| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 缩略语表 | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-19页 |
| ·肝再生研究进展 | 第13-16页 |
| ·肝再生 | 第13页 |
| ·肝再生的细胞生物学特征 | 第13-14页 |
| ·肝再生的细胞周期调控 | 第14-16页 |
| ·胰腺炎相关蛋白(PAP)的研究进展 | 第16-17页 |
| ·PAP 的结构与分布 | 第16页 |
| ·PAP 与肝再生 | 第16-17页 |
| ·本论文的研究目的和意义 | 第17-19页 |
| ·研究目的 | 第17页 |
| ·研究意义 | 第17-19页 |
| 2 pap 基因对肝癌细胞 BEL-7402 的作用研究 | 第19-59页 |
| ·引言 | 第19页 |
| ·实验材料和方法 | 第19-41页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第19-22页 |
| ·菌株、载体和细胞株 | 第22页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·大鼠 2/3 肝切除模型制作 | 第22页 |
| ·pap 基因的克隆 | 第22-27页 |
| ·pap 表达载体的构建 | 第27-29页 |
| ·pap 干涉片段的制备 | 第29-30页 |
| ·pap 干涉载体的构建 | 第30-32页 |
| ·pap 检验载体的构建 | 第32-33页 |
| ·小鼠肝脏的液压转基因 | 第33-34页 |
| ·质粒的制备与纯化 | 第34页 |
| ·细胞培养与脂质体转染 | 第34-35页 |
| ·稳定转基因/siRNA 细胞系的筛选 | 第35页 |
| ·细胞爬片 HE 染色 | 第35-36页 |
| ·计数法测定细胞生长曲线 | 第36-37页 |
| ·MTT 检测 | 第37-38页 |
| ·PCNA 的细胞免疫化学检测 | 第38-40页 |
| ·Hoechst33258 染色 | 第40页 |
| ·集落形成率检测 | 第40页 |
| ·统计学分析 | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-56页 |
| ·pap 基因的克隆结果 | 第41-42页 |
| ·表达载体 pEGFP-N1-pap 的检测结果及质粒图谱 | 第42-44页 |
| ·干涉载体 pGenesil-1.0-pap(289)和 pGenesil-1.0-pap(485)的检测结果及质粒图谱 | 第44-46页 |
| ·检验载体 pGenesil-1.0-pap(289)-pap、-pap(485)-pap 和-HK-pap 的检测结果及质粒图谱 | 第46-47页 |
| ·最佳干涉载体的筛选结果 | 第47-48页 |
| ·稳定转基因/siRNA 细胞株的鉴定结果 | 第48-49页 |
| ·pap 及其 siRNA 对肝癌细胞 BEL-7402 细胞形态的影响 | 第49-50页 |
| ·pap 及其 siRNA 对肝癌细胞 BEL-7402 细胞生长的影响 | 第50-51页 |
| ·pap 及其 siRNA 对肝癌细胞 BEL-7402 细胞活性的影响 | 第51页 |
| ·pap 及其 siRNA 对肝癌细胞 BEL-7402 细胞增殖的影响 | 第51-53页 |
| ·pap 及其 siRNA 对肝癌细胞 BEL-7402 细胞凋亡的影响 | 第53页 |
| ·pap 及其 siRNA 对肝癌细胞 BEL-7402 集落形成率的影响 | 第53-54页 |
| ·pap 及其 siRNA 对肝癌细胞 BEL-7402 细胞耐药性的影响 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-59页 |
| 3 pap 基因对大鼠肝再生的作用研究 | 第59-71页 |
| ·引言 | 第59页 |
| ·实验材料与实验方法 | 第59-63页 |
| ·主要仪器和主要试剂 | 第59页 |
| ·菌株、载体和实验动物 | 第59-60页 |
| ·大鼠 2/3 肝切除模型制作 | 第60页 |
| ·质粒的大量制备 | 第60页 |
| ·大鼠肝脏的液压转基因 | 第60-61页 |
| ·转基因后大鼠的死亡率 | 第61页 |
| ·转基因后肝组织的显微结构观察 | 第61-63页 |
| ·转基因后大鼠肝系数检测 | 第63页 |
| ·转基因后大鼠肝再生率检测 | 第63页 |
| ·统计学分析 | 第63页 |
| ·结果 | 第63-69页 |
| ·表达载体、干涉载体在大鼠肝内的表达动力学 | 第63-65页 |
| ·转目的质粒后大鼠肝组织结构变化 | 第65-66页 |
| ·转目的质粒后大鼠死亡率 | 第66-67页 |
| ·转目的质粒后对大鼠再生肝生长的影响 | 第67-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 攻读硕士学位期间参加的科研项目和发表的论文 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
