1在不同逆境条件下的定量分析 | 第39-41页 |
| 第三章 OsUF1植物表达载体的构建、遗传转化及阳性植株的鉴定 | 第41-74页 |
| 3.1. 材料与试剂 | 第41-43页 |
| 3.1.1. 植物材料、菌株及载体 | 第41-42页 |
| 3.1.2. 主要培养基及试剂 | 第42-43页 |
| 3.2. 实验方法 | 第43-63页 |
| 3.2.1. D-163+1300:OsUF1正义载体及反义载体的构建 | 第43-46页 |
| 3.2.2. D-163+1300:OsUF1-GFP表达载体的构建 | 第46-51页 |
| 3.2.3. D-163+300-AcGFP1-N1的构建 | 第51-52页 |
| 3.2.4. OsUF1基因启动子重组载体的构建 | 第52-55页 |
| 3.2.5. D-163+1300-OsUF1超表达及抑制表达重组载体、D-163+1300-OsUF1-GFP重组载体、D-163+1300-AcGFP1-N1重组载体和pCAMBIA3301-OsUF1-P重组载体的遗传转化 | 第55-56页 |
| 3.2.6. 水稻遗传转化植株的获得 | 第56-57页 |
| 3.2.7. 遗传转化及阳性转基因植株的鉴定 | 第57-61页 |
| 3.2.8. 水稻原生质体的制备及转化 | 第61-63页 |
| 3.3. 结果与分析 | 第63-74页 |
| 3.3.1. D-163+1300:OsVOZ1超表达载体及反义载体的构建 | 第63-65页 |
| 3.3.2. D-163+1300-OsUF1-GFP载体的构建 | 第65-66页 |
| 3.3.3. D-163+1300-GFP1-N1的构建 | 第66-67页 |
| 3.3.4. D-163+1300-UF1-P启动子重组载体的构建 | 第67-68页 |
| 3.3.5. 水稻遗传转化株的获得 | 第68-69页 |
| 3.3.6. TO代转基因水稻的检测 | 第69-72页 |
| 3.3.7. OsUF1的亚细胞定位 | 第72-74页 |
| 第四章 融合蛋白的表达及抗逆实验 | 第74-80页 |
| 4.1. 材料 | 第74页 |
| 4.1.1. 菌株及载体 | 第74页 |
| 4.1.2. 主要试剂及培养基 | 第74页 |
| 4.2. 实验方法 | 第74-77页 |
| 4.2.1. pET32a-OsUF1重组载体的构建 | 第74-75页 |
| 4.2.2. 融合蛋白的诱导 | 第75-76页 |
| 4.2.3. pET32a: OsUF1融合蛋白的纯化 | 第76-77页 |
| 4.2.4. 原核表达中对盐的抗性检测 | 第77页 |
| 4.3. 结果与分析 | 第77-80页 |
| 4.3.1. 重组载体的构建 | 第77-78页 |
| 4.3.2. 融合蛋白的表达及纯化 | 第78-79页 |
| 4.3.3. OsUF1在原核中对盐抗性的生长曲线 | 第79-80页 |
| 第五章 转基因植株的逆境处理及分析 | 第80-96页 |
| 5.1. 实验材料 | 第80-81页 |
| 5.1.1. 处理材料 | 第80页 |
| 5.1.2. 药品及培养基 | 第80-81页 |
| 5.2. 实验方法 | 第81-84页 |
| 5.2.1. 种子的萌发 | 第81页 |
| 5.2.2. 逆境处理 | 第81-83页 |
| 5.2.3. 启动子转基因植株的GUS活性检测 | 第83-84页 |
| 5.3. 结果与分析 | 第84-96页 |
| 5.3.1. OsUF1超表达植株对逆境的应答 | 第84-93页 |
| 5.3.2. 通过GUS活性检测初步判断OsUF1启动子对逆境的应答 | 第93-96页 |
| 第六章 讨论与结论 | 第96-101页 |
| 6.1. 讨论 | 第96-98页 |
| 6.2. 展望 | 第98-99页 |
| 6.3. 结论 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 硕士其间发表论文 | 第116页 |
