| 中文摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 缩略语表 | 第15-19页 |
| 第一部分 文献综述 | 第19-42页 |
| 第一章 破骨细胞形成及骨吸收 | 第19-25页 |
| 1. 破骨细胞简介 | 第20页 |
| 2. 破骨细胞分化的信号转导机制 | 第20-22页 |
| 2.1 RANK信号 | 第21页 |
| 2.2 共激活信号 | 第21-22页 |
| 3. 破骨细胞活化及调控机制 | 第22-24页 |
| 3.1 破骨细胞的活化 | 第22-23页 |
| 3.2 破骨细胞活化的调控机制 | 第23-24页 |
| 4. 破骨细胞凋亡的研究 | 第24-25页 |
| 第二章 维生素D受体与骨代谢 | 第25-31页 |
| 1. 维生素D受体的分子结构与功能 | 第25-27页 |
| 2. 维生素D受体与骨代谢的研究 | 第27-31页 |
| 2.1 维生素D受体与破骨细胞的研究 | 第28-29页 |
| 2.2 维生素D受体与成骨细胞的研究 | 第29-30页 |
| 2.3 维生素D受体与骨细胞的研究 | 第30-31页 |
| 2.4 维生素D受体与软骨细胞的研究 | 第31页 |
| 参考文献 | 第31-42页 |
| 第二部分 试验研究 | 第42-108页 |
| 第一章 小鼠破骨细胞体外分化模型的建立 | 第42-53页 |
| 1 材料和方法 | 第42-45页 |
| 1.1 实验动物 | 第42页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第42-43页 |
| 1.3 试剂的配制 | 第43页 |
| 1.4 小鼠骨髓巨噬细胞的培养 | 第43-44页 |
| 1.5 小鼠成骨细胞的分离培养及鉴定 | 第44页 |
| 1.6 诱导小鼠骨髓巨噬细胞形成破骨细胞模型的建立 | 第44-45页 |
| 1.7 小鼠破骨细胞共培养体系的建立 | 第45页 |
| 1.8 小鼠破骨细胞骨吸收功能的鉴定 | 第45页 |
| 1.9 数据分析 | 第45页 |
| 2 结果 | 第45-50页 |
| 2.1 小鼠骨髓巨噬细胞的培养及诱导分化为破骨细胞的鉴定 | 第45-46页 |
| 2.2 不同密度的小鼠骨髓巨噬细胞对破骨细胞分化的影响 | 第46-47页 |
| 2.3 小鼠成骨细胞的分离培养及鉴定 | 第47-48页 |
| 2.4 小鼠破骨细胞共培养体系的建立 | 第48-49页 |
| 2.5 小鼠破骨细胞骨吸收活性的检测 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 第二章 维生素D受体在小鼠破骨细胞分化过程中的表达分布 | 第53-65页 |
| 1 材料和方法 | 第53-57页 |
| 1.1 实验动物 | 第53页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第53-54页 |
| 1.3 试剂的配制 | 第54-55页 |
| 1.4 细胞培养 | 第55页 |
| 1.5 细胞实时分析系统(RTCA)检测破骨细胞分化中的细胞指数变化 | 第55页 |
| 1.6 免疫荧光法检测VDR在破骨细胞及其前体中的表达分布 | 第55-56页 |
| 1.7 RT-PCR检测VDR在不同组织及破骨细胞分化中基因的表达变化 | 第56-57页 |
| 1.8 Western blot检测破骨细胞分化中转录因子的表达变化 | 第57页 |
| 1.9 数据分析 | 第57页 |
| 2 结果 | 第57-61页 |
| 2.1 破骨细胞分化过程中细胞指数的变化 | 第57-58页 |
| 2.2 维生素D受体在不同组织与细胞中的表达分布 | 第58-60页 |
| 2.3 维生素D受体在破骨细胞分化过程中mRNA表达的变化 | 第60页 |
| 2.4 维生素D受体在破骨细胞分化过程中蛋白的表达变化 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 第三章 破骨细胞前体中VDR的激活对小鼠破骨细胞分化的影响 | 第65-81页 |
| 1. 实验材料与方法 | 第65-70页 |
| 1.1 实验材料 | 第65页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第65-66页 |
| 1.3 试剂的配制 | 第66页 |
| 1.4 RTCA检测VDR激活剂1 α,25-(OH)_2D_3对破骨细胞前体增殖及分化中细胞指数的影响 | 第66-67页 |
| 1.5 细胞培养 | 第67页 |
| 1.6 病毒的包装及感染 | 第67-68页 |
| 1.7 破骨细胞的诱导分化及TRAP染色 | 第68-69页 |
| 1.8 RNA提取及实时荧光聚合酶链式反应 | 第69页 |
| 1.9 总蛋白提取及免疫印迹实验 | 第69页 |
| 1.10 数据分析 | 第69-70页 |
| 2. 结果 | 第70-78页 |
| 2.1 VDR激活剂1α,25-(OH)_2D_3对破骨细胞前体增殖及分化细胞指数的影响 | 第70-71页 |
| 2.2 破骨细胞前体中VDR的激活对破骨细胞形成的影响 | 第71-75页 |
| 2.3 破骨细胞前体中VDR的激活对破骨细胞分化相关标志基因表达的影响 | 第75-77页 |
| 2.4 破骨细胞前体中VDR过表达对破骨细胞相关标志基因表达的影响 | 第77-78页 |
| 3. 讨论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-81页 |
| 第四章 破骨细胞前体中VDR的激活抑制小鼠破骨细胞分化的机制 | 第81-97页 |
| 1 材料和方法 | 第81-86页 |
| 1.1 实验材料 | 第81页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第81-82页 |
| 1.3 试剂的配制 | 第82页 |
| 1.4 细胞培养 | 第82-83页 |
| 1.5 重组质粒转染 | 第83页 |
| 1.6 病毒的包装及感染 | 第83-84页 |
| 1.7 破骨细胞培养及TRAP染色 | 第84页 |
| 1.8 RNA的提取及实时荧光聚合酶链式反应 | 第84页 |
| 1.9 免疫共沉淀实验 | 第84-85页 |
| 1.10 蛋白免疫印迹实验 | 第85页 |
| 1.11 激光共聚焦显微镜共定位观察 | 第85页 |
| 1.12 数据分析 | 第85-86页 |
| 2 结果 | 第86-94页 |
| 2.1 破骨细胞前体中VDR的激活对小鼠破骨细胞分化早期信号的影响 | 第86-88页 |
| 2.2 破骨细胞前体中VDR的激活对小鼠破骨细胞分化关键转录因子表达的影响 | 第88-89页 |
| 2.3 破骨细胞前体中c-fos在VDR激活后调控破骨细胞分化中的作用 | 第89-91页 |
| 2.4 破骨细胞前体中过表达c-fos在VDR激活后调控破骨细胞相关标志基因表达的影响 | 第91页 |
| 2.5 破骨细胞前体中VDR的激活对c-fos稳定性的影响 | 第91-92页 |
| 2.6 细胞内VDR与c-fos之间的调节机制 | 第92-93页 |
| 2.7 细胞内VDR与c-fos共定位观察 | 第93-94页 |
| 3 讨论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-97页 |
| 第五章 破骨细胞前体中VDR的激活抑制小鼠破骨细胞骨吸收功能的机制 | 第97-108页 |
| 1 材料和方法 | 第97-100页 |
| 1.1 实验动物 | 第97页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第97-98页 |
| 1.3 试剂的配制 | 第98页 |
| 1.4 细胞培养 | 第98页 |
| 1.5 扫描电子显微镜观察骨吸收陷窝 | 第98-99页 |
| 1.6 细胞骨架染色 | 第99页 |
| 1.7 RNA提取及实时荧光聚合酶链式反应 | 第99页 |
| 1.8 蛋白免疫印迹实验 | 第99页 |
| 1.9 数据分析 | 第99-100页 |
| 2 结果 | 第100-104页 |
| 2.1 破骨细胞前体中VDR的激活对小鼠破骨细胞骨吸收活性的影响 | 第100-101页 |
| 2.2 破骨细胞前体中VDR的激活对小鼠破骨细胞骨吸收功能相关基因表达的影响 | 第101-103页 |
| 2.3 破骨细胞前体中VDR的激活对小鼠破骨细胞骨架及多核化的影响 | 第103页 |
| 2.4 破骨细胞前体中VDR的激活对破骨细胞Rho GTPases关键蛋白表达的影响. | 第103-104页 |
| 3 讨论 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-108页 |
| 全文结论 | 第108-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 攻读博士学位期间发表论文 | 第110-112页 |
