| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩列词表 | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-28页 |
| 1.1 葡萄霜霉病概述 | 第15-18页 |
| 1.1.1 葡萄霜霉菌致病过程 | 第15-17页 |
| 1.1.2 葡萄对霜霉病的抗性 | 第17-18页 |
| 1.2 植物对病原菌的防御机制 | 第18-19页 |
| 1.3 PAMPs诱导的植物免疫过程 | 第19-23页 |
| 1.3.1 病原相关分子模式(PAMPs) | 第19-20页 |
| 1.3.2 植物模式识别受体(PRRs) | 第20-22页 |
| 1.3.3 识别后的应答反应 | 第22-23页 |
| 1.4 Efforts诱导的植物免疫过程 | 第23-24页 |
| 1.5 植物系统获得性抗性(SAR)研究进展 | 第24-27页 |
| 1.5.1 SA是SAR的系统信号分子 | 第25-26页 |
| 1.5.2 NPR1研究进展 | 第26-27页 |
| 1.5.3 SAR途径中其他物质 | 第27页 |
| 1.6 本研究目的与意义 | 第27-28页 |
| 第二章 不同葡萄品种抗病性鉴定 | 第28-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 植物材料及菌株 | 第28页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第28页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-30页 |
| 2.2.1 葡萄盆栽苗的种植 | 第29页 |
| 2.2.2 葡萄霜霉菌的收集、扩繁与保存 | 第29页 |
| 2.2.3 葡萄霜霉菌的侵染过程 | 第29-30页 |
| 2.2.4 葡萄霜霉病发病情况统计 | 第30页 |
| 2.2.5 霜霉菌侵染葡萄叶片的显微观察 | 第30页 |
| 2.3 实验结果 | 第30-34页 |
| 2.3.1 不同葡萄品种对霜霉菌的抗性鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.2 葡萄霜霉病发病情况统计 | 第31-32页 |
| 2.3.3 霜霉侵染不同葡萄品种叶片的显微观察 | 第32-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 葡萄抗霜霉病PRR的筛选与功能鉴定 | 第36-66页 |
| 3.1 实验材料 | 第36-38页 |
| 3.1.1 植物材料和霜霉菌 | 第36页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第37-38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-46页 |
| 3.2.1 葡萄盆栽苗的种植 | 第38页 |
| 3.2.2 葡萄霜霉菌的扩繁与保存 | 第38页 |
| 3.2.3 葡萄活体接菌 | 第38页 |
| 3.2.4 葡萄叶片RNA的提取 | 第38-39页 |
| 3.2.5 第一条链cDNA的合成 | 第39页 |
| 3.2.6 荧光定量PCR检测 | 第39-40页 |
| 3.2.7 目的基因的克隆 | 第40-41页 |
| 3.2.8 生物信息学分析 | 第41页 |
| 3.2.9 VaHAESA蛋白的亚细胞定位 | 第41-42页 |
| 3.2.10 葡萄叶片的瞬时转化及接种霜霉菌 | 第42-43页 |
| 3.2.11 过氧化氢(H_2O_2)的检测 | 第43-44页 |
| 3.2.12 一氧化氮(NO)的检测 | 第44页 |
| 3.2.13 转基因拟南芥的获得与筛选 | 第44-45页 |
| 3.2.14 转基因拟南芥的盐处理、干旱处理和冷处理 | 第45-46页 |
| 3.3 实验结果 | 第46-62页 |
| 3.3.1 双红在接种亲和与非亲和霜霉菌后PRRs表达模式分析 | 第46-49页 |
| 3.3.2 VaHAESA基因的克隆及测序 | 第49页 |
| 3.3.3 生物信息学结果分析 | 第49-52页 |
| 3.3.4 葡萄VaHAESA蛋白亚细胞定位 | 第52-53页 |
| 3.3.5 VaHAESA瞬时转化葡萄无核白叶片的抗病功能分析 | 第53-55页 |
| 3.3.6 VaHAESA瞬时转化葡萄后激发其抗病防御反应 | 第55-57页 |
| 3.3.7 转基因拟南芥提高了对霜霉菌的抗病性 | 第57-59页 |
| 3.3.8 转基因拟南芥在非生物胁迫下的响应 | 第59-62页 |
| 3.4 讨论 | 第62-66页 |
| 第四章 SAR途径在葡萄抗霜霉病过程中的功能分析 | 第66-81页 |
| 4.1 实验材料 | 第66-67页 |
| 4.1.1 植物材料与菌株 | 第66页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第66-67页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第67页 |
| 4.2 实验方法 | 第67-70页 |
| 4.2.1 葡萄盆栽苗的种植 | 第67页 |
| 4.2.2 葡萄盆栽苗接菌 | 第67-68页 |
| 4.2.3 植物激素的提取 | 第68页 |
| 4.2.4 植物激素的检测 | 第68-69页 |
| 4.2.5 葡萄叶片RNA的提取 | 第69页 |
| 4.2.6 第一链cDNA的合成 | 第69页 |
| 4.2.7 荧光定量PCR分析 | 第69-70页 |
| 4.3 实验结果 | 第70-77页 |
| 4.3.1 葡萄接种霜霉菌后植物激素的检测 | 第70-74页 |
| 4.3.2 葡萄接种霜霉菌后SAR通路上的基因转录水平 | 第74-77页 |
| 4.4 讨论 | 第77-81页 |
| 第五章 NPR1在葡萄抗病过程中的功能鉴定 | 第81-98页 |
| 5.1 实验材料 | 第81-83页 |
| 5.1.1 植物材料与菌株 | 第81页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第81-82页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第82-83页 |
| 5.2 实验方法 | 第83-89页 |
| 5.2.1 葡萄RNA提取 | 第83页 |
| 5.2.2 第一条链cDNA的合成 | 第83页 |
| 5.2.3 山葡萄“双红”NPR1基因克隆 | 第83-85页 |
| 5.2.4 载体构建 | 第85-87页 |
| 5.2.5 酵母双杂交筛选VaNPR1在葡萄内的靶蛋白 | 第87-88页 |
| 5.2.6 双分子荧光互补(BiFC)验证蛋白互作 | 第88-89页 |
| 5.2.7 VaTRF1和VaSnRK2蛋白的亚细胞定位 | 第89页 |
| 5.2.8 葡萄叶片的瞬时转化及接种霜霉菌 | 第89页 |
| 5.3 实验结果 | 第89-96页 |
| 5.3.1 葡萄VaNPR1基因克隆与测序 | 第89-90页 |
| 5.3.2 诱饵蛋白自激活与毒性检测 | 第90-91页 |
| 5.3.3 酵母双杂交筛选VaNPR1的互作蛋白 | 第91-93页 |
| 5.3.4 BiFC验证VaNPR1与VaTRF1、VaSnRK2蛋白互作 | 第93页 |
| 5.3.5 VaTRF1和VaSnRK2的亚细胞定位 | 第93-94页 |
| 5.3.6 葡萄中TRF1和SnRK2表达模式分析 | 第94-95页 |
| 5.3.7 VaTRF1基因的过表达能提高葡萄对霜霉菌的抗性 | 第95-96页 |
| 5.4 讨论 | 第96-98页 |
| 第六章 结论与展望 | 第98-100页 |
| 6.1 结论 | 第98-99页 |
| 6.2 展望 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-112页 |
| 附录 | 第112-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
| 作者简介 | 第121页 |
