| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第16-31页 |
| 1.1 青霉素酰化酶 | 第16-21页 |
| 1.1.1 青霉素酰化酶的来源与分类 | 第16页 |
| 1.1.2 青霉素酰化酶的结构及催化机理 | 第16-17页 |
| 1.1.3 青霉素酰化酶的应用 | 第17-21页 |
| 1.1.3.1 在半合成抗生素中间体制备中的应用 | 第18页 |
| 1.1.3.2 在半合成β-内酰胺抗生素合成中的应用 | 第18-19页 |
| 1.1.3.3 在外消旋混合物拆分中的应用 | 第19-20页 |
| 1.1.3.4 在多肽合成中的应用 | 第20-21页 |
| 1.2 纤维素纳米晶 | 第21-22页 |
| 1.2.1 纤维素纳米晶概述 | 第21页 |
| 1.2.2 纤维素纳米晶的改性及应用 | 第21-22页 |
| 1.2.3 磁性纤维素纳米晶的概述 | 第22页 |
| 1.3 固定化酶 | 第22-25页 |
| 1.3.1 固定化酶的意义 | 第22-23页 |
| 1.3.2 固定化酶的方法 | 第23-25页 |
| 1.3.2.1 吸附法 | 第23页 |
| 1.3.2.2 包埋法 | 第23-24页 |
| 1.3.2.3 共价结合法 | 第24页 |
| 1.3.2.4 交联法 | 第24-25页 |
| 1.4 新交联剂三羟甲基磷 | 第25-26页 |
| 1.5 头孢克洛 | 第26-28页 |
| 1.5.1 头孢克洛的概述 | 第26-27页 |
| 1.5.2 头孢克洛的制备 | 第27-28页 |
| 1.6 深度共熔溶剂体系中的酶催化反应 | 第28-29页 |
| 1.7 本课题的研究意义与主要内容 | 第29-31页 |
| 1.7.1 主要研究内容 | 第29-30页 |
| 1.7.2 研究意义 | 第30-31页 |
| 第二章 磁性纤维素纳米晶固定化青霉素酰化酶的制备 | 第31-40页 |
| 2.1 引言 | 第31页 |
| 2.2 实验材料及设备 | 第31-33页 |
| 2.2.1 主要实验试剂 | 第31-32页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第32-33页 |
| 2.3 实验方法 | 第33-36页 |
| 2.3.1 磁性纤维素纳米晶的制备 | 第33页 |
| 2.3.2 应用戊二醛为交联剂制备固定化青霉素酰化酶 | 第33页 |
| 2.3.3 应用三羟甲基磷为交联剂制备固定化青霉素酰化酶 | 第33-34页 |
| 2.3.4 青霉素酰化酶蛋白质浓度的测定 | 第34页 |
| 2.3.5 青霉素酰化酶酶活测定方法 | 第34页 |
| 2.3.6 固定化过程中各因素对固定化效果的影响 | 第34-36页 |
| 2.3.6.1 载体/酶的质量比的确定 | 第35页 |
| 2.3.6.2 交联剂浓度的确定 | 第35页 |
| 2.3.6.3 交联时间的确定 | 第35-36页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第36-39页 |
| 2.4.1 载酶比的确定 | 第36-37页 |
| 2.4.2 交联剂浓度的确定 | 第37-38页 |
| 2.4.3 交联时间的确定 | 第38-39页 |
| 2.5 本章小结 | 第39-40页 |
| 第三章 磁性纤维素纳米晶固定化青霉素酰化酶的表征 | 第40-58页 |
| 3.1 引言 | 第40页 |
| 3.2 实验材料和设备 | 第40-41页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第40-41页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第41页 |
| 3.3 实验方法 | 第41-44页 |
| 3.3.1 磁性纤维素纳米晶固定化青霉素酰化酶PA-GA-MNCC和PA-THP-MNCC的制备 | 第41页 |
| 3.3.2 青霉素酰化酶蛋白浓度和酶活力的测定方法 | 第41页 |
| 3.3.3 PA-GA-MNCC和PA-THP-MNCC的结构表征 | 第41-42页 |
| 3.3.3.1 X-射线衍射(XRD)分析 | 第41-42页 |
| 3.3.3.2 扫描电镜(SEM)分析 | 第42页 |
| 3.3.3.3 傅里叶变换红外光谱(FTIR)分析 | 第42页 |
| 3.3.4 酶学性质的表征 | 第42-44页 |
| 3.3.4.1 最适pH的研究 | 第42-43页 |
| 3.3.4.2 最适温度的研究 | 第43页 |
| 3.3.4.3 稳定性的研究 | 第43页 |
| 3.3.4.4 温度稳定性的研究 | 第43页 |
| 3.3.4.5 操作稳定性的研究 | 第43-44页 |
| 3.3.4.6 有机溶剂耐受性的研究 | 第44页 |
| 3.3.4.7 储藏稳定性的研究 | 第44页 |
| 3.3.5 二级结构的研究 | 第44页 |
| 3.3.6 PA-GA-MNCC和PA-THP-MNCC动力学参数研究 | 第44页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第44-57页 |
| 3.4.1 X-射线衍射分析(XRD) | 第44-46页 |
| 3.4.2 扫描电镜(SEM)分析 | 第46页 |
| 3.4.3 傅里叶变换红外光谱(FTIR)分析 | 第46-47页 |
| 3.4.4 最适pH的研究 | 第47-48页 |
| 3.4.5 最适温度的研究 | 第48-49页 |
| 3.4.6 pH稳定性研究 | 第49-50页 |
| 3.4.7 热稳定性研究 | 第50-51页 |
| 3.4.8 操作稳定性的研究 | 第51-52页 |
| 3.4.9 有机溶剂耐受性的研究 | 第52-53页 |
| 3.4.10 储藏稳定性研究 | 第53-54页 |
| 3.4.11 二级结构的研究 | 第54-56页 |
| 3.4.12 动力学参数研究 | 第56-57页 |
| 3.5 本章小结 | 第57-58页 |
| 第四章 PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的研究 | 第58-68页 |
| 4.1 引言 | 第58页 |
| 4.2 实验材料和设备 | 第58-59页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第58-59页 |
| 4.2.2 主要仪器设备 | 第59页 |
| 4.3 实验方法 | 第59-62页 |
| 4.3.1 磁性纤维素纳米晶固定化青霉素酰化酶PA-THP-MNCC的制备 | 第59-60页 |
| 4.3.2 青霉素酰化酶蛋白浓度和酶活力的测定方法 | 第60页 |
| 4.3.3 固定化酶PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成反应的一般过程 | 第60页 |
| 4.3.4 高效液相色谱(HPLC)分析 | 第60页 |
| 4.3.5 转化率及产率的计算 | 第60-61页 |
| 4.3.5.1 转化率 | 第60页 |
| 4.3.5.2 产率 | 第60-61页 |
| 4.3.5.3 合成水解比S/H | 第61页 |
| 4.3.6 温度对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第61页 |
| 4.3.7 pH对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第61页 |
| 4.3.8 底物摩尔比对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第61-62页 |
| 4.3.9 底物浓度对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第62页 |
| 4.3.10 PA-THP-MNCC量对其催化头孢克洛的影响 | 第62页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第62-67页 |
| 4.4.1 温度对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第62-63页 |
| 4.4.2 pH对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第63-64页 |
| 4.4.3 底物摩尔比对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第64-65页 |
| 4.4.4 底物浓度对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第65-66页 |
| 4.4.5 PA-THP-MNCC量对其催化头孢克洛的影响 | 第66-67页 |
| 4.5 本章小结 | 第67-68页 |
| 第五章 含DES体系中PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的研究 | 第68-81页 |
| 5.1 引言 | 第68页 |
| 5.2 实验材料和设备 | 第68-69页 |
| 5.2.1 主要试剂 | 第68-69页 |
| 5.2.2 主要仪器设备 | 第69页 |
| 5.3 实验方法 | 第69-73页 |
| 5.3.1 磁性纤维素纳米晶固定化青霉素酰化酶PA-THP-MNCC的制备 | 第69页 |
| 5.3.2 青霉素酰化酶蛋白浓度和酶活力的测定方法 | 第69页 |
| 5.3.3 固定化酶PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成反应的一般过程 | 第69-70页 |
| 5.3.4 高效液相色谱(HPLC)分析 | 第70页 |
| 5.3.5 DES配置方法 | 第70页 |
| 5.3.6 各DES配置表 | 第70页 |
| 5.3.7 各DES中7-ACCA的溶解度 | 第70-71页 |
| 5.3.8 在DES混合溶剂中使用PA-THP-MNCC催化合成头孢克洛反应的一般过程 | 第71页 |
| 5.3.9 与水不同混合比例的DES混合溶剂中催化头孢克洛合成的反应 | 第71页 |
| 5.3.10 在ChCl:Glycol-H_2O(7:3)中底物摩尔比对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第71-72页 |
| 5.3.11 在ChCl:Glycol-H_2O(7:3)中温度对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第72页 |
| 5.3.12 在ChCl:Glycol-H_2O(7:3)中pH对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第72页 |
| 5.3.13 在ChCl:Glycol-H_2O(7:3)中底物浓度对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第72页 |
| 5.3.14 在ChCl:Glycol-H_2O(7:3)中PA-THP-MNCC量对其催化头孢克洛的影响 | 第72-73页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第73-80页 |
| 5.4.1 7-ACCA在各种DES中的溶解度 | 第73-74页 |
| 5.4.2 各种DES中合成头孢克洛效果的比较 | 第74页 |
| 5.4.3 不同混合比例的DES混合溶剂中催化头孢克洛合成的反应 | 第74-75页 |
| 5.4.4 在ChCl:Glycol-H_2O(7:3)中底物摩尔比对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第75-76页 |
| 5.4.5 在ChCl:Glycol-H_2O(7:3)中温度对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第76-77页 |
| 5.4.6 在ChCl:Glycol-H_2O(7:3)中pH对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第77-78页 |
| 5.4.7 在ChCl:Glycol-H_2O(7:3)中底物浓度对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第78-79页 |
| 5.4.8 在ChCl:Glycol-H_2O(7:3)中投酶量对PA-THP-MNCC催化头孢克洛合成的影响 | 第79-80页 |
| 5.5 本章小结 | 第80-81页 |
| 结论与展望 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-93页 |
| 附录 | 第93-96页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 附件 | 第98页 |
