| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-21页 |
| 一 病毒概况 | 第10-12页 |
| 1. 仙台病毒 | 第10页 |
| 2. 小鼠肝炎病毒 | 第10-11页 |
| 3. 呼肠孤病毒3型 | 第11-12页 |
| 二 Luminex液相芯片技术 | 第12-21页 |
| 1. Luminex液相芯片技术的原理 | 第14页 |
| 2. Luminex液相芯片技术与传统检测方法比较 | 第14-16页 |
| 3. Luminex液相芯片技术的应用 | 第16-20页 |
| 4. 小结与展望 | 第20-21页 |
| 第二部分 实验内容 | 第21-45页 |
| 第一章 小鼠3种病毒多重RT-PCR检测方法的建立 | 第21-36页 |
| 1 材料 | 第21-22页 |
| 1.1 毒株与细胞 | 第21页 |
| 1.2 主要试剂 | 第21页 |
| 1.3 主要仪器与耗材 | 第21-22页 |
| 2 方法 | 第22-28页 |
| 2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2 病毒增殖 | 第23页 |
| 2.3 病毒RNA提取 | 第23-24页 |
| 2.4 病毒cDNA的合成 | 第24页 |
| 2.5 病毒DNA提取 | 第24-25页 |
| 2.6 PCR引物设计与修饰 | 第25-26页 |
| 2.7 单一病毒PCR检测方法的建立和优化 | 第26-27页 |
| 2.8 凝胶电泳及测序 | 第27页 |
| 2.9 三种病毒多重PCR检测方法的建立 | 第27-28页 |
| 3 实验结果 | 第28-35页 |
| 3.1 细胞培养及病毒扩增 | 第28-30页 |
| 3.2 RNA提取结果 | 第30页 |
| 3.3 引物特异性实验结果 | 第30页 |
| 3.4 测序结果 | 第30-31页 |
| 3.5 模板灵敏度实验结果 | 第31-32页 |
| 3.6 二重不对称PCR | 第32-33页 |
| 3.7 修饰引物二重PCR灵敏度 | 第33页 |
| 3.8 多重PCR的扩增与优化 | 第33-34页 |
| 3.9 修饰引物灵敏度实验 | 第34-35页 |
| 4 小结与讨论 | 第35-36页 |
| 第二章 小鼠3种病毒Luminex液相芯片检测方法的建立 | 第36-45页 |
| 1 材料 | 第36页 |
| 1.1 主要试剂与溶液 | 第36页 |
| 1.2 主要仪器与耗材 | 第36页 |
| 2 方法 | 第36-39页 |
| 2.1 微球杂交缓冲液的制备 | 第36-37页 |
| 2.2 PCR产物与微球杂交 | 第37-38页 |
| 2.3 Luminex200样品分析和结果判定 | 第38页 |
| 2.4 xMAP杂交条件的优化 | 第38页 |
| 2.5 Luminex液相芯片多重检测方法的建立 | 第38-39页 |
| 2.6 对比实验 | 第39页 |
| 3 实验结果 | 第39-44页 |
| 3.1 杂交温度对检测结果的影响 | 第39-40页 |
| 3.2 杂交时间对检测结果的影响 | 第40页 |
| 3.3 液相基因芯片检测体系的建立 | 第40页 |
| 3.4 特异性实验 | 第40-41页 |
| 3.5 重复性实验 | 第41-42页 |
| 3.6 灵敏度实验 | 第42-43页 |
| 3.7 对比实验 | 第43-44页 |
| 4 小结与讨论 | 第44-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 附录1 | 第46-47页 |
| 附录2 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第55-56页 |
